产品描述
【保存条件】
室温保存,有效期12个月
【概述】
SDS 细胞裂解液是一种高强度的蛋白变性裂解液,含有较高浓度的去污剂(SDS)。它能迅速破坏细胞膜、核膜及蛋白质的二、三级结构。
核心用途:适用于常规的 SDS-PAGE、Western Blot 及 染色质免疫共沉淀 (ChIP) 实验。
产品特点:裂解极其迅速彻底,能有效灭活各种内源性蛋白酶(如磷酸酶、蛋白水解酶),防止蛋白降解。
兼容性:广泛用于动物、植物组织及细胞;配合溶菌酶或破壁酶后也可用于细菌及真菌。
【使用建议】
1. 准备工作:
融解:若发现沉淀析出,请置于37°C快速融解。
抑制剂添加:临用前,根据实验需求加入PMSF或蛋白酶抑制剂(如ES-8135)或磷酸酶抑制剂(如ES-8136)。
2. 培养细胞处理
1) 贴壁细胞:
① 吸除培养液,用冰冷PBS洗涤一次。
② 按6孔板每孔加入150–250 μL含抑制剂的裂解液(参考下表)。
③ 移液器吹打数下。由于SDS活性极强,细胞通常在接触后1-2秒内即裂解。在冰上继续静置孵育1-5分钟。
2) 悬浮细胞:
① 1,000–15,00×g离心5分钟收集细胞。吸除培养液,用冰冷PBS洗涤1-2次,再次离心沉淀。
② 按比例加入含抑制剂的裂解液(建议每100万细胞使用100–200 μL)。
③ 移液器吹打数下充分混匀,冰上裂解1-5分钟。充分裂解后应呈清亮状,无明显细胞沉淀。
3) 微生物:
① 4,000–6,000×g离心5分钟。弃上清,轻轻弹击管底使沉淀松动。
② 细菌建议预先使用溶菌酶消化,酵母建议使用破壁酶消化。
③ 按比例加入含抑制剂的裂解液(建议1mL菌液OD600=1.5-2.0加入100-200μL裂解液)。
④ 移液器吹打数下充分混匀,冰上裂解3-10分钟。微生物基因组含量高,裂解后若粘稠,请务必使用探头式超声波处理器(冰浴,20%功率,3-5秒,循环数次)
3. 组织样品处理
① 预处理:将组织剪切成细小碎片。
② 比例:按照每 20 mg 组织加入 150–250 μL 裂解液的比例加入(含抑制剂)。
③ 破碎:使用玻璃匀浆器或组织研磨仪彻底粉碎(或采用液氮研磨法)。若组织极其微小,也可直接加入裂解液后强烈涡旋。冰上裂解5-10分钟。
④ 离心:10,000–14,000×g,4°C离心3–5分钟,取上清蛋白,推荐使用 BCA 法 (EK-5001) 测定蛋白浓度。
【注意事项】
1. 浓度测定:本品含有高浓度SDS,会产生强烈的颜色背景干扰。严禁使用Bradford 法(考马斯亮蓝),必须使用BCA 蛋白浓度测定试剂盒 (EK-5001)。
2. 粘稠度处理:强力裂解会释放大量基因组DNA,导致样品极其粘稠。建议通过短暂超声破碎处理以降低粘度,改善上样效果。
3. 安全防护:SDS 对皮肤有刺激性,操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。本试剂仅用于科研领域,不能用于临床诊断。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml
应用领域
本产品适用于ES-8151、蛋白提取、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存?
室温保存,有效期 12 个月。——本品与其他裂解液不同,可室温保存(因 SDS 为稳定离子型去垢剂);融解:若发现沉淀析出,请置于 37℃ 快速融解。提取后蛋白:短期 4℃;长期 -80℃ 分装保存。
可用于哪些下游应用?
SDS-PAGE、Western Blot、染色质免疫共沉淀(ChIP)。扩展应用:① 总蛋白定量(仅 BCA 法);② 难溶蛋白释放;③ 病毒裂解物制备。不适合:所有非变性应用(请用 ES-8140 / ES-8142 等温和版本)。
与 RIPA 三档的选择?
