ED-8129 5×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液（DTT）

【保存条件】

-20℃避光保存，有效期12个月（建议分装冻存，避免反复冻融）

【概述】

本产品为经过优化的 5 倍浓缩蛋白上样缓冲液，专门用于蛋白质变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）的样本制备。

变性原理：本产品利用SDS掩盖蛋白电荷差异并破坏氢键，结合DTT高效还原二硫键，使蛋白质彻底去折叠并带上均一负电荷。经变性后的蛋白亚基转化为线性分子，在电泳中的迁移率仅与其分子量相关。

保护功能：本品使用特殊的缓冲体系可防止蛋白在加热变性过程中发生热降解，并维持电泳过程中的pH环境稳定。

可视化：含有溴酚蓝（Bromophenol Blue）染料，便于样本加样及电泳过程监控。

【使用建议】

1. 复溶：将5×蛋白上样缓冲液从-20°C取出，置于室温或37°C水浴中彻底融化并充分混匀。

2. 混合：按照4:1的比例将蛋白样品与上样缓冲液混合（即40μL蛋白样品中加入10μL本品）。注：若蛋白浓度过高，可使用去离子水或PBS提前稀释。 

3. 变性：混匀后，置于80–100°C水浴或金属浴中加热5-10分钟。

4. 离心：冷却至室温后，12,000 × g 离心2–5分钟（旨在沉降变性可能产生的少量不溶物及冷凝液，无沉淀亦正常现象）。

5. 上样：取上清液直接加样于凝胶孔中进行电泳。

【注意事项】

1. SDS析出：在-20°C下SDS极易产生结晶，使用前务必确保沉淀完全溶解。若有必要，可37°C 短时间温育。

2. pH 指示色变：缓冲液中的溴酚蓝对pH敏感。在低温或微酸性环境下可能呈现深棕色，变性加热或进入电泳槽（pH 8.8体系）后会恢复正常的蓝色，不影响产品质量。

3. 安全防护：仅限科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。