产品描述
【保存条件】
室温保存,有效期12个月
【概述】
含钙组织(如骨骼、牙齿或钙化肿瘤组织)由于钙盐硬度极大,无法直接进行石蜡包埋切片。必须在固定后进行脱钙处理,使组织变软。EDTA脱钙速度较慢,通常需要数周。
作用机制:EDTA(乙二胺四乙酸)是一种螯合剂,它能与骨盐中的钙离子结合形成可溶性的螯合物,从而缓慢地去除钙盐。
产品优势:
1. 抗原保护:相比酸性脱钙液,EDTA环境温和,对组织结构和酶活性影响极小,是免疫组化 (IHC) 和原位杂交 (ISH) 的首选。
2. 形态稳定:不会引起组织肿胀或损害纤维结构。
【操作方法】
1. 取材:骨组织取材厚度建议控制在5 mm以内。组织块越薄,脱钙效率越高。
2. 固定(关键):组织应先经4%组织/细胞固定液(ES-8100)固定24–48 小时。 注:严禁未固定直接脱钙,否则会导致组织自溶。
3. 漂洗:固定后,用PBS或蒸馏水漂洗3次,每次20分钟。
4. 脱钙:将组织浸泡在20-30倍体积的EDTA脱钙液中。密封容器,置于平摇床上缓慢晃动以提高效率。更换频率:每3-7天更换一次新鲜脱钙液。
5. 后续:脱钙完成后,用蒸馏水充分冲洗,即可进行后续的脱水、包埋程序。
【脱钙终点的测定】
准确判断脱钙终点是保证切片质量的关键:
1. 物理检测法(常用):用针头刺入组织,若无阻力、手感柔软且无“砂砾感”即可终止。注意避免在重要观察部位穿刺。
2. X线检测法(最准确):通过 X 光片观察骨组织影像,若密度降至软组织水平,则脱钙彻底。
3. 化学检测法:取少量脱钙旧液,加入等量草酸铵溶液,若无浑浊产生,说明已无钙离子释出。
【注意事项】
1. 容器选择:必须使用玻璃或塑料容器。禁止使用金属容器,因为EDTA会腐蚀金属并干扰螯合反应。
2. 温度控制:适当加温可加速脱钙,但绝对不可超过60°C,否则会导致骨组织胶原纤维变性。
3. 彻底冲洗:脱钙结束后必须用蒸馏水充分冲洗,残留的EDTA可能会干扰后续的苏木素(Hematoxylin)染色。
4. 时间控制:脱钙不足会导致切片崩刀、碎裂;脱钙过度(极长期浸泡)则可能导致组织结构松散。
5. 安全防护:本品为科研试剂,请穿实验服并戴一次性丁腈手套操作。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 500ml
应用领域
本产品适用于ES-8082、脱钙、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存?
室温 24 个月(密封);4℃ 长期。
操作安全?
戴手套防护;EDTA 弱毒性 — 接触皮肤水洗即可;废液 — 含钙螯合物可正常排放(稀释后)。
加速脱钙技巧?
① 37℃ 加温(速度提升 2 倍);② 微波辅助(数小时完成);③ 使用更高浓度 EDTA(10% vs. 标准 5%);④ 脱钙液持续搅拌;⑤ 切薄组织(<3 mm)。
可以用于哪些下游应用?
应用:① IHC(脱钙后保留抗原);② FISH / 原位杂交;③ H&E 病理切片;④ Masson 三色染色;⑤ 牙髓 / 牙周研究;⑥ 骨密度评估。
常见使用错误?
① 脱钙不充分(切片阻力大、刀具损坏);② 脱钙过头(>1 个月,组织过度软化);③ 未及时更换脱钙液(钙饱和后效率下降);④ pH 漂移(应保持 7.2)。
脱钙完成判断?
方法 — ① 物理法:细针穿刺无阻力(脱钙完全);② 化学法:取脱钙液加草酸铵 — 无白色沉淀则钙离子已不游离;③ X 光:组织无钙化阴影;④ 时间估算 — 小骨 1-2 周、长骨 2-4 周。
适用样本类型?
适用:① 骨组织(小鼠 / 大鼠股骨、人活检骨);② 牙齿;③ 钙化软组织(如钙化淋巴结 / 肿瘤);④ 关节软骨;⑤ 牙周组织。
vs. HCl / HNO3 / 甲酸脱钙?
强酸脱钙(10% HCl / HNO3) — 1-3 天快速、但破坏抗原 / 核酸;甲酸脱钙 — 中速、相对温和;EDTA(本品) — 1-4 周慢速、完全保留抗原与核酸;适合 IHC / FISH / RNA-ISH。
使用方法?
① 福尔马林固定后骨组织(厚 2-5 mm);② 浸入 EDTA 脱钙液(脱钙液量 = 组织 50-100 倍);③ 室温 / 37℃ / 4℃ 浸泡(小骨 1-2 周;股骨 2-4 周);④ 每 2-3 天更换脱钙液(监控钙离子饱和);⑤ 检测脱钙完成(细针穿刺无阻力 / X 光验证);⑥ 流水冲洗 → 病理切片流程。
EDTA 脱钙液 pH7.2 的核心特点?
EDTA(乙二胺四乙酸)脱钙液 pH7.2 — 通过螯合钙离子(Ca2+)实现温和脱钙,常用于骨组织 / 牙齿 / 钙化软组织的病理切片预处理。pH 7.2 中性(vs. 强酸性 HCl/HNO3 脱钙)— 保留组织抗原性,适合后续 IHC / IF / 原位杂交。

