产品描述
【保存条件】
-20°C保存,有效期12个月
【概述】
在细胞或组织裂解过程中,内源性磷酸酶会被大量释放,迅速导致蛋白质去磷酸化,从而干扰蛋白质功能、信号通路及 Western Blot(WB)中磷酸化抗体的检测。本产品为经过优化的 100 倍浓缩水溶液,包含多种广谱磷酸酶抑制剂(如ß-甘油磷酸钠、氟化钠、钼酸钠、正钒酸钠、酒石酸钠等):
抑制范围:广泛抑制酸性磷酸酶(Acid Phosphatases)、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatases)以及丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)和酪氨酸(Tyr)磷酸酶。
适用广泛:适用于动物、植物、细菌及真菌等各类生物样本的蛋白提取及后续实验。
【使用方法】
1. 准备工作:将储存液从-20℃取出,室温融化。本产品为水溶液,若发现微量沉淀,请轻轻震荡混匀后使用。
2. 添加比例:按1:100 的比例将本品加入到裂解液(如 RIPA)或各种实验缓冲液中。
示例:向1 mL裂解液中加入10 μL磷酸酶抑制剂混合物。
3. 现配现用(关键):含有抑制剂的裂解液必须现用现配。不建议将配好的裂解液长期储存或反复冻融,以免抑制剂活性下降。
【注意事项】
1. 建议联用:提取总蛋白或磷酸化蛋白时,建议将本品与蛋白酶抑制剂混合物(ES-8135)联用,以同时防止蛋白质的降解与去磷酸化。
2. 安全防护:本品含有钒酸盐和氟化物,具有一定的毒性和刺激性。操作时请严格遵守实验室安全规范,佩戴实验服、一次性手套及口罩。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 1ml、1ml×5管
应用领域
本产品适用于ES-8136、蛋白酶抑制剂、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20°C保存
常见问题 (FAQ)
保存与安全防护?
-20℃ 保存,有效期 12 个月。
与 ES-8135 / ES-8137 的具体差异?
三款产品定位不同:ES-8135 为蛋白酶抑制剂(100×,DMSO 溶液),适用于防止蛋白降解、不涉及磷酸化研究的场景;ES-8136(本品)为磷酸酶抑制剂(100×,水溶液),专用于保护样品磷酸化状态;ES-8137 则将蛋白酶与磷酸酶抑制剂合二为一(50×,水溶液),需要双重保护时使用最为方便。
可用于哪些应用场景?
适用:① 磷酸化蛋白 Western Blot(必加,否则信号丢失);② 激酶 / 磷酸酶活性研究;③ 信号通路活性研究(PI3K-AKT、MAPK、JAK-STAT 等);④ 质谱磷酸化蛋白组学(IMAC / TiO₂ 富集前必加);⑤ 磷酸化抗体 IP(保护抗原磷酸化状态);⑥ 细胞分馏 / 亚细胞器提取磷酸化蛋白。
与 ES-8137(All in one)的选择?
ES-8136 + ES-8135:分别管理蛋白酶和磷酸酶抑制剂,灵活但操作麻烦;ES-8137:蛋白酶 + 磷酸酶混合(50×)All in one,一次添加同时防降解 + 去磷酸化。选择:① 常规磷酸化研究 → ES-8137 All in one(推荐,省事);② 需要灵活控制各组分配比 → ES-8136 + ES-8135 分开;③ 不研究磷酸化只防降解 → 单用 ES-8135。
与蛋白酶抑制剂联用?
建议联用:提取总蛋白或磷酸化蛋白时,建议将本品与蛋白酶抑制剂混合物(ES-8135)联用,以同时防止蛋白质的降解与去磷酸化。——磷酸酶抑制剂只防去磷酸化,不防蛋白降解;蛋白酶抑制剂只防降解,不防去磷酸化。两者覆盖不同酶类,必须联合使用才能完整保护磷酸化蛋白。
覆盖哪些磷酸酶类型?
核心组分:① β-甘油磷酸钠(ß-glycerophosphate):通用磷酸酶抑制剂;② 氟化钠(NaF):广谱磷酸酶抑制剂,特别 Ser/Thr 磷酸酶;③ 钼酸钠(Na₂MoO₄):酸性磷酸酶抑制剂;④ 正钒酸钠(Na₃VO₄):Tyr 磷酸酶抑制剂(PTP1B、CD45 等);⑤ 酒石酸钠:辅助抑制酸性磷酸酶。组合后覆盖 酸性 / 碱性 / Ser/Thr / Tyr 磷酸酶全谱。
使用方法与配比?
① 准备工作:将储存液从 -20℃ 取出,室温融化。本产品为水溶液(不是 DMSO),若发现微量沉淀,请轻轻震荡混匀后使用;② 添加比例:按 1:100 的比例将本品加入到裂解液(如 RIPA)或各种实验缓冲液中。示例:向 1 mL 裂解液中加入 10 µL 磷酸酶抑制剂混合物;③ 现配现用(关键):含有抑制剂的裂解液必须现用现配,不建议长期储存或反复冻融,以免抑制剂活性下降。
为什么研究磷酸化蛋白必须加?
核心说明:在细胞或组织裂解过程中,内源性磷酸酶会被大量释放,迅速导致蛋白质去磷酸化,从而干扰蛋白质功能、信号通路及 Western Blot(WB)中磷酸化抗体的检测。——磷酸化蛋白没有磷酸酶抑制剂保护时几分钟内就会被去磷酸化,导致 phospho-WB 完全失败。
本产品的核心特点?
本产品为经过优化的 100 倍浓缩水溶液,包含多种广谱磷酸酶抑制剂(如 ß-甘油磷酸钠、氟化钠、钼酸钠、正钒酸钠、酒石酸钠等):抑制范围:广泛抑制酸性磷酸酶(Acid Phosphatases)、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatases)以及丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)和酪氨酸(Tyr)磷酸酶。适用广泛:适用于动物、植物、细菌及真菌等各类生物样本的蛋白提取及后续实验。

