【保存条件】
-20℃保存,有效期12个月
【概述】
氨苄青霉素(Ampicillin)是一种广谱内酰胺类抗生素,通过抑制细菌细胞壁合成起到杀菌作用。在分子生物学实验中,常用于筛选含有bla基因(氨苄抗性基因)的转化子。
高纯度配制:采用优质氨苄青霉素钠(Ampicillin sodium)与超纯水配制,浓度为100 mg/mL(1000×储备液)。
无菌保障:经0.22 μm滤膜过滤除菌,无需二次处理即可直接加入培养基。
应用场景:适用于LB、2×YT等各类液体培养基及固体平板培养基的抗性筛选。
【使用方法】
1. 准备:使用前须完全解冻并充分混匀。
2. 工作浓度:氨苄青霉素的常规工作浓度为100 μg/mL(推荐范围50-100 μg/mL)。
3. 添加比例:按照1:1000的比例加入培养基中。示例:在100 mL培养基中加入100 μL 氨苄青霉素储存液。
4. 操作时机:
液体培养:待培养基冷却至室温后直接加入并混匀。
倒平板:必须确保灭菌后的固体培养基冷却至50-60°C(手摸不烫手)时再加入。过高的温度(> 65°C)会导致氨苄青霉素迅速降解失效。
【注意事项】
1. 避免卫星菌落:氨苄青霉素由于其杀菌机制,在平板长时间培养(超过16-20小时)后,由于抗生素被分泌的内酰胺酶降解,大菌落周围可能会出现微小的“卫星菌落”。建议及时观察实验结果。
2. 安全防护:仅限科研使用。操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。个别人员可能对青霉素类药物过敏,操作时请避免皮肤直接接触或吸入。