产品描述
【保存条件】
室温保存，有效期12个月
【概述】
台盼蓝（Trypan Blue）是一种细胞活性染料。其检测原理基于细胞膜的通透性：
活细胞：具备完整的细胞膜，能够主动排除台盼蓝，在显微镜下呈现透明、发亮的圆形。
死细胞：细胞膜受损或丧失完整性，染料进入胞内与细胞质结合，使其染成蓝色。
本试剂盒操作简便、染色迅速（3–5分钟），是实验室评估细胞接种前活力、药物处理后死亡率的“金标准”。
【使用方法】
1. 收集细胞：用胰酶或EDTA消化贴壁细胞，悬浮细胞可直接收集。收集细胞时建议以 200-300 ×g离心3-5分钟，弃上清，加入适量EK-5102B细胞重悬液将细胞调至合适浓度（建议105-106个/mL）。
2. 台盼蓝染色：细胞悬液与台盼蓝染色液(2×)以1:1比例混匀，室温避光染色3-5分钟。
注：染色时间不宜超过10分钟，以免染料产生细胞毒性导致活力计数偏低。
3. 细胞计数：吸取少量染色后的细胞进行镜下计数。
死细胞：着蓝色并膨大，无光泽；
活细胞：不着色，保持正常形态，有光泽。
4. 计算公式：
细胞存活率（%）=（细胞总数-蓝色细胞数）/细胞总数×100%
【注意事项】
1. 沉淀处理：本品长时存放或低温储存可能产生少量颗粒状沉淀。若出现沉淀，请置于 37°C水浴约10分钟以充分溶解，溶解后不影响正常使用。
2. 背景干扰：若培养基中血清浓度过高，可能会产生蛋白质沉淀或背景背景色，建议尽量使用重悬液进行操作。
3. 时间控制：染色时间必须严格控制。孵育过久会导致“假阳性”（活细胞也变蓝）。
4. 安全防护：操作时请务必穿着实验服并佩戴一次性手套。本品仅限于实验室科研使用。
产品规格
- 货期
- 1-2天
- 规格
- 100T
应用领域
本产品适用于EK-5102、增殖检测、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
室温保存，有效期 12 个月。注意：台盼蓝是潜在致畸物（动物实验中报告），废液按生物染料废液处理。
失活细胞计数的应用？
反向应用——计算死亡率：① 化疗药物处理后死亡率评估（蓝色细胞 / 总细胞数）；② 凋亡诱导剂处理后；③ 物理方法（冻融、加热、紫外）杀伤效率评估；④ 病毒包装时细胞溶解程度。注意：本品仅检测膜完整性，无法区分早期凋亡（膜尚完整）与坏死（膜已破裂）；区分凋亡需用 Annexin V 或 EK-5601 PI 染色。
与自动细胞计数仪的搭配？
本品兼容：① 传统血球计数板（Neubauer）+ 显微镜人工计数；② 自动细胞计数仪（如 Bio-Rad TC20、Countess II 等）——本品台盼蓝浓度（2×）与商品化自动计数仪所需浓度一致，可直接互换。注意：自动计数仪需要校准，不同仪器对死细胞判断阈值略有差异。
可用于哪些应用场景？
适用：① 细胞冻存前活力评估（新鲜培养细胞活力 ≥90% 才适合冻存）；② 细胞复苏后活力检测；③ 接种前细胞活力 QC；④ 细胞处理后存活率（如电转后、转染后）；⑤ 简易药物毒性筛查；⑥ 类器官 / 球体细胞解离后活力；⑦ CAR-T / iPSC 等过继细胞治疗前的质量控制。
常见误差来源？
① 沉淀处理：本品长时存放或低温储存可能产生少量颗粒状沉淀。若出现沉淀，请置于 37℃ 水浴约 10 min 以充分溶解；② 背景干扰：若培养基中血清浓度过高，可能会产生蛋白质沉淀或背景背景色，建议尽量使用重悬液进行操作；③ 时间控制：染色时间必须严格控制。孵育过久会导致假阳性（活细胞也变蓝）——>10 min 时染料毒性会杀死活细胞。
与 EK-5103 CCK-8 的区别？
EK-5102 台盼蓝（本品）：① 基于细胞膜完整性判断活/死；② 显微镜下计数（人工或自动计数仪）；③ 适合单次细胞接种前的活力评估；④ 通量低但直观；⑤ 廉价。EK-5103 CCK-8：① 基于细胞代谢活性（线粒体脱氢酶）；② 96 孔板 + 酶标仪读数；③ 适合药物剂量梯度筛选（IC50）；④ 高通量；⑤ 价格略高。选择：① 接种前细胞活力检查 → EK-5102；② 药物筛选 → EK-5103。
判读规则？
① 活细胞：不着色，保持正常形态，有光泽；② 死细胞：着蓝色并膨大，无光泽。计算公式：细胞存活率（%）=（细胞总数 - 蓝色细胞数）/ 细胞总数 × 100%。
使用方法？
① 收集细胞：胰酶或 EDTA 消化贴壁细胞，悬浮细胞直接收集。200–300×g 离心 3–5 min 弃上清，加适量 EK-5102B 细胞重悬液将细胞调至合适浓度（建议 10⁵–10⁶ 个/mL）；② 台盼蓝染色：细胞悬液与台盼蓝染色液（2×）以 1:1 比例混匀，室温避光染色 3–5 min——注：染色时间不宜超过 10 min，以免染料产生细胞毒性导致活力计数偏低；③ 细胞计数：吸取少量染色后的细胞进行镜下计数。
本试剂盒的核心特点？
台盼蓝（Trypan Blue）是一种细胞活性染料。其检测原理基于细胞膜的通透性：① 活细胞：具备完整的细胞膜，能够主动排除台盼蓝，在显微镜下呈现透明、发亮的圆形；② 死细胞：细胞膜受损或丧失完整性，染料进入胞内与细胞质结合，使其染成蓝色。本试剂盒操作简便、染色迅速（3–5 min），是实验室评估细胞接种前活力、药物处理后死亡率的金标准。
