产品描述
【保存条件】
-20℃保存，有效期1年
【概述】
本产品为5倍浓缩的非变性蛋白电泳专用上样缓冲液。核心特性：不含SDS（阴离子去污剂）和 DTT/β-巯基乙醇（还原剂）。
应用场景：适用于Native-PAGE电泳。旨在保留蛋白质的天然空间构象、亚基组成、二硫键状态以及蛋白质与蛋白质/核酸之间的相互作用。
【使用建议】
1. 复溶：室温或37℃水浴解冻缓冲液，充分摇晃混匀至完全溶解。
2. 混合：按 4:1 的比例将蛋白样品与5×缓冲液混合。
示例：取40μL蛋白样品加入10μL 5×上样缓冲液。若蛋白浓度过高，可用超纯水稀释样品。
3. 上样：混匀后直接上样，严禁加热变性！
4. 离心：冷却至室温后，以10,000–14,000 g离心2分钟，取上清液即可进行上样电泳。
【Native-PAGE运行建议】
1. 低温环境：为防止电泳产热导致蛋白变性，建议在4℃恒温或冰浴 环境下进行电泳。
2. 电压控制：建议使用较低电压（如80-100V），避免电泳槽过热。
3. 缓冲体系：确保电泳槽内缓冲液同样为非变性体系（如ED-8067 10×Tris-甘氨酸电泳缓冲液（无SDS，非变性电泳液））。
【注意事项】
1. 颜色特性：本品含有溴酚蓝指示剂。在-20℃冻存状态下可能呈现深棕色，回复至室温并混匀后即恢复蓝色，不影响使用。
2. 蛋白性质：蛋白在非变性电泳中的迁移率不仅取决于其分子量，还取决于其所带的电荷量和分子形状。
3. 安全防护：为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 10ml
应用领域
本产品适用于ES-8158、上样及电泳、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
5× 储液：-20℃ 12 个月（避免反复冻融）；4℃ 短期保存 1 周内使用。
与 SDS 上样缓冲液的转换？
需要后续 SDS-PAGE 分析时 — 切胶条 → SDS 平衡液（含 SDS + DTT）室温 30 分钟 → 加到 SDS-PAGE 第二维上样孔。
可以用于哪些下游应用？
应用：① 凝胶切片提取蛋白复合物；② 二维 native + SDS-PAGE 分析亚基；③ 凝胶内酶活检测；④ Western blot（用温和转膜条件保留构象）。
常见失败原因？
① 加热样品（变性，丢失天然构象）；② 添加还原剂（破坏二硫键）；③ 电泳产热（必须 4℃）；④ 上样量过大（条带重叠）。
Blue Native PAGE 怎么用？
Blue Native PAGE — 用 Coomassie G-250（蓝色 + 阴离子）替代 SDS，提供阴性电荷而不变性蛋白；本品（无 SDS 版）适合 Blue Native 应用。
电泳条件？
Native PAGE 推荐 — 100 V 恒压 1–2 小时（4℃ 操作避免热变性）。胶浓度根据目标蛋白大小选择 — 7%–10% 通用，4%–20% 梯度胶适合大蛋白复合物。
与 SDS-PAGE 的差异？
Native PAGE — 蛋白保留天然构象，按大小 + 电荷 + 形状综合迁移；SDS-PAGE — 蛋白完全变性，仅按分子量分离。Native 用于研究蛋白复合物；SDS 用于纯度与分子量分析。
Native PAGE 适合哪些研究？
应用：① 蛋白复合物完整性研究；② 酶活原位检测（in-gel activity）；③ 蛋白互作研究（Co-IP 验证）；④ 抗原-抗体复合物分析；⑤ 蛋白聚集 / 寡聚化研究。
使用方法？
蛋白样品 + 5× 上样缓冲液 1:5 比例混合（不加热）→ 直接上样到 native PAGE 凝胶。室温电泳（避免热变性）。
非变性（Native）上样缓冲液的特点？
5× 非变性蛋白上样缓冲液（不含 SDS、不含 DTT/BME 还原剂）。用于 native PAGE — 保留蛋白天然构象、亚基组装与酶活性。配方：50% 甘油 + 0.05% 溴酚蓝 + Tris-HCl pH 6.8。
