ES-8246 VisiColor DAPI即用型染色液(1mg/mL)

【保存条件】

-20℃避光保存，有效期12个月

【概述】

DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐）是一种高灵敏度的蓝色荧光染料，能特异性地结合双链DNA 中的A-T碱基。产品特性：

高浓度母液：本品使用ROCHE原料，浓度为1 mg/mL，使用前需稀释，性价比极高。

穿透性强：适用于固定细胞/组织染色。（若需活细胞染色，建议选购 ES-8256 VisiColor Hoechst 33342）。

多重染色兼容：最大吸收波长为358 nm，最大发射波长为461 nm（蓝色）。其发射光谱与GFP（绿色）或Texas Red（红色）重叠极少，是多重荧光染色的理想对照。

【使用方法】

1. 工作液配制（关键步骤）：本品为100×母液。正式使用前，请使用PBS稀释至工作浓度（推荐范围：1–10μg/mL）。示例：取10μL母液加入990μL PBS中，混匀即得10μg/mL的工作液。

2. 样本预处理：细胞或组织需先经固定（如用ES-8100 4％组织/细胞固定液），后充分洗涤去除固定剂。
重要提示：若需进行免疫荧光（IF）染色，请务必在完成所有抗体孵育与洗涤后，再进行DAPI染色。

3. 染色操作：
贴壁细胞/组织切片：加入适量DAPI染色液，确保完全覆盖样品。
悬浮细胞：按照待染样品体积的3倍量加入染色液，轻轻混匀。

4. 孵育：室温避光孵育5–10分钟。

5. 洗涤：吸除染色液，使用PBS洗涤2–3次，每次3–5分钟，以降低背景荧光。

6. 观察：直接在荧光显微镜下观察，或使用抗荧光淬灭封片液封片后观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

【注意事项】

1. 防淬灭：荧光染料均存在光淬灭。建议染色后尽快完成检测；长期保存使用抗荧光淬灭封片液(ES-8313)。

2. 安全防护：DAPI被普遍认为具有潜在的诱变性/致癌性。操作时请务必佩戴一次性手套。