产品描述
【保存条件】
室温保存，有效期24个月
【概述】
本产品为预混合固体粉末，溶解后用于WesternBlot实验中的湿式转膜（WetTransfer）。
兼容性广：适用于将蛋白从SDS-PAGE凝胶转移至PVDF或NC膜。配方稳定：经过精确配比，能有效维持转膜过程中的电导率稳定。
低背景：高纯度组分，有助于降低非特异性背景染色。
【使用建议】
1. 工作液配制(以配制1L为例)
① 溶解：取一包粉末倒入烧杯，加入约700mL蒸馏水或去离子水，搅拌至完全溶解。
② 添加甲醇或乙醇（关键）：加入200mL无水甲醇或乙醇（终浓度为20%）。
注：甲醇有助于增强转膜效果，并防止凝胶在转膜过程中由于受热而膨胀。
③ 定容：补充蒸馏水至1000mL，充分混匀。
2. 特殊优化（可选）
① 大分子蛋白：若目标蛋白分子量较大（>150kDa）或疏水性强，可额外添加0.025%-0.1%SDS（工作浓度）以增加溶解性及迁移速率。
② 小分子蛋白：建议将醇比例提高至20%，并使用0.22μm孔径的膜，防止蛋白穿透。
【注意事项】
1. 预冷处理：湿转会产生大量热量。建议电泳槽内放置冰宝（Ice block）。转膜工作液建议提前在4°C预冷，以获得最佳条带质量。可选择室温用低发热转膜产品ES-8704 20×SuperBlot 免冰浴快速蛋白电泳转膜液。
2. 气泡排除：组装转膜“三明治”结构时，务必用玻璃棒或专用滚轮排除凝胶与滤纸、膜之间的所有气泡。
3. 安全防护：仅限科研使用。配置过程中涉及无水甲醇（有毒、易燃），请务必在通风橱内操作，并穿实验服、佩戴手套。
产品规格
- 货期
- 1-2天
- 规格
- 1p、10p
应用领域
本产品适用于ES-8191、蛋白电泳及转膜、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
1× 储液：常温稳定 12 个月；1× 工作液：4℃ 1 周。避免长期高温（>30℃）、反复振荡。
丽春红 S 染膜验证？
转膜完成后将膜浸入丽春红 S 染液 1 分钟 → 流水冲洗 → 拍照记录条带分布；可视化转膜效率与上样均匀性；染料可水洗后继续 WB（不影响 ECL）。
1× 储液稀释要点？
严格 1:1 稀释，加入甲醇至终浓度 20%。常温下储液稳定，但不要反复升降温（盐可能结晶）。
转膜温度的重要性？
湿转产热较多，必须在 4℃ 操作 — 室温会导致膜与凝胶界面温度过高，蛋白热变性 / 聚集。冰盒外加冰水浴或在冷室操作。
常见失败原因？
① 转膜不完全 — 电压 / 时间不足；甲醇含量不足；② 转膜过头（蛋白穿过膜）— 电压过高或时间过长；③ 条带变形 / 雪花斑 — 三明治装配气泡（用滚筒赶走）；④ 不均匀 — 滤纸 / 海绵未湿透。
可以用于哪些下游应用？
标准 WB 流程 — 转膜后封闭、抗体孵育、ECL 显色（用 EK-5008 等）；多重 WB 串膜；荧光 WB（IRDye 抗体）；磷酸化 / 修饰检测；转膜后丽春红 S 染色验证转膜效率。
甲醇的作用？
甲醇作用 — ① 增加蛋白与膜的结合（减少蛋白从膜上「洗脱」）；② 帮助 SDS 从蛋白上解离；③ 激活 PVDF 膜（PVDF 疏水，需甲醇预处理）。无醇版（如 ES-7015）通过其他化学优化达到等效转膜效率。
湿转 vs. 半干转？
湿转 — 时间长（1–2 小时），适合所有分子量蛋白，转膜效率高；半干转 — 时间短（15–30 分钟），适合常规分子量，效率略低。大蛋白（>150 kDa）首选湿转。
使用方法？
1× 工作液配制 — 1× 储液 + 1×甲醇 + ((1-1/1-0.2)) 体积水。湿转条件 — 100 V × 60–90 分钟（4℃）；或 30 V × 过夜（4℃）。半干转 — 15–25 V × 15–30 分钟（依蛋白分子量）。
本产品的标准配方与用途？
Towbin 类 Western 蛋白电泳转移缓冲液（配方：25 mM Tris + 192 mM 甘氨酸 + 20% 甲醇，pH 8.3）。1× 储液 — 用前 1:1 稀释（含甲醇）→ 1× 工作液。用于 SDS-PAGE 凝胶上的蛋白转移到 PVDF / 硝酸纤维素膜上。
