产品描述
【保存条件】
-20℃避光保存,有效期12个月
【概述】
DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种高灵敏度的蓝色荧光染料,能特异性地结合双链DNA 中的A-T碱基。产品特性:
高浓度母液:本品使用ROCHE原料,浓度为1 mg/mL,使用前需稀释,性价比极高。
穿透性强:适用于固定细胞/组织染色。(若需活细胞染色,建议选购 ES-8256 VisiColor Hoechst 33342)。
多重染色兼容:最大吸收波长为358 nm,最大发射波长为461 nm(蓝色)。其发射光谱与GFP(绿色)或Texas Red(红色)重叠极少,是多重荧光染色的理想对照。
【使用方法】
1. 工作液配制(关键步骤):本品为100×母液。正式使用前,请使用PBS稀释至工作浓度(推荐范围:1–10μg/mL)。示例:取10μL母液加入990μL PBS中,混匀即得10μg/mL的工作液。
2. 样本预处理:细胞或组织需先经固定(如用ES-8100 4%组织/细胞固定液),后充分洗涤去除固定剂。
重要提示:若需进行免疫荧光(IF)染色,请务必在完成所有抗体孵育与洗涤后,再进行DAPI染色。
3. 染色操作:
贴壁细胞/组织切片:加入适量DAPI染色液,确保完全覆盖样品。
悬浮细胞:按照待染样品体积的3倍量加入染色液,轻轻混匀。
4. 孵育:室温避光孵育5–10分钟。
5. 洗涤:吸除染色液,使用PBS洗涤2–3次,每次3–5分钟,以降低背景荧光。
6. 观察:直接在荧光显微镜下观察,或使用抗荧光淬灭封片液封片后观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
【注意事项】
1. 防淬灭:荧光染料均存在光淬灭。建议染色后尽快完成检测;长期保存使用抗荧光淬灭封片液(ES-8313)。
2. 安全防护:DAPI被普遍认为具有潜在的诱变性/致癌性。操作时请务必佩戴一次性手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 1ml
应用领域
本产品适用于ES-8246、细胞染色、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃避光保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存?
-20℃ 避光保存,有效期 12 个月。
DAPI 与 Hoechst 系列染料如何选择?
三款染料的核心区别在于透膜性和适用样本:DAPI(本品)不易透过活细胞膜,主要用于固定样本,是免疫荧光实验的标准核染染料;Hoechst 33258 透膜性居中,固定样本和活细胞均可使用,性价比较好;Hoechst 33342 亲脂性强、透膜能力最强,是活细胞染色的首选,也常用于流式细胞术 SP 细胞分选。
稀释后保存?
稀释后的工作液:4℃ 避光可保存 1–2 周;不建议冻存(反复冻融损失活性)。最佳实践:① 按需稀释,每次稀释少量(5–10 mL 工作液即可染数百细胞片);② 工作液避光 4℃ 保存;③ 母液严格 -20℃ 避光保存。
操作注意事项?
注意:安全防护:DAPI 被普遍认为具有潜在的诱变性/致癌性。操作时请务必佩戴一次性手套。——所有 DNA 嵌入式染料都有潜在致畸/致癌性,必戴手套。
染色后保存?
提示:防淬灭:荧光染料均存在光淬灭。建议染色后尽快完成检测;长期保存使用抗荧光淬灭封片液(ES-8313)。——配合 ES-8312 抗荧光淬灭封片剂 或 ES-8313(含 DAPI 版) 封片后 4℃ 避光保存数周到几个月。
可用于哪些应用场景?
适用:① 大规模 IF 实验室核染(高频使用);② 多重染色多通道兼容;③ 细胞周期分析;④ 凋亡形态学评估;⑤ 配合 EK 系列染色试剂盒(油红 O 后核染、HE 染色后核染等);⑥ 共聚焦显微镜成像;⑦ 配套使用 ES-8313 抗荧光淬灭封片液(含 DAPI)作为高效一步染色封片方案。
使用方法?
① 样本预处理:细胞或组织先固定(如 ES-8100 4% PFA),充分洗涤去除固定剂。重要提示:若需进行 IF 染色,请务必在完成所有抗体孵育与洗涤后,再进行 DAPI 染色;② 染色:贴壁细胞/切片加染色液覆盖;悬浮细胞按 3 倍体积加入;③ 室温避光孵育 5–10 min;④ PBS 洗涤 2–3 次每次 3–5 min;⑤ 直接观察或使用抗荧光淬灭封片液(ES-8313)封片。
工作液配制?
工作液配制(关键步骤):本品为 100× 母液。正式使用前,请使用 PBS 稀释至工作浓度(推荐范围:1–10 µg/mL)。示例:取 10 µL 母液加入 990 µL PBS 中,混匀即得 10 µg/mL 的工作液。——工作浓度可灵活调整:① 标准 IF 染色:10 µg/mL;② 减少背景:5 µg/mL;③ 厚组织切片:2 µg/mL(避免过染)。
与 ES-8245(即用型 10 µg/mL)的关键区别?
ES-8246(本品,1 mg/mL 母液):100× 浓缩——需稀释(1:100)至工作浓度,性价比极高;ES-8245(即用型 10 µg/mL):直接使用、便捷。选择:① 大规模 IF 实验室、控制成本 → 本品;② 偶尔使用、追求便捷 → ES-8245。注意:本品 1 mL 稀释成 100 mL 工作液,相当于 10 mL 即用型的 10 倍量。
本产品的核心特点?
DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种高灵敏度的蓝色荧光染料,能特异性地结合双链 DNA 中的 A-T 碱基。高浓度母液:本品使用 ROCHE 原料,浓度为 1 mg/mL,使用前需稀释,性价比极高。穿透性强:适用于固定细胞/组织染色(若需活细胞染色,建议选购 ES-8256 VisiColor Hoechst 33342)。多重染色兼容:最大吸收波长 358 nm,最大发射波长 461 nm(蓝色)。其发射光谱与 GFP(绿色)或 Texas Red(红色)重叠极少,是多重荧光染色的理想对照。