ES-8151 SDS 裂解液比所有 RIPA 三档(ES-8148/8149/8150)都更强力——RIPA 三档的 SDS 浓度只有 0.05–0.1%,本品的 SDS 浓度更高。适用场景:① 难裂解的硬组织 / 致密细胞;② 染色质相关蛋白彻底释放(ChIP);③ 极顽固蛋白(如膜蛋白聚集体);④ 快速灭活内源蛋白酶。不适合:所有需要保留蛋白互作 / 活性的实验(Co-IP / 酶活 / Native-PAGE)。
粘稠度处理?
粘稠度处理:强力裂解会释放大量基因组 DNA,导致样品极其粘稠。建议通过短暂超声破碎处理以降低粘度,改善上样效果。超声需冰浴(冰水浴 20% 功率 3–5 秒循环数次),防止温度上升变性蛋白。
为什么必须用 BCA 不能用 Bradford?
重要注意:浓度测定:本品含有高浓度 SDS,会产生强烈的颜色背景干扰。严禁使用 Bradford 法(考马斯亮蓝),必须使用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒(EK-5001)。——RIPA 三档说不建议,SDS 裂解液直接说严禁。即使用去垢剂兼容版的 Bradford(EK-5004)也可能受高浓度 SDS 干扰,建议直接 BCA。
组织样品流程?
① 预处理:组织剪切成细小碎片;② 比例:每 20 mg 组织 + 150–250 µL 含抑制剂裂解液;③ 破碎:玻璃匀浆器或组织研磨仪彻底粉碎(或液氮研磨法),冰上裂解 5–10 min;④ 离心:10,000–14,000×g,4℃ 离心 3–5 min,取上清。
微生物样品的特殊处理?
微生物:4,000–6,000×g 离心 5 min 收集 + 弹击管底分散;细菌建议预先使用溶菌酶消化,酵母建议使用破壁酶消化;按 每 1 mL 菌液 OD600=1.5–2.0 加入 100–200 µL 裂解液;移液器吹打后冰上裂解 3–10 min。注意:'微生物基因组含量高,裂解后若粘稠,请务必使用探头式超声波处理器(冰浴,20% 功率,3–5 秒,循环数次)'。
完整流程参数(细胞)?
① 贴壁细胞:吸除培养液 + 冰冷 PBS 洗涤一次 → 6 孔板每孔 150–250 µL 含抑制剂裂解液 → 移液器吹打数下(特别提示:由于 SDS 活性极强,细胞通常在接触后 1–2 秒内即裂解) → 冰上继续静置孵育 1–5 min;② 悬浮细胞:1,000–1,500×g 离心 5 min 收集 + PBS 洗 1–2 次 → 每 100 万细胞 100–200 µL 含抑制剂裂解液 → 移液器吹打 → 冰上裂解 1–5 min(充分裂解后应呈清亮状,无明显细胞沉淀)。
抑制剂如何添加?
临用前加入 PMSF 或蛋白酶抑制剂(如 ES-8135)或磷酸酶抑制剂(如 ES-8136)。虽然 SDS 本身可灭活内源蛋白酶,但临用前加抑制剂可作为双重保险,特别是研究磷酸化蛋白时必加 ES-8136 或一站式 ES-8137。
本裂解液的核心特点?
SDS 细胞裂解液是一种高强度的蛋白变性裂解液,含有较高浓度的去污剂(SDS)。它能迅速破坏细胞膜、核膜及蛋白质的二、三级结构。核心用途:适用于常规的 SDS-PAGE、Western Blot 及染色质免疫共沉淀(ChIP)实验。产品特点:裂解极其迅速彻底,能有效灭活各种内源性蛋白酶(如磷酸酶、蛋白水解酶),防止蛋白降解。兼容性:广泛用于动物、植物组织及细胞;配合溶菌酶或破壁酶后也可用于细菌及真菌。

