【保存条件】
-20℃避光保存,有效期12个月
【概述】
苯甲基磺酰氟(PMSF)是一种高效、广谱的丝氨酸蛋白酶抑制剂(如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、凝血酶)和乙酰胆碱酯酶抑制剂。
作用机制:通过特异性结合蛋白酶活性位点的丝氨酸残基,抑制其催化活性。
应用场景:广泛应用于细胞裂解、组织匀浆及蛋白纯化过程中,防止内源性蛋白酶导致的蛋白质降解。
溶剂体系:本产品采用无水异丙醇配制,能最大限度锁定 PMSF 分子的化学活性。
【使用方法】
1. 工作浓度:常用工作浓度为1 mM。
稀释参考:将100 mM 储存液按 1:100 的比例加入裂解缓冲液或纯化缓冲液中。
2. 现用现配(关键):PMSF在水相缓冲液中极不稳定,水解速度极快。
稳定性参考:在pH 7.0的水溶液中,其半衰期约为110分钟。pH 值或温度越高,水解速度越快。
操作要求:必须在实验操作前(如细胞破碎、上柱纯化)将PMSF加入缓冲液。如果实验流程超过1小时,建议每间隔1小时补充一次。
【注意事项】
1. 结晶处理:在 -20℃下,溶剂异丙醇可能会出现结晶。操作:使用前将其置于室温,待结晶完全溶解并摇匀后即可使用。不要长时间暴露在高温下。
2. 溶剂挥发:异丙醇易燃且易挥发。使用后必须立即盖紧瓶盖,远离火源及高温环境。
3. 抑制局限性:PMSF对金属蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶或部分半胱氨酸蛋白酶无效。如样本成分复杂,建议配合其他抑制剂(如ES-8135蛋白酶抑制剂混合物Cocktail(通用型, 100×))使用。
4. 安全防护:必须佩戴防护手套、实验服及口罩,建议在通风橱内操作。