ES-8442 0.25%胰酶细胞消化液(不含EDTA,含酚红)

【保存条件】

-20℃保存，有效期24个月

【概述】

本产品是细胞培养中经典的解离试剂，适用于贴壁细胞的传代及原代组织的解离。

温和消化：仅含胰酶（Trypsin）成分。相比含有EDTA的版本，本品消化的机械应力更小，能有效减少对细胞表面金属离子依赖型受体及膜蛋白的损伤。

特定应用：适用于对 EDTA 敏感的细胞株，或在消化后需保留细胞表面特定抗原用于流式分析检测的实验。

状态指示：内含酚红作为 pH 指示剂。在pH 7.2 - 7.8的最佳活性范围内呈红色；若液体变黄则提示环境酸化，胰酶活性可能受损。

即用型：经过滤除菌，可直接用于各类细胞系或组织的消化。

【使用方法】

I. 贴壁细胞消化（以T25培养瓶为例）：

1. 预洗：吸除旧培养基。加入无菌PBS或D-Hank's（不含钙镁）洗涤细胞1-2 次，彻底去除残留的血清（血清中的蛋白酶抑制剂会显著降低胰酶活性）。

2. 加入消化液：加入约1 mL胰酶消化液，使之完全覆盖瓶底细胞层。

3. 孵育：室温或37°C孵育。不同细胞消化时间差异较大，通常为30秒至3分钟。

4. 镜检：显微镜下观察细胞明显收缩、变圆，且细胞间隙增大。

5. 终止：立即加入含有血清的完全培养基（体积通常为胰酶的2-3倍），利用血清中的抑制剂终止消化。

6. 收集：轻轻吹打瓶壁细胞使之脱落。若需去除胰酶残留，可将细胞悬液300-500 g离心3-5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬。

II. 组织块解离：

将剪碎的组织块置于消化液中，根据组织类型（如胚胎组织较易解离，纤维组织较难）调整消化时间，直至组织结构松散。

【注意事项】

1. 温度提示：胰酶在室温下活性会逐渐下降。建议分装使用，避免整瓶反复冻融或长时间放置在室温/水浴锅中。

2. 终止必要性：必须使用含血清培养基或专门的胰酶抑制剂终止反应，否则过度的蛋白水解会损伤细胞表面受体。

3. 安全防护：本品仅供科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。