ES-8450 MycoElim支原体清除剂（1000×）

慎用情况：① 生长极慢的细胞（如某些原代神经元、iPSC）——本品对支原体作用快但对宿主细胞负担也大；② 已经状态很差的细胞——优先丢弃换库存；③ 诱导分化关键期的细胞——避免代谢扰动；④ CAR-T/临床转化细胞——需评估残留。最佳人群：① 稳定细胞系 (HEK293, HeLa, CHO 等)；② 状态尚好的污染细胞；③ 不可替代的珍贵细胞库——本品的核心价值在此。

清除失败原因：① 物理隔离不严——交叉污染从其他污染源持续传入；② 培养基/胰酶/血清污染源未排查；③ 培养箱内长期支原体定植——需深度清洁；④ 疗程中断或过短——必须连续 7–14 天；⑤ 耐药支原体株——罕见但存在。复发常见原因：① 未做后续预防（建议切 ES-8440）；② 共用培养箱二次感染；③ 未及时丢弃污染液氮冻存细胞——支原体可在液氮中存活。最佳实践：清除后 3 个月内每月 PCR 检测一次。

第 1–14 天清除阶段：① 隔离污染细胞（独立培养箱）；② 1:1000 加入本品；③ 每次换液/传代均补加；④ 观察细胞状态——若毒性明显可改 1:2000；⑤ 不可中断——支原体生长慢，间断治疗易耐药。第 15–16 天验证阶段：① 停药 2 天；② PCR 检测上清液或 DAPI/Hoechst 染色检查胞内寄生；③ 必须双重验证——单一阴性可能假阴。第 17 天 +：① 验证阴性 → 切换 ES-8440 双抗 Plus 长期预防；② 仍阳性 → 延长 1 周或丢弃细胞重新购买。最长疗程：4 周（注意）。

支原体的特殊性：① 直径仅 0.1–0.3 µm（细菌通常 1–2 µm）；② 无细胞壁——青霉素（作用于细胞壁合成）完全无效；③ 依赖宿主细胞代谢——很多代谢通路与哺乳动物细胞高度相似，多数抗生素副作用大。本品作用机制：通过抑制支原体 DNA 复制 + 蛋白质合成实现清除——靶向支原体特有/差异化的代谢通路，避开哺乳动物细胞共用通路，最大程度降低对宿主细胞的损伤。这是与普通抗生素的根本差异。

-20℃ 避光储存，有效期 24 个月。操作准备：使用前确保瓶盖密封，从 -20℃ 取出并解冻至室温。轻轻漩涡混匀，使用 70% 乙醇擦拭管壁外表面，随后移入超净工作台内。

注意：处理时限：为保护细胞状态，单次清除周期建议为 2 周，最长不建议超过连续 4 周。 补救原则：支原体清除的最佳原则仍为高压灭菌后丢弃污染细胞，本品仅建议用于无法替代的珍贵细胞株的挽救。 交叉污染防控：严防交叉污染：在处理受污染细胞期间，请务必严格物理隔离。建议使用独立的培养箱、培养基及操作台，防止支原体扩散至洁净细胞。 后续预防：建议污染清除后，后期培养可换用双抗 Plus（ES-8440）进行常规预防。

清除处理阶段（第 1–14 天）：添加比例：在受污染的细胞中，按 1:1000 比例加入 MycoElim。例如：每 10 mL 完全培养基中加入 10 µL 清除剂。持续作用：连续培养 7–14 天。期间若需换液或传代，新加入的完全培养基中必须按同等比例补加清除剂。浓度微调（可选）：多数细胞对本品耐受良好。若观察到细胞生长明显变慢或形态异常，可将稀释比例调整为 1:2000 后继续使用。验证阶段：停药培养：持续处理 14 天后，换成不含支原体清除剂的完全培养基，正常培养 2 天。效果检测：收集细胞培养上清液，建议使用 PCR 法或荧光染色法进行支原体检测，确认污染已彻底清除。

ES-8450（本品，清除级）：① 1000× 浓缩——使用量极小；② 靶向支原体 DNA 复制 + 蛋白合成；③ 用于已污染细胞挽救。普通双抗（如 ES-8438）：完全无效——青链霉素作用于细胞壁，支原体无细胞壁。支原体感染后处理流程：① 隔离污染细胞；② 本品 1:1000 处理 7–14 天；③ 验证；④ 恢复后用 ES-8440 双抗 Plus 维持预防。

支原体（Mycoplasma）直径仅为 0.1–0.3 µm，且无细胞壁，传统的青链霉素（P/S）对其完全无效。本产品是一种经过改良的广谱抗支原体混合制剂，通过高效抑制支原体 DNA 复制及蛋白质合成来达到彻底清除效果。其作用机制避开了动物细胞常见的代谢通路，在清除支原体的同时，能最大程度降低对珍贵细胞株的损伤。