产品描述
【保存条件】
-20℃避光保存，有效期12个月
【概述】
苯甲基磺酰氟（PMSF）是一种高效、广谱的丝氨酸蛋白酶抑制剂（如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、凝血酶）和乙酰胆碱酯酶抑制剂。
作用机制：通过特异性结合蛋白酶活性位点的丝氨酸残基，抑制其催化活性。
应用场景：广泛应用于细胞裂解、组织匀浆及蛋白纯化过程中，防止内源性蛋白酶导致的蛋白质降解。
溶剂体系：本产品采用无水异丙醇配制，能最大限度锁定 PMSF 分子的化学活性。
【使用方法】
1. 工作浓度：常用工作浓度为1 mM。
稀释参考：将100 mM 储存液按 1:100 的比例加入裂解缓冲液或纯化缓冲液中。
2. 现用现配（关键）：PMSF在水相缓冲液中极不稳定，水解速度极快。
稳定性参考：在pH 7.0的水溶液中，其半衰期约为110分钟。pH 值或温度越高，水解速度越快。
操作要求：必须在实验操作前（如细胞破碎、上柱纯化）将PMSF加入缓冲液。如果实验流程超过1小时，建议每间隔1小时补充一次。
【注意事项】
1. 结晶处理：在 -20℃下，溶剂异丙醇可能会出现结晶。操作：使用前将其置于室温，待结晶完全溶解并摇匀后即可使用。不要长时间暴露在高温下。
2. 溶剂挥发：异丙醇易燃且易挥发。使用后必须立即盖紧瓶盖，远离火源及高温环境。
3. 抑制局限性：PMSF对金属蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶或部分半胱氨酸蛋白酶无效。如样本成分复杂，建议配合其他抑制剂（如ES-8135蛋白酶抑制剂混合物Cocktail(通用型, 100×)）使用。
4. 安全防护：必须佩戴防护手套、实验服及口罩，建议在通风橱内操作。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 10ml、10×10ml
应用领域
本产品适用于ES-8134、蛋白酶抑制剂、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃避光保存
常见问题 (FAQ)
保存与安全防护？
-20℃ 避光保存，有效期 12 个月。安全防护（重要）：必须佩戴防护手套、实验服及口罩，建议在通风橱内操作。——PMSF 是有毒化合物（神经毒性），异丙醇为有机溶剂，操作时严格防护；废液按危险化学废液处理。
可用于哪些应用场景？
适用：① WB 样品制备（防止蛋白条带降解或弥散）；② Co-IP / IP（保护抗原抗体复合物）；③ 酶活检测（防止内源蛋白酶干扰目的酶活性）；④ 蛋白质组学样本制备；⑤ 蛋白纯化（IMAC、GST、Strep 等亲和层析全程加入）。不适用：含金属蛋白酶活性测定的样品（PMSF 不抑制金属蛋白酶，但其他蛋白酶被抑制后金属酶活性反而更易被检测）。
与 ES-8137（蛋白酶+磷酸酶 50× All in one）的关系？
ES-8137（蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物 50× All-in-one）：包含蛋白酶抑制剂 + 磷酸酶抑制剂。如研究磷酸化蛋白，直接用 ES-8137比 PMSF + 单独磷酸酶抑制剂更省事；如不研究磷酸化只防降解，PMSF + ES-8135 即可。
与 ES-8135（cocktail）的关系？
ES-8134（PMSF 单组分）vs ES-8135（蛋白酶抑制剂 cocktail）：① PMSF 单一：仅抑制丝氨酸蛋白酶，不能覆盖金属蛋白酶等；② ES-8135 cocktail：包含 Leupeptin、Pepstatin A、Aprotinin、E-64 等多组分，覆盖丝氨酸 / 半胱氨酸 / 酸性蛋白酶 / 氨基肽酶。建议：① 简单样品 → ES-8134 即可；② 复杂样品（组织、临床样品）→ PMSF + ES-8135 cocktail 联用最佳。
在哪些缓冲液中需要补加 PMSF？
推荐场景：① 裂解液：所有 RIPA / NP-40 / SDS 类裂解液在使用前 1:100 加入；② 蛋白纯化缓冲液：上柱前 1 mM 加入，1 小时后补加；③ 匀浆缓冲液：组织匀浆前现配；④ 细胞分馏缓冲液：胞质 / 核 / 膜分离时各步加入；⑤ 冰浴样品：低温下半衰期延长但仍需注意。避免：母液稀释配制工作液后长期存放。
异丙醇结晶如何处理？
结晶处理：在 -20℃ 下，溶剂异丙醇可能会出现结晶。操作：使用前将其置于室温，待结晶完全溶解并摇匀后即可使用。不要长时间暴露在高温下。溶剂挥发：异丙醇易燃且易挥发。使用后必须立即盖紧瓶盖，远离火源及高温环境。
PMSF 抑制剂的局限性？
抑制局限性：PMSF 对金属蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶或部分半胱氨酸蛋白酶无效。如样本成分复杂，建议配合其他抑制剂（如 ES-8135 蛋白酶抑制剂混合物 Cocktail（通用型, 100×））使用。——PMSF 是单一靶点抑制剂，复杂样品建议联用 cocktail 类广谱抑制剂。
为什么必须现用现配？
核心注意：现用现配（关键）：PMSF 在水相缓冲液中极不稳定，水解速度极快。稳定性参考：在 pH 7.0 的水溶液中，其半衰期约为 110 分钟。pH 值或温度越高，水解速度越快。操作要求：必须在实验操作前（如细胞破碎、上柱纯化）将 PMSF 加入缓冲液。如果实验流程超过 1 小时，建议每间隔 1 小时补充一次。
工作浓度与添加方式？
工作浓度：常用工作浓度为 1 mM。稀释参考：将 100 mM 储存液按 1:100 的比例加入裂解缓冲液或纯化缓冲液中。例：1 mL 裂解液 + 10 µL 本试剂 = 1 mM 终浓度。
PMSF 是什么？作用机制？
苯甲基磺酰氟（PMSF）是一种高效、广谱的丝氨酸蛋白酶抑制剂（如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、凝血酶）和乙酰胆碱酯酶抑制剂。作用机制：通过特异性结合蛋白酶活性位点的丝氨酸残基，抑制其催化活性。应用场景：广泛应用于细胞裂解、组织匀浆及蛋白纯化过程中，防止内源性蛋白酶导致的蛋白质降解。溶剂体系：本产品采用无水异丙醇配制，能最大限度锁定 PMSF 分子的化学活性。
