产品描述
【保存条件】
室温运输，4℃保存，有效期12个月
【概述】
本产品旨在从同一种Western Blot转印膜上高效、温和地洗脱已结合的一抗和二抗，从而实现对同一张膜进行多次（5-10次）不同靶蛋白的检测。
高效省时：无需重新制胶、电泳和转膜，极大缩短实验周期。
温和无损：独特的温和配方，在剥离抗体的同时对膜上结合的目标蛋白损伤极小，保持信号的一致性。
理想的低丰度蛋白检测工具：极低的目标蛋白损失率，特别适合在同一张膜上先检测低丰度信号（如磷酸化蛋白、转录因子），再检测高丰度内参。
安全环保：不含巯基乙醇（2-ME）或DTT，无刺激性气味，无需在通风橱内操作。
数据可靠：消除重新加样带来的上样量误差，增强不同指标间的可比性。
【使用建议】
1. 洗涤：完成ECL发光检测后，用TBST缓冲液漂洗膜 5 分钟，以去除残留的发光液。
2. 剥离（Stripping）：
将膜放入洁净容器，加入足以覆盖膜面的剥离液（通常10-20 mL）。
置于水平摇床上，室温下振荡。
时间参考：通常 10-20分钟。对于结合力极强的抗体，可适当延长至30-60分钟
3. 验证与洗涤：
倒掉剥离液，用TBST缓冲液漂洗5分钟，漂洗1-2次。
验证建议：此时可再次滴加少量 ECL 显色液并压片或扫描。若无信号出现，说明剥离彻底。
4. 重新检测：再次使用封闭液（如ES-8715 5×SuperBlot 无蛋白快速封闭液或ES-8185 5% BSA封闭液）重新封闭。 封闭完成后，即可开始下一轮的一抗孵育。
【注意事项】
1. 封闭必要性：剥离液会去除部分封闭蛋白，因此重新封闭是防止下一轮实验出现高背景的关键步骤。
2. 顺序原则：建议先检测丰度低、分子量小的蛋白，最后检测丰度高（如内参 Actinin/GAPDH）的蛋白。
3. 膜的类型：本品对PVDF膜效果最佳。若使用NC膜，建议将剥离时间控制在20分钟以内，并观察膜的完整性。
4. 温度影响：若室温过低导致剥离效率下降，可尝试在37°C环境下进行振荡剥离。
5. 安全防护：仅限科研使用。操作时请穿着实验服并佩戴一次性丁腈手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ES-8712、抗体剥离、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温运输，4℃保存
常见问题 (FAQ)
可用于哪些应用场景？
适用：① 同一张膜多靶点检测（5–10 次重复）；② 磷酸化 vs 总蛋白对比（先 phospho 后 total）；③ 多个候选 marker 筛查（同一样品上比较）；④ 稀有样品节约（病人切片、原代细胞等不易获得的样品）；⑤ 数据可比性提升（消除上样量误差）。数据可靠：消除重新加样带来的上样量误差，增强不同指标间的可比性。
低温下剥离效率下降怎么办？
温度影响：若室温过低导致剥离效率下降，可尝试在 37℃ 环境下进行振荡剥离。——冬季实验室室温较低时，37℃ 水浴或恒温摇床能显著提高剥离效率。
膜的类型适配？
膜的类型：本品对 PVDF 膜效果最佳。若使用 NC 膜，建议将剥离时间控制在 20 min 以内，并观察膜的完整性。——NC 膜机械强度低于 PVDF，长时间强力洗脱会损坏膜结构。
检测顺序的原则？
顺序原则：建议先检测丰度低、分子量小的蛋白，最后检测丰度高（如内参 Actinin/GAPDH）的蛋白。——原因：① 低丰度蛋白检测后剥离重新检测可能损失些信号，先检测保证最高灵敏度；② 高丰度内参 GAPDH 即使有些损失仍可清晰检测；③ 小分子量蛋白电泳分离时位于胶下端，剥离时受影响最小。
为什么必须重新封闭？
封闭必要性：剥离液会去除部分封闭蛋白，因此重新封闭是防止下一轮实验出现高背景的关键步骤。——剥离液在洗去抗体的同时也会洗去前一轮封闭剂，膜表面再次暴露空白位点，必须重新封闭再做新一轮 WB。
完整使用流程？
① 洗涤：完成 ECL 发光检测后，用 TBST 缓冲液漂洗膜 5 min，去除残留的发光液；② 剥离：将膜放入洁净容器，加入足以覆盖膜面的剥离液（通常 10–20 mL），水平摇床室温振荡 10–20 min（对结合力极强的抗体可适当延长至 30–60 min）；③ 验证与洗涤：倒掉剥离液，TBST 缓冲液漂洗 5 min × 1–2 次；验证建议：再次滴加少量 ECL 显色液并压片或扫描，若无信号出现，说明剥离彻底；④ 重新检测：用封闭液（如 ES-8715 5× SuperBlot 无蛋白快速封闭液或 ES-8185 5% BSA 封闭液）重新封闭 → 下一轮一抗孵育。
核心安全特点？
安全环保：不含巯基乙醇（2-ME）或 DTT，无刺激性气味，无需在通风橱内操作。——传统剥离液（如 Restore Western Blot Stripping Buffer）含 2-ME 或 DTT，气味强烈需通风柜操作；本品改用温和配方，操作更友好。
与 ES-8713（强碱型）的区别？
ES-8712（温和型，本品）：① 配方温和；② 5–10 次重复检测；③ 对低丰度蛋白损伤极小（适合 phospho 抗体、转录因子等珍贵抗原）；④ 剥离时间 10–20 min；⑤ 适合多次复测。ES-8713（强碱型）：① 高 pH 强碱性配方；② 3–5 次以内重复检测；③ 强力洗脱（适合中高丰度蛋白）；④ 剥离时间 5–15 min。选择：先低丰度后高丰度 → 8712；高丰度直接强洗 → 8713。
本产品的核心用途？
本产品旨在从同一种 Western Blot 转印膜上高效、温和地洗脱已结合的一抗和二抗，从而实现对同一张膜进行多次（5–10 次）不同靶蛋白的检测。高效省时：无需重新制胶、电泳和转膜，极大缩短实验周期。温和无损：独特的温和配方，在剥离抗体的同时对膜上结合的目标蛋白损伤极小，保持信号的一致性。理想的低丰度蛋白检测工具：极低的目标蛋白损失率，特别适合在同一张膜上先检测低丰度信号（如磷酸化蛋白、转录因子），再检测高丰度内参。
