产品描述
【保存条件】
室温运输,4℃保存,有效期12个月
【概述】
本产品采用高pH强碱性配方,专门用于从Western Blot转印膜上彻底洗脱结合力极强的一抗和二抗。
强效洗脱:专门针对中高丰度蛋白、结合力较强的磷酸化抗体或温和型剥离液无法洗净的样本。
极速流程:洗脱速度极快,通常5-15分钟即可完成剥离,显著缩短实验等待时间。
安全环保:不含巯基乙醇或 DTT,无刺激性气味,操作环境更友好。
精准定量:通过在同一张膜上多次重复检测,彻底消除重新上样导致的加样误差,提高数据可比性。
【使用建议】
1. 洗涤:完成ECL发光检测后,用TBST缓冲液漂洗膜5分钟,以去除残留的发光液。
2. 剥离(Stripping):
将膜放入洁净容器,加入足以覆盖膜面的剥离液(通常10-20 mL)。
置于水平摇床上,室温下振荡。
时间参考:通常5-15分钟。对于结合力极强的抗体,可适当延长至30-60分钟
3. 验证与洗涤:
倒掉剥离液,用TBST缓冲液漂洗5分钟,漂洗1-2次。
验证建议:此时可再次滴加少量 ECL 显色液并压片或扫描。若无信号出现,说明剥离彻底。
4. 重新检测:再次使用封闭液(如ES-8715 5×SuperBlot 无蛋白快速封闭液或ES-8185 5% BSA封闭液)重新封闭。 封闭完成后,即可开始下一轮的一抗孵育。
【注意事项】
1. 针对性选择:强碱型剥离能力极强,不建议用于极为稀有的低丰度蛋白(此类蛋白推荐使用ES-8712 温和型剥离液)。建议对同一张膜进行3-5次以内的剥离检测。
2. 封闭必要性:剥离液会去除部分封闭蛋白,因此重新封闭是防止下一轮实验出现高背景的关键步骤。
3. 顺序原则:建议先检测丰度低、分子量小的蛋白,最后检测丰度高(如内参 Actinin/GAPDH)的蛋白。
4. 膜的类型:本品对PVDF膜效果最佳。若使用NC膜,建议将剥离时间控制在20分钟以内,并观察膜的完整性。
5. 温度影响:若室温过低导致剥离效率下降,可尝试在37°C环境下进行振荡剥离。
6. 安全防护:仅限科研使用。操作时请穿着实验服并佩戴一次性丁腈手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ES-8713、抗体剥离、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温运输,4℃保存
常见问题 (FAQ)
低温下剥离效率下降怎么办?
温度影响:若室温过低导致剥离效率下降,可尝试在 37℃ 环境下进行振荡剥离。
膜的类型适配?
膜的类型:本品对 PVDF 膜效果最佳。若使用 NC 膜,建议将剥离时间控制在 20 min 以内,并观察膜的完整性。——NC 膜在强碱条件下机械强度下降更快,需缩短时间并密切观察。
检测顺序的原则?
顺序原则:建议先检测丰度低、分子量小的蛋白,最后检测丰度高(如内参 Actinin/GAPDH)的蛋白。
为什么必须重新封闭?
封闭必要性:剥离液会去除部分封闭蛋白,重新封闭是防止下一轮实验出现高背景的关键步骤。
什么时候选强碱型?
适合场景:温和型剥离液无法完全洗净顽固抗体
什么时候不应该用强碱型?
注意:针对性选择:强碱型剥离能力极强,不建议用于极为稀有的低丰度蛋白(此类蛋白推荐使用 ES-8712 温和型剥离液)。建议对同一张膜进行 3–5 次以内的剥离检测。——强碱反复剥离会逐渐损伤膜上目标蛋白,超过 5 次后信号显著下降。
完整使用流程?
① 洗涤:ECL 发光检测后,用 TBST 缓冲液漂洗膜 5 min;② 剥离:将膜放入洁净容器,加足以覆盖膜面的剥离液(通常 10–20 mL),水平摇床室温振荡 5–15 min(对结合力极强的抗体可适当延长至 30–60 min);③ 验证与洗涤:倒掉剥离液,TBST 漂洗 5 min × 1–2 次;再次滴加少量 ECL 显色液并压片,若无信号说明剥离彻底;④ 重新检测:用 ES-8715 / ES-8185 等封闭液重新封闭 → 下一轮一抗孵育。
与 ES-8712(温和型)的关键区别?
ES-8713(强碱型,本品):① 高 pH 强碱配方;② 3–5 次以内重复检测(强力但损伤略大);③ 适合中高丰度蛋白、结合力极强的抗体;④ 剥离时间 5–15 min(更快);⑤ 不适合极稀有低丰度蛋白。ES-8712(温和型):温和、低丰度损伤小、5–10 次重复。选择:① 普通 WB 多次复测 → 8712;② 顽固抗体或温和型剥离不彻底 → 8713;③ 高丰度蛋白快速洗脱 → 8713。
本产品的核心用途?
本产品采用高 pH 强碱性配方,专门用于从 Western Blot 转印膜上彻底洗脱结合力极强的一抗和二抗。强效洗脱:专门针对中高丰度蛋白、结合力较强的磷酸化抗体或温和型剥离液无法洗净的样本。极速流程:洗脱速度极快,通常 5–15 分钟即可完成剥离,显著缩短实验等待时间。安全环保:不含巯基乙醇或 DTT,无刺激性气味,操作环境更友好。精准定量:通过在同一张膜上多次重复检测,彻底消除重新上样导致的加样误差,提高数据可比性。

