ES-8082 EDTA脱钙液 pH 7.2

【保存条件】

室温保存，有效期12个月

【概述】

含钙组织（如骨骼、牙齿或钙化肿瘤组织）由于钙盐硬度极大，无法直接进行石蜡包埋切片。必须在固定后进行脱钙处理，使组织变软。EDTA脱钙速度较慢，通常需要数周。

作用机制：EDTA（乙二胺四乙酸）是一种螯合剂，它能与骨盐中的钙离子结合形成可溶性的螯合物，从而缓慢地去除钙盐。

产品优势：

1. 抗原保护：相比酸性脱钙液，EDTA环境温和，对组织结构和酶活性影响极小，是免疫组化 (IHC) 和原位杂交 (ISH) 的首选。

2. 形态稳定：不会引起组织肿胀或损害纤维结构。

【操作方法】

1. 取材：骨组织取材厚度建议控制在5 mm以内。组织块越薄，脱钙效率越高。

2. 固定（关键）：组织应先经4％组织/细胞固定液（ES-8100）固定24–48 小时。 注：严禁未固定直接脱钙，否则会导致组织自溶。

3. 漂洗：固定后，用PBS或蒸馏水漂洗3次，每次20分钟。

4. 脱钙：将组织浸泡在20-30倍体积的EDTA脱钙液中。密封容器，置于平摇床上缓慢晃动以提高效率。更换频率：每3-7天更换一次新鲜脱钙液。

5. 后续：脱钙完成后，用蒸馏水充分冲洗，即可进行后续的脱水、包埋程序。

【脱钙终点的测定】

准确判断脱钙终点是保证切片质量的关键：

1. 物理检测法（常用）：用针头刺入组织，若无阻力、手感柔软且无“砂砾感”即可终止。注意避免在重要观察部位穿刺。

2. X线检测法（最准确）：通过 X 光片观察骨组织影像，若密度降至软组织水平，则脱钙彻底。

3. 化学检测法：取少量脱钙旧液，加入等量草酸铵溶液，若无浑浊产生，说明已无钙离子释出。

【注意事项】

1. 容器选择：必须使用玻璃或塑料容器。禁止使用金属容器，因为EDTA会腐蚀金属并干扰螯合反应。

2. 温度控制：适当加温可加速脱钙，但绝对不可超过60°C，否则会导致骨组织胶原纤维变性。

3. 彻底冲洗：脱钙结束后必须用蒸馏水充分冲洗，残留的EDTA可能会干扰后续的苏木素（Hematoxylin）染色。

4. 时间控制：脱钙不足会导致切片崩刀、碎裂；脱钙过度（极长期浸泡）则可能导致组织结构松散。

5. 安全防护：本品为科研试剂，请穿实验服并戴一次性丁腈手套操作。