产品描述
【保存条件】
-20°C保存，有效期12个月
【使用建议】
在细胞或组织裂解过程中，内源性蛋白酶会被大量释放，导致目的蛋白降解，严重影响 Western Blot、Co-IP及蛋白纯化等后续实验结果。本产品为经过优化配比的100倍浓缩 DMSO溶液，包含了针对多种蛋白酶的特异性抑制剂：
组分构成：主要由 Leupeptin、Pepstatin A、Aprotinin、E-64 等组成。
抑制范围：涵盖广谱的丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、酸性蛋白酶及氨基肽酶（如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等）。
灵活配置：单独配有 EDTA 溶液。EDTA 通过螯合金属离子抑制金属蛋白酶，用户可根据实验需求（如是否需要保留金属离子依赖性酶活性）自主决定是否添加。
【使用方法】
1. 准备裂解液：使用前将储存液置于室温或手心温育使DMSO充分融化，并轻微震荡混匀。
2. 比例添加：按 1:100 的比例将抑制剂混合物加入裂解液（如 RIPA）或缓冲液中。
示例：向 1 mL 裂解液中加入 10 μL 抑制剂混合物（ES-8135-A）。
EDTA 添加：若需同时抑制金属蛋白酶，则按 1:100 比例额外加入 EDTA（ES-8135-B）。 3. 现配现用：含有抑制剂的裂解液必须现用现配。抑制剂在水相环境中稳定性有限，不建议配制成工作液后长期储存或反复冻融。
【注意事项】
1. EDTA使用禁忌：若后续实验涉及金属离子依赖性反应（如某些酶活性检测）或蛋白纯化（如 His-tag 镍柱纯化），请勿添加 EDTA，否则会干扰金属离子结合。
2. 溶剂特性：本产品溶剂为 DMSO，在 4℃或-20℃下会发生冻结。使用前请务必确保其完全融化。
3. 安全性：本品含多种生物活性物质具有一定刺激性。操作时请佩戴实验服及一次性手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 1ml、1ml×5管
应用领域
本产品适用于ES-8135、蛋白酶抑制剂、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20°C保存
常见问题 (FAQ)
保存与安全防护？
-20℃ 保存，有效期 12 个月。安全性：本品含多种生物活性物质具有一定刺激性。操作时请佩戴实验服及一次性手套。分装建议：使用频繁可分装小管（如 100 µL/管）-20℃ 保存避免反复冻融大瓶。
可用于哪些应用场景？
适用：① WB 样品制备（保护蛋白完整性）；② Co-IP / IP（保护抗原抗体复合物）；③ 酶活检测（防止目的酶被内源蛋白酶降解，注意 EDTA 使用禁忌）；④ 蛋白纯化全程（注意 IMAC 不要加 EDTA）；⑤ 蛋白质组学样本制备；⑥ 细胞分馏 / 亚细胞器提取（搭配 EK-6005/6010/6100/6105 等蛋白提取试剂盒使用）。
与 ES-8137（ All in one 50×）的选择？
ES-8135：仅蛋白酶抑制剂（100×）+ 单独 EDTA；ES-8136：仅磷酸酶抑制剂（100×）；ES-8137：蛋白酶 + 磷酸酶混合（50×）All in one 。选择：① 不研究磷酸化 → ES-8135（更经济）；② 研究磷酸化但希望分别控制 EDTA → ES-8135 + ES-8136；③ 研究磷酸化且求一站式便利 → ES-8137。
与 ES-8134（PMSF）的关系？
ES-8134（PMSF 单组分）：仅抑制丝氨酸蛋白酶（与 ES-8135 中的 Aprotinin/Leupeptin 部分功能重叠），但 PMSF 半衰期短需补加；ES-8135 cocktail：多组分覆盖更广，DMSO 中稳定。建议：① 简单样品 → ES-8134 或 ES-8135 任选；② 复杂样品 → PMSF + ES-8135 cocktail 联用最佳（双重保险，PMSF 立即生效，cocktail 长效维持）；③ 含磷酸化研究 → ES-8135 + ES-8136（磷酸酶）或直接用 ES-8137 一站式。
覆盖哪些蛋白酶类型？
核心组分：① Leupeptin：抑制丝氨酸蛋白酶（胰蛋白酶）和半胱氨酸蛋白酶（papain、cathepsin B）；② Pepstatin A：抑制酸性蛋白酶（pepsin、cathepsin D、HIV protease）；③ Aprotinin：抑制丝氨酸蛋白酶（trypsin、chymotrypsin、plasmin）；④ E-64：抑制半胱氨酸蛋白酶（papain、calpain、cathepsin B/L）。联用 ES-8135-A + ES-8135-B（EDTA） 可覆盖几乎所有四类蛋白酶。未覆盖：金属酶（需 EDTA）、苏氨酸蛋白酶（需 PMSF 类）。
DMSO 溶剂的特性？
溶剂特性：本产品溶剂为 DMSO，在 4℃ 或 -20℃ 下会发生冻结。使用前请务必确保其完全融化。建议：① 室温融化 或 手心温育；② 轻微震荡混匀；③ 避免反复冻融——DMSO 反复冻融会损失抑制剂活性。可分小管 -20℃ 保存（每次取一管用完）。
什么时候不应该加 EDTA？
注意：EDTA 使用禁忌：若后续实验涉及金属离子依赖性反应（如某些酶活性检测）或蛋白纯化（如 His-tag 镍柱纯化），请勿添加 EDTA，否则会干扰金属离子结合。——具体场景：① IMAC 镍柱亲和纯化 His-tag 蛋白；② 金属酶活性测定（碳酸酐酶、锌指蛋白等）；③ 某些转录因子 EMSA（依赖 Zn²⁺）；④ 磷酸酶活性检测（部分需要 Mg²⁺ / Mn²⁺）。
使用方法与配比？
① 准备裂解液：使用前将储存液置于室温或手心温育使 DMSO 充分融化，并轻微震荡混匀；② 比例添加：按 1:100 的比例将抑制剂混合物加入裂解液（如 RIPA）或缓冲液中。示例：向 1 mL 裂解液中加入 10 µL 抑制剂混合物（ES-8135-A）；③ EDTA 添加：若需同时抑制金属蛋白酶，则按 1:100 比例额外加入 EDTA（ES-8135-B）；④ 现配现用：含有抑制剂的裂解液必须现用现配，不建议配制成工作液后长期储存或反复冻融。
包装组成？
ES-8135-A：Protease Inhibitor Mixture (100×)，1 mL 或 1 mL × 5 管；ES-8135-B：EDTA Solution (100×)，1 mL 或 1 mL × 5 管。
本产品的核心特点？
本产品为经过优化配比的 100 倍浓缩 DMSO 溶液，包含了针对多种蛋白酶的特异性抑制剂：组分构成：主要由 Leupeptin、Pepstatin A、Aprotinin、E-64 等组成。抑制范围：涵盖广谱的丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、酸性蛋白酶及氨基肽酶（如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等）。灵活配置：单独配有 EDTA 溶液——EDTA 通过螯合金属离子抑制金属蛋白酶，用户可根据实验需求自主决定是否添加。
