【保存条件】
-20℃保存,有效期12个月
【概述】
卡那霉素(Kanamycin)是一种氨基糖苷类抗生素,通过结合细菌核糖体30S亚基抑制蛋白质合成。在分子克隆中,广泛用于筛选含有kanR基因(如pET系列、pUC系列部分载体)的阳性转化子。
高倍浓缩:本品浓度为100 mg/ml。作为2000×储备液,比常规抗生素更节省添加量,且性质极其稳定。
无菌保障:经0.22 μm滤膜过滤除菌,可直接加入已灭菌的培养基中。
筛选优势:与氨苄青霉素相比,卡那霉素不易被细菌分泌的酶降解,因此在固体平板上极少产生卫星菌落,筛选结果更清晰。
【使用方法】
1. 准备:使用前须完全解冻并充分混匀。
2. 工作浓度:卡那霉素的常规工作浓度为50 μg/mL。
3. 添加比例:按照1:2000的比例加入培养基中。示例:在200 mL培养基中加入100 μL 卡那霉素储存液。
4. 操作时机:
液体培养:待培养基冷却至室温后直接加入并混匀。
倒平板:必须确保灭菌后的固体培养基冷却至50-60°C(手摸不烫手)时再加入。过高的温度(> 65°C)会导致氨苄青霉素迅速降解失效。
【注意事项】
1. 筛选严谨性:卡那霉素的筛选压力较大,转化子生长速度可能略慢于氨苄青霉素抗性株,属于正常现象。
2. 安全防护:仅限科研使用。操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。本品具有潜在的氨基糖苷类毒性,请避免接触皮肤和吸入。