产品描述
【保存条件】
-20℃保存，有效期24个月
【概述】
本产品是细胞培养中常用的消化试剂，适用于贴壁细胞的传代及原代组织的解离。
双重消化动力：胰酶（Trypsin）通过水解细胞间的蛋白质使细胞解离；EDTA作为螯合剂，通过结合钙、镁离子来破坏细胞间的粘附桥，两者协同作用显著提高了消化效率。
即用型：经过滤除菌，可直接用于各类细胞系或组织的消化。
【使用方法】
贴壁细胞消化（以T25培养瓶为例）：
1. 预洗：吸除旧培养基。加入无菌PBS或D-Hank's（不含钙镁）洗涤细胞1-2 次，彻底去除残留的血清（血清中的蛋白酶抑制剂会显著降低胰酶活性）。
2. 加入消化液：加入约1 mL胰酶消化液，使之完全覆盖瓶底细胞层。
3. 孵育：室温或37°C孵育。不同细胞消化时间差异较大，通常为30秒至3分钟。
4. 镜检：显微镜下观察细胞明显收缩、变圆，且细胞间隙增大。
5. 终止：立即加入含有血清的完全培养基（体积通常为胰酶的2-3倍），利用血清中的抑制剂终止消化。
6. 收集：轻轻吹打瓶壁细胞使之脱落。若需去除胰酶残留，可将细胞悬液300-500 g离心3-5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬。
II. 组织块解离：
将剪碎的组织块置于消化液中，根据组织类型（如胚胎组织较易解离，纤维组织较难）调整消化时间，直至组织结构松散。
【注意事项】
1. 温度提示：胰酶在室温下活性会逐渐下降。建议分装使用，避免整瓶反复冻融或长时间放置在室温/水浴锅中。
2. 终止必要性：必须使用含血清培养基或专门的胰酶抑制剂终止反应，否则过度的蛋白水解会损伤细胞表面受体。
3. 安全防护：本品仅供科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml
应用领域
本产品适用于ES-8441、细胞消化、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃保存
常见问题 (FAQ)
常见错误 + 故障排查？
错误 1：流式 FITC 背景偏高 → 酚红没去除干净（其实本品已无酚红，但培养基带入）→ 消化前 PBS 洗 2 次去培养基；细胞重悬用 PBS+BSA 而非含酚红培养基。错误 2：消化不彻底 → ①血清残留（最常见，胰酶活性丧失 50%+）；②胰酶失活（冻融过 → 换新分装）；③D-Hank's 应用而非 PBS。错误 3：流式表面抗原信号弱 → 消化时间过长 (>5 min) 或温度高 → 改 1–2 min + 室温。错误 4：细胞活性低 → ①过消化；②终止不及时；③离心力过高（应 ≤500×g）。
本品（含 EDTA）vs ES-8443（无 EDTA + 无酚红）选择？
本品优势：① 含 EDTA → 消化效率更高；② 时间更短；③ 下游对 EDTA 不敏感的实验（FITC/GFP 表达分析）。ES-8443 优势：① 无 EDTA → 金属离子依赖型受体（CD16、CD25、PTP 类等）保留更完整；② 极致温和——iPSC、神经元等敏感细胞；③ 消化时间更长但损伤更小。选择决策树：① 检测的表面抗原是否依赖钙镁离子？依赖 → 选 ES-8443；不依赖 → 选本品。② 不确定 → 先小规模试两种比较表位染色信号。
完整使用流程（流式样本制备）？
针对流式应用优化：① 旧培养基弃；② D-Hank's（无钙镁，避免 EDTA 螯合饱和）洗 2 次；③ 加 1 mL 本品；④ 室温 1–3 min（流式样本不要 37℃，温度变化影响表面抗原）；⑤ 镜检 → 加含血清培养基 2 mL 终止；⑥ 收集 → 300×g, 5 min；⑦ PBS + 2% BSA 洗涤一次（去残留 EDTA）；⑧ 重悬于 FACS Buffer + 抗体染色。关键点：流式样品不要使用本品做长时间消化——表面抗原会被部分破坏。
为什么流式实验要避免酚红？
酚红的荧光干扰：① 酚红在 480–490 nm 有较强吸收——与 FITC / GFP 检测通道（488 nm 激发）重叠；② PE 通道（580 nm）也部分受影响；③ 裸眼荧光显微镜下 酚红会让样本显浅红色背景。典型受影响实验：① 流式细胞表面抗原检测（FITC-CD3/CD4/CD8 等）；② GFP/mCherry 报告基因实验；③ 荧光定量 PCR 标准曲线（不会，但部分荧光检测会）；④ 共聚焦显微镜活细胞成像。本品优势：去除酚红后，下游荧光检测背景更低、灵敏度更高。
试剂保存？
-20℃ 保存，有效期 24 个月。胰酶分装使用避免反复冻融。终止必要性 + 安全防护与 ES-8439 一致。
可用于哪些应用场景？
适用：① 流式细胞术消化前细胞收集（避免酚红干扰 FITC/PE 通道）；② 荧光报告基因检测（GFP / mCherry 实验）；③ 免疫荧光染色前消化；④ 多色荧光检测的细胞制备；⑤ 常规细胞消化的酚红敏感版本。
完整使用流程（与 ES-8439 一致）？
① 预洗：PBS 或 D-Hank's（无钙镁）洗涤 1–2 次去除血清；② 加 1 mL 消化液覆盖细胞；③ 室温或 37℃ 孵育 30 s – 3 min；④ 镜检细胞变圆 + 间隙增大；⑤ 加含血清培养基 2–3 倍体积终止；⑥ 300–500 g 离心 3–5 min + 重悬。
与同系列胰酶的选择？
与 ES-8439（含酚红版）：性能相同，本品专为流式 / IF 等避免酚红干扰的实验。与 ES-8443（不含 EDTA + 不含酚红）：本品含 EDTA——消化效率更高、速度更快；ES-8443 仅胰酶，对 EDTA 敏感细胞（如某些表面金属离子依赖型受体研究）选 ES-8443。
本产品的核心特点？
本产品与 ES-8439（含 EDTA + 含酚红）功能性能完全相同，唯一差异是不含酚红 pH 指示剂——专为对酚红敏感的下游实验（流式细胞术、免疫荧光、报告基因检测等）设计。EDTA 协同：EDTA 螯合钙镁离子破坏细胞粘附桥，与胰酶协同提高消化效率。双重消化动力：胰酶水解细胞间蛋白 + EDTA 螯合钙镁离子破坏粘附桥。
