产品描述
【保存条件】
4℃避光储存，有效期12个月
【概述】
本产品为16%多聚甲醛 (PFA) 的磷酸盐 (PBS) 缓冲溶液。作为一种高纯度、不含甲醇的固定剂储备液，广泛应用于 IHC、IF、FACS及电子显微镜（EM）样本的制备。
高纯度保障：相比普通甲醛，PFA 储备液能更精确地保护组织微细结构及核酸完整性，防止抗原弥散。
应用优势：适用于皮肤、肌肉、内脏及各类培养细胞。主要通过蛋白质共价交联终止酶促反应，防止组织自溶。
灵活稀释：高浓度设计，可根据实验需求精确稀释为 4%、2% 或其他工作浓度。
【概述】
1. 工作液配制 (以配制 4% PFA 为例)
1份16% PFA储备液+3份0.01M PBS缓冲液。 (如取100 ml 16%PFA接入300 ml PBS 中。)
2. 样本固定参考表 (使用稀释后的 4% 工作液)
样本类型 | 建议用量 | 建议时间 | 操作要点 |
培养细胞 | 覆盖样品即可 (六孔板约1 mL/孔) | 室温10-30分钟 | 去除培养液用PBS清洗2-3次后加入固定液 |
组织切片 | 覆盖切片表面 (约200-500 μL) | 室温10-30分钟 | 或使用染色缸浸泡固定；厚切片（>10 μm）需延长至1小时 |
组织块 | 10 : 1至20 : 1 (体积比) | 4℃或室温 2-24小时 | 用量必须至少为组织体积的10倍以上，确保渗透充分 |
【注意事项】
1. 储存细节：16% PFA在4°C存放过久易产生沉淀或氧化。建议收到后进行小量分装并于-20°C冻存，使用前解冻。若解冻后有微量沉淀，可37°C水浴温育溶解。
2. 严控固定时间：组织块固定通常不宜超过24小时。过度固定会导致组织硬化变脆，且严重的蛋白交联会掩盖抗原决定簇，导致免疫组化假阴性。
3. 抗原修复：经PFA固定的样本在进行IHC检测时，通常需要进行抗原热修复或酶修复以暴露被掩盖的抗原位点。
4. 安全防护：多聚甲醛具有高度刺激性、挥发性与毒性。操作必须在通风橱内进行，佩戴口罩、手套并穿实验服。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 500ml
应用领域
本产品适用于ES-8103、细胞及组织固定、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
4℃避光储存
常见问题 (FAQ)
保存条件？
试剂：4℃/-20℃ 12 个月（最佳）；浑浊或析出立即丢弃。
甲醛安全？
甲醛是已知致癌物：① 戴双层手套 + 实验服；② 通风柜内操作；③ 专用废液收集（不可与酸混合）；④ 实验后立即洗手；⑤ 怀孕人员避免接触。急救：皮肤接触立即大量水冲洗；眼睛接触紧急冲洗 15 分钟 + 就医。
固定后样品s如何保存？
短期（数天至数周）可直接在 4°C PBS 中浸泡；若需保存数周至数月，脱水后转入 4°C 70% 乙醇；长期保存（数年乃至数十年）则推荐石蜡包埋后室温密封储存。需注意避免固定后样品常温干燥（导致蛋白氧化降解）及反复冻融。
与冰甲醇 / 冰丙酮固定的差异？
多聚甲醛与冰甲醇/丙酮的固定机制不同：前者通过蛋白共价交联固定，形态保留效果更好，抗原保留完整，是免疫荧光实验的标准选择；后者通过蛋白沉淀变性固定，形态保留稍差，且可能破坏部分抗原，仅在某些特殊抗原的检测中使用。
与多聚甲醛粉末自配的对比？
多聚甲醛（PFA）粉末自配：① 称量 + NaOH 加热溶解（70℃ 30 分钟）；② pH 调至 7.4；③ 过滤；④ 当天用完（甲醛会重新聚合）。本品（即用）：节省时间、批次一致、24 小时内仍可用。选择：日常 → 本品；大规模研究 → 自配。
固定后保存为什么泡 PBS 而不是继续泡 PFA？
固定和保存是两个阶段。固定阶段样品浸泡在 PFA 中使蛋白质交联；固定完成后需用 PBS 充分漂洗去除残余 PFA，再转入 PBS 中保存。若继续浸泡在 PFA 中会导致过度固定，损伤组织结构并影响后续实验的抗原性。
4% 与 10% 的选择？
4%（细胞 IF / 组织 IHC 标准）：保留细胞形态最佳；10%（石蜡切片标准）：用于石蜡切片前组织固定，过夜固定常用。选择：① 细胞 IF → 4%；② 石蜡切片 → 10%；③ 流式 → 1%。
固定时间的关键？
细胞 IF：10–15 分钟（4% 室温）；组织切片：≥4 小时（厚度依赖，1 mm 厚 4 小时；10 mm 厚 24 小时）；流式样品：10 分钟（1%）足够；ChIP（蛋白-DNA 交联）：1% 仅 10 分钟（避免过度交联影响后续超声断裂）。
使用方法？
典型流程（细胞 IF）：① 弃培养基；② PBS 洗 1 次；③ 加入本固定液（16%）室温 10–15 分钟；④ PBS 洗 3 次；⑤ Triton X-100 透膜（如 0.1% 10 分钟）；⑥ 后续封闭、抗体孵育、显色。
本浓度（16%）的典型应用？
16%：储液浓度，用前稀释为 4% 工作液
本产品的核心特点？
16% 组织 / 细胞固定液（甲醛或多聚甲醛配制）。机制：甲醛与蛋白氨基（特别是赖氨酸）形成共价交联，固定细胞结构，保留组织 / 细胞形态用于后续染色。用途：① 细胞 IF / IHC 固定；② 组织切片前固定；③ 流式样品固定；④ 病理学样本制备。
