【保存条件】
室温保存,有效期24个月
【概述】
本产品为预混合固体粉末,溶解后用于WesternBlot实验中的湿式转膜(WetTransfer)。
兼容性广:适用于将蛋白从SDS-PAGE凝胶转移至PVDF或NC膜。配方稳定:经过精确配比,能有效维持转膜过程中的电导率稳定。
低背景:高纯度组分,有助于降低非特异性背景染色。
【使用建议】
1. 工作液配制(以配制1L为例)
① 溶解:取一包粉末倒入烧杯,加入约700mL蒸馏水或去离子水,搅拌至完全溶解。
② 添加甲醇或乙醇(关键):加入200mL无水甲醇或乙醇(终浓度为20%)。
注:甲醇有助于增强转膜效果,并防止凝胶在转膜过程中由于受热而膨胀。
③ 定容:补充蒸馏水至1000mL,充分混匀。
2. 特殊优化(可选)
① 大分子蛋白:若目标蛋白分子量较大(>150kDa)或疏水性强,可额外添加0.025%-0.1%SDS(工作浓度)以增加溶解性及迁移速率。
② 小分子蛋白:建议将醇比例提高至20%,并使用0.22μm孔径的膜,防止蛋白穿透。
【注意事项】
1. 预冷处理:湿转会产生大量热量。建议电泳槽内放置冰宝(Ice block)。转膜工作液建议提前在4°C预冷,以获得最佳条带质量。可选择室温用低发热转膜产品ES-8704 20×SuperBlot 免冰浴快速蛋白电泳转膜液。
2. 气泡排除:组装转膜“三明治”结构时,务必用玻璃棒或专用滚轮排除凝胶与滤纸、膜之间的所有气泡。
3. 安全防护:仅限科研使用。配置过程中涉及无水甲醇(有毒、易燃),请务必在通风橱内操作,并穿实验服、佩戴手套。