Question 1

试剂如何保存？

Accepted Answer

2–8℃ 避光保存，有效期 12 个月。

Question 2

注意事项？

Accepted Answer

注意：① 避光操作：荧光染料易淬灭，全程需注意避光；② PI 是已知的诱变剂，操作时务必佩戴一次性手套，避免皮肤接触；③ 即刻检测：染料与 DNA 的结合是动态的，染色后即刻上机。

Question 3

与 EB（EK-5805）的对比？

Accepted Answer

PI 与 EB 都是嵌入式 DNA 染料，光谱性质相似：① PI：分子量 668，流式标准，与多种荧光抗体配色兼容性好；② EB：分子量 394，价格更经济。选择：流式细胞术首选 PI（本品）；经济快速死活检测可用 EB。

Question 4

可用于哪些应用场景？

Accepted Answer

适用：① 流式细胞术活力鉴定（活细胞 PI⁻、死细胞 PI⁺）；② 细胞周期分析（固定后 PI 染色，sub-G1 凋亡峰）；③ 凋亡晚期检测（与 Annexin V-FITC 联用 — Annexin⁺PI⁻早凋、Annexin⁺PI⁺晚凋）；④ 病毒/药物杀伤效率评估；⑤ 免疫细胞分选前的活力评估；⑥ 多色流式综合分析。

Question 5

染色后即刻上机的关键？

Accepted Answer

注意：重要提示：PI 染色后不可再清洗。孵育完成后应尽快上机，拖延时间过长会导致活细胞出现非特异性染色。——PI 与 DNA 的结合是动态的，且活细胞长时间暴露在染色液中会受损。最佳实践：染色 10–15 min 后立即上机，不要超过 30 min。

Question 6

与抗体共染时的注意？

Accepted Answer

注意：PI 不建议与胞内抗体标记联用（因透膜处理会使所有细胞被 PI 染上）。——胞内抗原 IF 染色需透膜处理，但透膜会让 PI 进入所有细胞导致死活鉴定失效。正确顺序：① 先做表面抗体染色（PI 兼容）；② 染色完毕加 PI；③ 立即上机；④ 不能再做胞内抗原染色。

Question 7

与 EK-5601（细胞周期+凋亡试剂盒）的区别？

Accepted Answer

ES-8240（本品）：单瓶 PI 染色液，灵活适合活力鉴定和周期检测；EK-5601：完整试剂盒（PI + RNase + 染色缓冲液），专为流式细胞周期+凋亡分析配套优化。选择：① 仅做流式死活鉴定 → 本品 + 流式缓冲液；② 配合细胞周期分析 → EK-5601 完整试剂盒。

Question 8

固定处理的两种场景？

Accepted Answer

注意：固定处理：① 细胞活力分析（死活鉴定）：严禁固定——PI 用于排除/识别死细胞，固定会使所有细胞被染成红色；② 细胞周期检测：必须固定（使用 70% 乙醇）——固定使细胞膜通透，所有细胞都被 PI 染色，再通过荧光强度差异区分细胞周期。——这是 PI 应用的两个完全相反的使用场景。

Question 9

使用方法？

Accepted Answer

① 细胞收集：取不超过 1×10⁶ 个细胞加入流式管中；② 洗涤：加 2 mL PBS（或 HBSS）清洗，300 g 离心 5 min，重复洗涤一次；③ 重悬与染色：100 µL 流式染色缓冲液（推荐 ED-8765）重悬细胞 + 10 µL PI 染色液，轻轻混匀；④ 孵育：冰上或室温避光孵育 10–15 min；⑤ 上机检测：单染用 FL2 通道；多染（与 FITC/PE 联用）用 FL3 通道减少补偿压力。

Question 10

本产品的核心特点？

Accepted Answer

碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种溴化乙锭（EB）的类似物，通过嵌入双链 DNA 碱基对产生荧光。PI 具有膜不通透性，被健康活细胞排除在外，但能穿过受损的细胞膜对死细胞或凋亡晚期细胞的核进行着色。本品为 Sigma 原料配制即用型 PI 染色液，成像效果更优。光谱特性：激发波长 488 nm（标准氩离子激光器）；发射波长 617 nm（红色荧光）。

ES-8240 VisiColor碘化丙啶(PI)染液(即用型)

文献引用