产品描述
【保存条件】
室温保存，有效期12个月
【概述】
本产品是用于蛋白印迹实验（Western Blot）中湿法转膜的标准缓冲试剂。
高兼容性：适用于变性及非变性蛋白电泳的转膜过程。
纯净配方：按经典Tris-Glycine体系配制，不含SDS和甲醇，方便用户根据实验需求灵活调整组分。
稳定易存：10×浓缩液设计，有效减少储存空间，操作简便。
【使用方法】
本产品为10×浓缩液，请参照以下步骤配制1×工作液（以配制1 L为例）：
1. 配制比例：
10×电泳转移缓冲液：100 mL
无水乙醇（或甲醇）：200 mL (即20%体积比)
蒸馏水/去离子水：700 mL
注：先将缓冲液与水混合，最后加入甲醇，混匀即可使用。
2. 特殊优化（针对大分子/强疏水蛋白）：
若目标蛋白分子量较大（>100 kDa）或疏水性强，可在工作液中添加适量 SDS（推荐工作浓度：0.02% - 0.1%），以增加蛋白溶解度并促进转移。
3. 保存条件：配制好的1×工作液建议4°C预冷后使用。配制好的室温下稳定保存约2-4周。
【注意事项】
1. 膜的平衡：PVDF 膜在使用前需先用甲醇浸泡活化，再置于工作液中平衡5-10分钟。
2. 结晶处理：环境温度较低时可能会有盐类结晶析出。请置于37°C水浴加热助溶，待完全溶解后再稀释。
3. 安全防护：操作时请穿实验服，佩戴一次性手套及口罩，并在通风环境下操作。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 500ml
应用领域
本产品适用于ES-8190、转膜及封闭、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
配制好的1×工作液建议4°C预冷后使用
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
10× 储液：常温稳定 12 个月；1× 工作液：4℃ 1 周。避免长期高温（>30℃）、反复振荡。
丽春红 S 染膜验证？
转膜完成后将膜浸入丽春红 S 染液 1 分钟 → 流水冲洗 → 拍照记录条带分布；可视化转膜效率与上样均匀性；染料可水洗后继续 WB（不影响 ECL）。
10× 储液稀释要点？
严格 1:10 稀释，加入甲醇/乙醇至终浓度 20%。常温下储液稳定，但不要反复升降温（盐可能结晶）。
转膜温度的重要性？
湿转产热较多，必须在 4℃ 操作 — 室温会导致膜与凝胶界面温度过高，蛋白热变性 / 聚集。冰盒外加冰水浴或在冷室操作。
常见失败原因？
① 转膜不完全 — 电压 / 时间不足；甲醇/乙醇含量不足；② 转膜过头（蛋白穿过膜）— 电压过高或时间过长；③ 条带变形 / 雪花斑 — 三明治装配气泡（用滚筒赶走）；④ 不均匀 — 滤纸 / 海绵未湿透。
可以用于哪些下游应用？
标准 WB 流程 — 转膜后封闭、抗体孵育、ECL 显色（用 EK-5008 等）；多重 WB 串膜；荧光 WB（IRDye 抗体）；磷酸化 / 修饰检测；转膜后丽春红 S 染色验证转膜效率。
甲醇/乙醇的作用？
甲醇作用 — ① 增加蛋白与膜的结合（减少蛋白从膜上「洗脱」）；② 帮助 SDS 从蛋白上解离；③ 激活 PVDF 膜（PVDF 疏水，需甲醇预处理）。无醇版（如 ES-7015）通过其他化学优化达到等效转膜效率。
湿转 vs. 半干转？
湿转 — 时间长（1–2 小时），适合所有分子量蛋白，转膜效率高；半干转 — 时间短（15–30 分钟），适合常规分子量，效率略低。大蛋白（>150 kDa）首选湿转。
使用方法？
1× 工作液配制 — 10× 储液 + 1×甲醇/乙醇 + ((1-1/10-0.2)) 体积水。湿转条件 — 100 V × 60–90 分钟（4℃）；或 30 V × 过夜（4℃）。半干转 — 15–25 V × 15–30 分钟（依蛋白分子量）。
本产品的标准配方与用途？
Towbin 类 Western 蛋白电泳转移缓冲液（配方：25 mM Tris + 192 mM 甘氨酸 + 20% 甲醇，pH 8.3）。10× 储液 — 用前 1:10 稀释（含甲醇）→ 1× 工作液。用于 SDS-PAGE 凝胶上的蛋白转移到 PVDF / 硝酸纤维素膜上。
