产品描述
【保存条件】
4℃避光保存，有效期12个月；-20℃避光保存，有效期24个月
【概述】
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 采用高灵敏度的四唑盐 WST-8，在电子耦合试剂存在下，被细胞线粒体脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲脒（Formazan）。
高灵敏度：灵敏度显著高于MTT、XTT或MTS。
安全性：无放射性，对细胞无毒。
简便性：无需预配，无需有机溶剂溶解沉淀，直接在培养基中显色。
【使用方法】
1. 细胞接种：在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。将培养板置于培养箱中预培养（如24小时）。建议密度：贴壁细胞2000-10000个/孔；悬浮细胞5000-20000个/孔。
2. 添加药物（针对毒性实验）：向孔内加入不同浓度的待测药物。置于培养箱中孵育特定的时间（如6-48小时）。
3. 显色反应：
① 向每孔加入10μL CCK-8 溶液。注：若孔内原有培养基体积不是100μL，请按10% 的比例添加CCK-8。避免在加入时产生气泡，气泡会严重干扰读数。
② 将培养板置于培养箱内（37℃）孵育0.5-4小时。
4. 吸光度测定：使用酶标仪测定450nm处的吸光度。若无450nm滤光片，可使用430-490之间的滤光片。
【对照设置与计算】
为了获得严谨的实验结果，建议设置以下对照：
组别 | 培养基 | 细胞 | 待测物质 |
实验孔 (As) | 有 | 有 | 有 |
对照孔 (Ac) | 有 | 有 | 无 |
空白孔 (Ab) | 有 | 无 | 无 |
计算公式：细胞活力= [(As-Ab) / (Ac-Ab)]×100%
【注意事项】
1. 药物干扰检测：若待测药物具有氧化还原性（如Vc、DTT），会在无细胞情况下直接还原CCK-8。对策：在加入CCK-8前，吸除含药培养基，用PBS洗涤两次，换入新鲜培养基。
2. OD值过高（> 2.5）：说明细胞生长过密或孵育时间过长。对策：减少接种密度，或缩短 CCK-8 加入后的孵育时间（如减至0.5小时）。
3. OD 值过低（< 0.5）：说明细胞活性低或接种量太少。对策：增加接种密度，或延长CCK-8 加入后的孵育时间（如增至4小时）。
4. 悬浮细胞注意事项：悬浮细胞由于代谢较慢，建议增加接种量，且加入CCK-8后孵育时间通常需要延长。
5. 安全防护：为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100T、500T、1000T、10000T
应用领域
本产品适用于EK-5103、增殖检测、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
4℃避光保存，有效期12个月；-20℃避光保存
常见问题
该产品如何保存？
请参照产品说明书中的保存条件。一般生物科研试剂建议在2-8℃或-20℃条件下保存，避免反复冻融。具体保存条件请以产品标签为准。
该产品的货期是多久？
ECOTOP SCIENTIFIC常规库存产品一般1-3个工作日内发货。如遇缺货情况，客服会及时与您沟通预计到货时间。
如何获取产品的技术支持？
您可以通过电话（15622108587）或在线客服联系我们的技术支持团队。我们提供产品使用指导、实验方案优化等专业技术服务。
