【保存条件】
室温避光保存,有效期12个月
【概述】
H&E 染色是病理组织切片中最常用的常规染色方法。
苏木素 (Hematoxylin):带正电荷,主要使细胞核内的DNA着色,呈现深蓝色。
伊红 (Eosin):带负电荷的酸性染料,主要与细胞浆中的蛋白质结合,呈粉红色或红色。
本品优势:采用优化后的Mayer法配方。进口原料确保了染色的高对比度,核质分明,背景极低。
【使用方法】
1. 样品前处理
A. 石蜡切片:
① 二甲苯脱蜡2次,每次5-10分钟。
② 梯度乙醇(无水乙醇→95%乙醇→ 80%乙醇→70%乙醇)各浸泡2-5分钟完成复水。
③ 蒸馏水洗涤 2 分钟。
B. 冰冻切片/细胞爬片:
① 固定液(推荐ES-81004%组织/细胞固定液 )固定10分钟以上。
② 蒸馏水洗涤2次,每次2分钟。
2. H&E染色流程
① 核染色:将处理好的样品浸入苏木素染色液 (A) 中,染色1-5分钟。注:时间可根据组织厚度及理想颜色深浅自行调整。
② 洗涤与返蓝:蒸馏水洗去浮色。使用返蓝液(推荐ES-8526)浸泡 10-60 秒,或用自来水冲洗10分钟,使核转变为蓝色。
③ 分化(选做):若要求细胞核极度清晰,可使用酸性乙醇分化液(如ES-8123) 2-30秒,随后必须用自来水冲洗10分钟彻底返蓝。
④ 胞浆染色:将样品浸入伊红染色液 (B) 中,染色30秒-2分钟。
⑤ 快速洗涤:使用70%乙醇快速洗涤2次,洗去浮色。
3. 脱水、透明与封片
① 脱水:梯度乙醇(70%乙醇→80%乙醇→ 90%乙醇→无水乙醇)各10秒。
② 透明:二甲苯透明2次,每次5分钟。
③ 封片:中性树胶封片,显微镜观察。
【结果判定】
细胞核:呈蓝色或紫蓝色。
细胞浆/结缔组织:呈粉红色至红色。
红细胞:呈鲜艳的橘红色。
【注意事项】
1. 快速脱水关键:伊红在水和梯度乙醇中极易脱色。为保证胞浆颜色鲜艳,最后的梯度酒精脱水步骤务必控制在每道10秒左右。
2. 重复利用:染液可多次使用。若发现染色变浅,请及时更换。
3. 预实验:建议初次使用时先用1-2个样品摸索最佳染色时间。
4. 安全防护:仅供科研使用。操作时请佩戴实验服与一次性手套。