【保存条件】
-20℃保存,有效期2年
【概述】
本产品是高浓度的细胞消化试剂,专为需要高水解能力的实验场景设计。
强效解离:含有0.5%高活性胰酶,能够迅速切断细胞间及细胞与基质间的蛋白质连接,适用于标准浓度(0.25%)难以消化的场景。
适用对象:难消化细胞: 如某些原代纤维细胞、平滑肌细胞或形成致密克隆的细胞系。
组织解离:适用于皮肤、软骨或其他结缔组织较多的组织块碎化。
协同效应:EDTA 螯合钙镁离子,进一步弱化细胞粘附,辅助高浓度胰酶实现快速单细胞化。
品质保障:含有酚红作为 pH 指示剂,经过无菌过滤处理。
【使用建议(仅供参考)】
I. 贴壁细胞消化(以T25培养瓶为例):
1. 预洗:吸除旧培养基。加入无菌PBS或D-Hank's(不含钙镁)洗涤细胞1-2 次,彻底去除残留的血清(血清中的蛋白酶抑制剂会显著降低胰酶活性)。
2. 加入消化液:加入约1 mL胰酶消化液,使之完全覆盖瓶底细胞层。
3. 孵育与监控:室温或37°C孵育。由于效力极强,消化速度极快,建议每 30 秒进行镜检。 通常消化时间仅需30秒至2分钟。
4. 终止:立即加入含有血清的完全培养基(体积通常为胰酶的2-3倍),利用血清中的抑制剂终止消化。
5. 收集:轻轻吹打瓶壁细胞使之脱落。若需去除胰酶残留,可将细胞悬液300-500 g离心3-5分钟,弃上清后用新鲜培养基重悬。
II. 组织块解离:
将剪碎的组织置于0.5%消化液中。由于浓度高,可有效缩短组织在体外暴露的时间,但需注意防止过消化导致细胞碎片增多。
【注意事项】
1. 温度提示:胰酶在室温下活性会逐渐下降。建议分装使用,避免整瓶反复冻融或长时间放置在室温/水浴锅中。
2. 终止必要性:必须使用含血清培养基或专门的胰酶抑制剂终止反应,否则过度的蛋白水解会损伤细胞表面受体。
3. 安全防护:本品仅供科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。