产品描述
【保存条件】
-20°C保存，有效期1年
【概述】
本产品为经过深度优化的全能型（All-in-one）浓缩抑制剂混合物，专为保护细胞或组织裂解过程中的蛋白质完整性而设计。
双重保护：同时防止蛋白质的酶促降解与去磷酸化。
组成精选：包含 AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin 等激酶活性；以及氟化钠、焦磷酸钠、β-甘油磷酸钠、正钒酸钠 等磷酸酶激酶。
广谱高效：蛋白酶抑制：丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、酸性蛋白酶及氨基肽酶。磷酸酶抑制：丝氨酸/苏氨酸（Ser/Thr）磷酸酶、酪氨酸（Tyr）磷酸酶、酸性及碱性磷酸酶。
【使用方法】
1. 融化混匀：使用前从-20℃取出，室温或手心温育至完全融化。若发现微量沉淀，请轻轻震荡混匀，不影响使用。
2. 添加比例：按1:50的比例将本品加入裂解液（如 RIPA）或实验缓冲液中。
快速参考：向1 mL裂解液中加入 20 μL抑制剂混合物。每1 mL×2管套装可配制100 mL 完全裂解液。
3. 现配现用（关键）：含有抑制剂的裂解液必须现用现配。由于部分成分在水相环境中极易降解（如AEBSF），严禁将配好的裂解液长期保存或反复冻融。
【注意事项】
1. 安全防护：本品含有钒酸盐和氟化物，具有一定的毒性和刺激性。操作时请严格遵守实验室安全规范，佩戴实验服、一次性手套及口罩。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 1ml×2管、1ml×10管
应用领域
本产品适用于ES-8137、蛋白酶抑制剂、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20°C保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
50× 储液：-20℃ 12 个月（避免反复冻融，建议分装小管）；1× 工作液（裂解液中）— 临用前现配，不可长期保存。
操作流程示例？
磷酸化 WB 流程：① 细胞收集 → PBS 洗 → 预冷裂解液（含 1× 蛋白酶 + 磷酸酶抑制剂）；② 冰浴 30 分钟；③ 13,000 × g 4℃ 离心；④ 上清 = 含磷酸化蛋白的样品；⑤ 立即上 SDS-PAGE 或 -80℃ 分装储存。
与商品化对比？
本品与 Thermo Halt Combined / Roche cOmplete + PhosSTOP 等商品化 50× / 100× 蛋白酶 + 磷酸酶混合抑制剂等效，性价比有优势。
常见使用错误？
① 储液反复冻融（部分组分不稳定，建议分装小管）；② 未临用前加入（部分抑制剂半衰期短）；③ 长期储存于裂解液中（活性下降）；④ 加入后高温处理（部分抑制剂热不稳定）。
为什么磷酸化研究必加？
磷酸酶在 4℃ 仍活跃 — 细胞裂解后短时间内（数分钟）磷酸化基团可能被去除，造成研究目标失活。临用前加 1× 抑制剂才能保留磷酸化状态。
组分构成与抑制范围？
核心组分：组成精选：包含 AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin 等（蛋白酶抑制）；以及 氟化钠、焦磷酸钠、β-甘油磷酸钠、正钒酸钠（磷酸酶抑制）。广谱高效：① 蛋白酶抑制：丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、酸性蛋白酶及氨基肽酶；② 磷酸酶抑制：丝氨酸/苏氨酸（Ser/Thr）磷酸酶、酪氨酸（Tyr）磷酸酶、酸性及碱性磷酸酶。
与单独添加蛋白酶 / 磷酸酶抑制剂的对比？
vs. 分别添加 — 蛋白酶抑制剂（ES-8135 100×）+ 磷酸酶抑制剂（ES-8136 100×）= 两步操作；本品一步完成。优势 — 操作简化、批间一致、价格相近。
典型应用？
应用：① 磷酸化 WB / IP / 共免疫沉淀（最主要）；② 细胞信号通路研究；③ 激酶 / 磷酸酶活性测定；④ 磷酸化质谱（phospho-proteomics）；⑤ 关键蛋白研究的全面保护。
使用方法？
临用前加入 — 取 1× 终浓度（即 1:50 稀释本品）加到裂解液中。示例 — 100 μL 裂解液 + 2 μL 50× 抑制剂 → 1× 工作浓度。注意 — 配制好的裂解液不可长期保存，建议临用前加入。
本试剂的核心特点？
本试剂是 50× 浓缩广谱蛋白酶 + 磷酸酶抑制剂混合物，覆盖所有类型蛋白酶（丝氨酸 / 半胱氨酸 / 天冬氨酸 / 金属蛋白酶）+ 所有类型磷酸酶（丝/苏 / 酪氨酸磷酸酶等）。优势 — 一管同时含两类抑制剂，简化操作步骤；磷酸化研究「一站式」使用。
