EK-5102 台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒

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【保存条件】

室温保存,有效期12个月


【概述】

台盼蓝(Trypan Blue)是一种细胞活性染料。其检测原理基于细胞膜的通透性:

活细胞:具备完整的细胞膜,能够主动排除台盼蓝,在显微镜下呈现透明、发亮的圆形。

死细胞:细胞膜受损或丧失完整性,染料进入胞内与细胞质结合,使其染成蓝色。

本试剂盒操作简便、染色迅速(3–5分钟),是实验室评估细胞接种前活力、药物处理后死亡率的“金标准”。


使用方法

1. 收集细胞:用胰酶或EDTA消化贴壁细胞,悬浮细胞可直接收集。收集细胞时建议以 200-300 ×g离心3-5分钟,弃上清,加入适量EK-5102B细胞重悬液将细胞调至合适浓度(建议105-106个/mL)。

2. 台盼蓝染色:细胞悬液与台盼蓝染色液(2×)以1:1比例混匀,室温避光染色3-5分钟。
注:染色时间不宜超过10分钟,以免染料产生细胞毒性导致活力计数偏低。

3. 细胞计数:吸取少量染色后的细胞进行镜下计数。
死细胞:着蓝色并膨大,无光泽;
活细胞:不着色,保持正常形态,有光泽。

4. 计算公式:

细胞存活率(%)=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%


【注意事项】

1. 沉淀处理:本品长时存放或低温储存可能产生少量颗粒状沉淀。若出现沉淀,请置于 37°C水浴约10分钟以充分溶解,溶解后不影响正常使用。

2. 背景干扰:若培养基中血清浓度过高,可能会产生蛋白质沉淀或背景背景色,建议尽量使用重悬液进行操作。

3. 时间控制:染色时间必须严格控制。孵育过久会导致“假阳性”(活细胞也变蓝)。

4. 安全防护:操作时请务必穿着实验服并佩戴一次性手套。本品仅限于实验室科研使用。

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