产品描述
【保存条件】
-20℃保存，有效期24个月
【概述】
本产品是细胞培养中经典的解离试剂，适用于贴壁细胞的传代及原代组织的解离。
温和消化：仅含胰酶（Trypsin）成分。相比含有EDTA的版本，本品消化的机械应力更小，能有效减少对细胞表面金属离子依赖型受体及膜蛋白的损伤。
特定应用：适用于对 EDTA 敏感的细胞株，或在消化后需保留细胞表面特定抗原用于流式分析检测的实验。
状态指示：内含酚红作为 pH 指示剂。在pH 7.2 - 7.8的最佳活性范围内呈红色；若液体变黄则提示环境酸化，胰酶活性可能受损。
即用型：经过滤除菌，可直接用于各类细胞系或组织的消化。
【使用方法】
I. 贴壁细胞消化（以T25培养瓶为例）：
1. 预洗：吸除旧培养基。加入无菌PBS或D-Hank's（不含钙镁）洗涤细胞1-2 次，彻底去除残留的血清（血清中的蛋白酶抑制剂会显著降低胰酶活性）。
2. 加入消化液：加入约1 mL胰酶消化液，使之完全覆盖瓶底细胞层。
3. 孵育：室温或37°C孵育。不同细胞消化时间差异较大，通常为30秒至3分钟。
4. 镜检：显微镜下观察细胞明显收缩、变圆，且细胞间隙增大。
5. 终止：立即加入含有血清的完全培养基（体积通常为胰酶的2-3倍），利用血清中的抑制剂终止消化。
6. 收集：轻轻吹打瓶壁细胞使之脱落。若需去除胰酶残留，可将细胞悬液300-500 g离心3-5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬。
II. 组织块解离：
将剪碎的组织块置于消化液中，根据组织类型（如胚胎组织较易解离，纤维组织较难）调整消化时间，直至组织结构松散。
【注意事项】
1. 温度提示：胰酶在室温下活性会逐渐下降。建议分装使用，避免整瓶反复冻融或长时间放置在室温/水浴锅中。
2. 终止必要性：必须使用含血清培养基或专门的胰酶抑制剂终止反应，否则过度的蛋白水解会损伤细胞表面受体。
3. 安全防护：本品仅供科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml
应用领域
本产品适用于ES-8442、细胞消化、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃保存
常见问题 (FAQ)
常见错误 + 故障排查？
Q：消化效率低于预期？ A：因仅含胰酶，本身就比含 EDTA 版本慢，正常需要 3–5 min——不要过早终止；如确实太慢，可①升温到 37℃；②延长到 7–10 min；③ 但不要升到含 EDTA 浓度。Q：表面抗原仍被破坏？ A：① 消化时间过长（>5 min 在 37℃）；② 选错产品——金属离子非依赖型抗原应该用含 EDTA 版本（更快）；③ 抗体克隆敏感——查文献。Q：酚红变黄但还想用？ A：① 解冻后立即测试细胞消化——若 30 s – 5 min 内能正常解离则可用；② 长期变黄（黄到棕黄）→ 弃用。Q：变红？ A：CO₂ 反吸或新加碱性物质 → 通常仍可用。
本品 vs 其他无 EDTA 配方的对比？
本品（仅胰酶 + 酚红）：含酚红——对培养基酸碱度变化敏感，便于品控。ES-8443（仅胰酶 + 无酚红）：完全无干扰——最纯净的胰酶版本。Accutase（市售）：胰酶替代品 + 胶原酶 + DNase——更温和但成本高。TrypLE（市售）：重组胰酶——无动物源。选择：① 实验室常规品控需求 + EDTA 敏感 → 本品；② 流式 + 荧光实验 → ES-8443；③ iPSC + 临床转化 → ES-8750/8751。
完整使用流程（针对金属离子敏感受体）？
针对 CD 表面抗原的优化方案：① 预洗：用含 Ca²⁺/Mg²⁺ 的 PBS+（不是 D-Hank's！这点与含 EDTA 版本完全相反）洗 1 次——保护表面受体构象；② 加 1 mL 本品；③ 室温 2–5 min（仅胰酶比含 EDTA 版本慢约 2 倍）；④ 镜检 1/3 细胞圆缩；⑤ 含血清培养基 2–3 倍终止；⑥ 离心 350–500×g, 5 min；⑦ PBS+ 重悬——继续保留金属离子环境。注意：本品消化后直接做流式抗体染色通常需立即进行，不要长时间放置。
酚红 pH 指示作用的实用价值？
内含酚红作为 pH 指示剂。在 pH 7.2–7.8 的最佳活性范围内呈红色；若液体变黄则提示环境酸化，胰酶活性可能受损。实用判断：① 鲜红色——pH 7.2–7.8，胰酶活性最佳，可用；② 粉红/粉色——pH 7.6–7.8，仍正常；③ 橙色——pH 6.8–7.2，活性略降但仍可用；④ 黄色——pH < 6.8，活性显著下降，建议弃用；⑤ 紫红色/深红色——pH > 7.8，碱化（罕见，污染或试剂变质）。变色原因：① 反复开瓶 CO₂ 进入；② 温度升高；③ 长期室温放置；④ 细菌污染（伴浑浊）。
试剂保存？
-20℃ 保存，有效期 24 个月。胰酶分装使用避免反复冻融。终止必要性：必须用血清培养基终止反应。
完整使用流程？
① 预洗：PBS 或 D-Hank's（无钙镁）洗涤 1–2 次去除血清；② 加 1 mL 消化液覆盖细胞；③ 室温或 37℃ 孵育 30 s – 3 min（因仅含胰酶，可能略长于含 EDTA 版）；④ 镜检细胞变圆 + 间隙增大；⑤ 加含血清培养基 2–3 倍体积终止；⑥ 300–500 g 离心 3–5 min + 重悬。
ES-8442（无 EDTA）与 ES-8439（含 EDTA）如何选择？
两者的核心区别在于是否含 EDTA：ES-8439 胰酶与 EDTA 双重协同作用，消化效率高、用时较短，适合常规细胞传代；ES-8442（本品）不含 EDTA，仅靠胰酶消化，效率略低、耗时稍长，但对细胞表面抗原的保留更好，适合流式细胞术或需要检测表面蛋白的实验场景。
为什么不含 EDTA？
特别提示：适用于对 EDTA 敏感的细胞株，或在消化后需保留细胞表面特定抗原用于流式分析检测的实验。典型场景：① 流式细胞术表面 CD 标志物检测——某些 CD 受体（如 CD16、CD25）需要金属离子（Ca²⁺/Mg²⁺）维持构象，EDTA 螯合后表位会被部分破坏；② 金属离子依赖型受体研究（如 CD45、PTPN 类）；③ EMSA 等需要保留蛋白构象的应用。
本产品的核心特点？
本产品是细胞培养中经典的解离试剂。温和消化：仅含胰酶（Trypsin）成分。相比含有 EDTA 的版本，本品消化的机械应力更小，能有效减少对细胞表面金属离子依赖型受体及膜蛋白的损伤。特定应用：适用于对 EDTA 敏感的细胞株，或在消化后需保留细胞表面特定抗原用于流式分析检测的实验。状态指示：内含酚红作为 pH 指示剂。在 pH 7.2–7.8 的最佳活性范围内呈红色；若液体变黄则提示环境酸化，胰酶活性可能受损。
