产品描述
【保存条件】
-20℃避光保存,有效期12个月
【概述】
DTT(DL-Dithiothreitol,二硫苏糖醇)是一种极强的硫醇类还原剂,其分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25。本产品浓度为1mol/L。
高纯度标准:本品采用进口高纯度原料配置,纯度 > 99%。严格经检测确保无核酸酶(DNase, RNase free)及蛋白酶(Protease free)残留,适用于蛋白质重组、RNA保护及敏感的酶学实验。
作用机制:DTT含有两个巯基,能通过“硫醇-二硫键”交换反应,有效断裂蛋白质分子内或分子间的二硫键,使蛋白质变性或维持其功能基团呈还原状态。
性能优势:相比巯基乙醇,DTT气味更轻、毒性更低。在达到相同还原效果的情况下,DTT 所需浓度仅为巯基乙醇的约 1/7。
【使用方法】
1. 储备液稀释:本品为1 M (1000 mM) 的极高浓度储备液,通常工作浓度范围为1-10 mM。 例:若需在1 mL反应液中加入10 mM DTT,需取本储备液10 μL。
2. 应用场景:
蛋白变性:与SDS上样缓冲液混合,用于电泳前的样品处理。
酶活维护:在缓冲液中添加微量 DTT 以保护酶活性中心的巯基。
RNA 提取:抑制 RNase 活性(通过破坏其二硫键)。
【注意事项】
1. 沉淀现象:低温下可能会产生结晶,此属正常现象。使用前请置于室温或 37°C 水浴片刻,待完全溶解后充分混匀。
2. 安全防护:为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性丁腈手套操作。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 1ml、5ml
应用领域
本产品适用于ES-8187、上样及电泳、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃避光保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存?
-20℃12 个月;4℃ 1-3 个月。避免反复冻融(建议分装小管);解冻后尽快用完。
操作安全?
DTT 中等毒性、刺激性 — 戴手套防护;皮肤接触水洗;废液按一般生化废液处理。气味温和(vs. β-ME)。
DTT 浓度过高的影响?
DTT >100 mM — 部分还原非二硫键的蛋白结构、影响后续色谱、PCR 抑制。WB 上样缓冲液标准 50-100 mM;其他应用 1-10 mM。
可以用于哪些下游应用?
应用:① WB;② 蛋白质谱(RNase / 蛋白酶 free 用于敏感样本);③ 离子交换层析;④ 巯基色谱;⑤ 核酸提取(防止结构干扰)。
常见使用错误?
① 储液过期(氧化失活);② 室温长期放置;③ 与 PMSF 同时大量混合(PMSF 被 DTT 还原失活,但常规裂解液中两者并用,浓度合理无问题);④ 与 IAA / NEM(巯基修饰剂)同时使用(互相中和)。
适用应用?
应用:① WB 上样缓冲液(蛋白变性还原);② 蛋白纯化(保护活性位点);③ RT-PCR(保护 RT 酶活性);④ Sanger 测序(保护测序聚合酶);⑤ 单细胞 RNA-seq(库构建)。
DTT 的不稳定性?
DTT 在水中 — 室温几小时内被空气氧化失活;4℃ 1 周;-20℃ 储液长期。要点 — 储液避免反复冻融;现用现配;与抗氧化剂(如 EDTA)协同。
vs. β-巯基乙醇?
β-ME — 经典、便宜、有刺激性气味 / 毒性;DTT(本品) — 还原力相同、无气味、毒性较低、更稳定(pH 7-8 稳定)。WB 上样缓冲液中两者均可。
使用方法?
① 1 M 储液 -20℃ 长期保存;② 蛋白上样缓冲液 — 终浓度 50-100 mM(变性还原);③ 蛋白纯化 — 终浓度 1-10 mM(保护巯基);④ RT-PCR / 测序 — 终浓度 5-10 mM。
1 M DTT 溶液(DNase, RNase & Protease free)的核心特点?
DTT(Dithiothreitol,二硫苏糖醇) — 强还原剂,断开二硫键(-S-S-)保护蛋白半胱氨酸残基游离巯基(-SH),用于蛋白变性 / 还原 / 还原 PCR / 测序等。本品 — 1 M 高纯度溶液(无核酸酶 / 蛋白酶污染)。

