ES-8713 SuperBlot抗体快速剥离缓冲液（强碱型）

【保存条件】

室温运输，4℃保存，有效期12个月

【概述】

本产品采用高pH强碱性配方，专门用于从Western Blot转印膜上彻底洗脱结合力极强的一抗和二抗。

强效洗脱：专门针对中高丰度蛋白、结合力较强的磷酸化抗体或温和型剥离液无法洗净的样本。

极速流程：洗脱速度极快，通常5-15分钟即可完成剥离，显著缩短实验等待时间。

安全环保：不含巯基乙醇或 DTT，无刺激性气味，操作环境更友好。

精准定量：通过在同一张膜上多次重复检测，彻底消除重新上样导致的加样误差，提高数据可比性。

【使用建议】

1. 洗涤：完成ECL发光检测后，用TBST缓冲液漂洗膜5分钟，以去除残留的发光液。

2. 剥离（Stripping）：
将膜放入洁净容器，加入足以覆盖膜面的剥离液（通常10-20 mL）。
置于水平摇床上，室温下振荡。
时间参考：通常5-15分钟。对于结合力极强的抗体，可适当延长至30-60分钟

3. 验证与洗涤：
倒掉剥离液，用TBST缓冲液漂洗5分钟，漂洗1-2次。
验证建议：此时可再次滴加少量 ECL 显色液并压片或扫描。若无信号出现，说明剥离彻底。

4. 重新检测：再次使用封闭液（如ES-8715 5×SuperBlot 无蛋白快速封闭液或ES-8185 5% BSA封闭液）重新封闭。 封闭完成后，即可开始下一轮的一抗孵育。

【注意事项】

1. 针对性选择：强碱型剥离能力极强，不建议用于极为稀有的低丰度蛋白（此类蛋白推荐使用ES-8712 温和型剥离液）。建议对同一张膜进行3-5次以内的剥离检测。

2. 封闭必要性：剥离液会去除部分封闭蛋白，因此重新封闭是防止下一轮实验出现高背景的关键步骤。

3. 顺序原则：建议先检测丰度低、分子量小的蛋白，最后检测丰度高（如内参 Actinin/GAPDH）的蛋白。

4. 膜的类型：本品对PVDF膜效果最佳。若使用NC膜，建议将剥离时间控制在20分钟以内，并观察膜的完整性。

5. 温度影响：若室温过低导致剥离效率下降，可尝试在37°C环境下进行振荡剥离。

6. 安全防护：仅限科研使用。操作时请穿着实验服并佩戴一次性丁腈手套。