【保存条件】
-20°C保存,有效期12个月
【概述】
在细胞或组织裂解过程中,内源性磷酸酶会被大量释放,迅速导致蛋白质去磷酸化,从而干扰蛋白质功能、信号通路及 Western Blot(WB)中磷酸化抗体的检测。本产品为经过优化的 100 倍浓缩水溶液,包含多种广谱磷酸酶抑制剂(如ß-甘油磷酸钠、氟化钠、钼酸钠、正钒酸钠、酒石酸钠等):
抑制范围:广泛抑制酸性磷酸酶(Acid Phosphatases)、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatases)以及丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)和酪氨酸(Tyr)磷酸酶。
适用广泛:适用于动物、植物、细菌及真菌等各类生物样本的蛋白提取及后续实验。
【使用方法】
1. 准备工作:将储存液从-20℃取出,室温融化。本产品为水溶液,若发现微量沉淀,请轻轻震荡混匀后使用。
2. 添加比例:按1:100 的比例将本品加入到裂解液(如 RIPA)或各种实验缓冲液中。
示例:向1 mL裂解液中加入10 μL磷酸酶抑制剂混合物。
3. 现配现用(关键):含有抑制剂的裂解液必须现用现配。不建议将配好的裂解液长期储存或反复冻融,以免抑制剂活性下降。
【注意事项】
1. 建议联用:提取总蛋白或磷酸化蛋白时,建议将本品与蛋白酶抑制剂混合物(ES-8135)联用,以同时防止蛋白质的降解与去磷酸化。
2. 安全防护:本品含有钒酸盐和氟化物,具有一定的毒性和刺激性。操作时请严格遵守实验室安全规范,佩戴实验服、一次性手套及口罩。