ES-8712 SuperBlot抗体快速剥离缓冲液（温和型）

【保存条件】

室温运输，4℃保存，有效期12个月

【概述】

本产品旨在从同一种Western Blot转印膜上高效、温和地洗脱已结合的一抗和二抗，从而实现对同一张膜进行多次（5-10次）不同靶蛋白的检测。

高效省时：无需重新制胶、电泳和转膜，极大缩短实验周期。

温和无损：独特的温和配方，在剥离抗体的同时对膜上结合的目标蛋白损伤极小，保持信号的一致性。

理想的低丰度蛋白检测工具：极低的目标蛋白损失率，特别适合在同一张膜上先检测低丰度信号（如磷酸化蛋白、转录因子），再检测高丰度内参。

安全环保：不含巯基乙醇（2-ME）或DTT，无刺激性气味，无需在通风橱内操作。

数据可靠：消除重新加样带来的上样量误差，增强不同指标间的可比性。

【使用建议】

1. 洗涤：完成ECL发光检测后，用TBST缓冲液漂洗膜 5 分钟，以去除残留的发光液。

2. 剥离（Stripping）：
将膜放入洁净容器，加入足以覆盖膜面的剥离液（通常10-20 mL）。
置于水平摇床上，室温下振荡。
时间参考：通常 10-20分钟。对于结合力极强的抗体，可适当延长至30-60分钟

3. 验证与洗涤：
倒掉剥离液，用TBST缓冲液漂洗5分钟，漂洗1-2次。
验证建议：此时可再次滴加少量 ECL 显色液并压片或扫描。若无信号出现，说明剥离彻底。

4. 重新检测：再次使用封闭液（如ES-8715 5×SuperBlot 无蛋白快速封闭液或ES-8185 5% BSA封闭液）重新封闭。 封闭完成后，即可开始下一轮的一抗孵育。

【注意事项】

1. 封闭必要性：剥离液会去除部分封闭蛋白，因此重新封闭是防止下一轮实验出现高背景的关键步骤。

2. 顺序原则：建议先检测丰度低、分子量小的蛋白，最后检测丰度高（如内参 Actinin/GAPDH）的蛋白。

3. 膜的类型：本品对PVDF膜效果最佳。若使用NC膜，建议将剥离时间控制在20分钟以内，并观察膜的完整性。

4. 温度影响：若室温过低导致剥离效率下降，可尝试在37°C环境下进行振荡剥离。

5. 安全防护：仅限科研使用。操作时请穿着实验服并佩戴一次性丁腈手套。