【保存条件】
-20°C保存,有效期12个月
【使用建议】
在细胞或组织裂解过程中,内源性蛋白酶会被大量释放,导致目的蛋白降解,严重影响 Western Blot、Co-IP及蛋白纯化等后续实验结果。本产品为经过优化配比的100倍浓缩 DMSO溶液,包含了针对多种蛋白酶的特异性抑制剂:
组分构成:主要由 Leupeptin、Pepstatin A、Aprotinin、E-64 等组成。
抑制范围:涵盖广谱的丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、酸性蛋白酶及氨基肽酶(如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等)。
灵活配置:单独配有 EDTA 溶液。EDTA 通过螯合金属离子抑制金属蛋白酶,用户可根据实验需求(如是否需要保留金属离子依赖性酶活性)自主决定是否添加。
【使用方法】
1. 准备裂解液:使用前将储存液置于室温或手心温育使DMSO充分融化,并轻微震荡混匀。
2. 比例添加:按 1:100 的比例将抑制剂混合物加入裂解液(如 RIPA)或缓冲液中。
示例:向 1 mL 裂解液中加入 10 μL 抑制剂混合物(ES-8135-A)。
EDTA 添加:若需同时抑制金属蛋白酶,则按 1:100 比例额外加入 EDTA(ES-8135-B)。 3. 现配现用:含有抑制剂的裂解液必须现用现配。抑制剂在水相环境中稳定性有限,不建议配制成工作液后长期储存或反复冻融。
【注意事项】
1. EDTA使用禁忌:若后续实验涉及金属离子依赖性反应(如某些酶活性检测)或蛋白纯化(如 His-tag 镍柱纯化),请勿添加 EDTA,否则会干扰金属离子结合。
2. 溶剂特性:本产品溶剂为 DMSO,在 4℃或-20℃下会发生冻结。使用前请务必确保其完全融化。
3. 安全性:本品含多种生物活性物质具有一定刺激性。操作时请佩戴实验服及一次性手套。