ES-8218 蛋白酶K溶液(10mg/mL)

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【保存条件】

-20℃保存,有效期12个月


【概述】

蛋白酶 K (Proteinase K) 是一种切割活性极强的枯草杆菌蛋白酶类,因其能降解角蛋白 (Keratin) 而得名。本品具有极广的生化适应性,在 pH 4.0–12.5(最适 pH 7.5–8.0)范围内均保持高效切割活性,且在SDS、尿素等变性剂存在下活性进一步增强;尽管其理论最适反应温度为65°C,但为规避高温诱发的快速自降解,实验中通常推荐在50-55°C 条件下进行,以兼顾酶促效率与体系稳定性。

应用广泛:常用于基因组DNA/RNA抽提中原位灭活核酸酶、酶切反应后的蛋白消化去除,以及组织样品的消化。

即用型:已配制为10 mg/mL 稳定液,可直接加入反应体系。


使用建议 

1. 兼容性:常规浓度的 EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍等对酶活力影响极小。

2. 工作浓度:常用工作浓度范围为0.05-1 mg/mL。
示例:在100 μL消化体系中,加入1-5 μL蛋白酶K溶液(终浓度约0.1-0.5 mg/mL)。具体浓度请根据样品类型(如组织、细胞或血液)及缓冲液条件进行优化。


【注意事项】

1. 分装保存:蛋白酶 K 虽然性质稳定,但仍应尽量减少反复冻融。建议收到产品后根据单次用量进行小量分装。

2. 失活条件:若需终止反应,可通过加热至95-100°C维持10分钟使其彻底失活(注意:此操作会引起DNA变性,若需热失活且保护DNA双链,可尝试80°C处理15分钟)。

3. 安全防护:请务必穿着实验服并佩戴一次性手套,避免皮肤直接接触或吸入气溶胶。本品仅限科研使用,严禁用于临床诊断或人体治疗。

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