产品描述
【保存条件】
室温避光保存，有效期12个月
【概述】
H&E 染色是病理组织切片中最常用的常规染色方法。
苏木素 (Hematoxylin)：带正电荷，主要使细胞核内的DNA着色，呈现深蓝色。
伊红 (Eosin)：带负电荷的酸性染料，主要与细胞浆中的蛋白质结合，呈粉红色或红色。
本品优势：采用优化后的Mayer法配方。进口原料确保了染色的高对比度，核质分明，背景极低。
【使用方法】
1. 样品前处理
A. 石蜡切片：
① 二甲苯脱蜡2次，每次5-10分钟。
② 梯度乙醇（无水乙醇→95%乙醇→ 80%乙醇→70%乙醇）各浸泡2-5分钟完成复水。
③ 蒸馏水洗涤 2 分钟。
B. 冰冻切片/细胞爬片：
① 固定液（推荐ES-81004％组织/细胞固定液 ）固定10分钟以上。
② 蒸馏水洗涤2次，每次2分钟。
2. H&E染色流程
① 核染色：将处理好的样品浸入苏木素染色液 (A) 中，染色1-5分钟。注：时间可根据组织厚度及理想颜色深浅自行调整。
② 洗涤与返蓝：蒸馏水洗去浮色。使用返蓝液（推荐ES-8526）浸泡 10-60 秒，或用自来水冲洗10分钟，使核转变为蓝色。
③ 分化（选做）：若要求细胞核极度清晰，可使用酸性乙醇分化液(如ES-8123) 2-30秒，随后必须用自来水冲洗10分钟彻底返蓝。
④ 胞浆染色：将样品浸入伊红染色液 (B) 中，染色30秒-2分钟。
⑤ 快速洗涤：使用70%乙醇快速洗涤2次，洗去浮色。
3. 脱水、透明与封片
① 脱水：梯度乙醇（70%乙醇→80%乙醇→ 90%乙醇→无水乙醇）各10秒。
② 透明：二甲苯透明2次，每次5分钟。
③ 封片：中性树胶封片，显微镜观察。
【结果判定】
细胞核：呈蓝色或紫蓝色。
细胞浆/结缔组织：呈粉红色至红色。
红细胞：呈鲜艳的橘红色。
【注意事项】
1. 快速脱水关键：伊红在水和梯度乙醇中极易脱色。为保证胞浆颜色鲜艳，最后的梯度酒精脱水步骤务必控制在每道10秒左右。
2. 重复利用：染液可多次使用。若发现染色变浅，请及时更换。
3. 预实验：建议初次使用时先用1-2个样品摸索最佳染色时间。
4. 安全防护：仅供科研使用。操作时请佩戴实验服与一次性手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml×2、500ml×2
应用领域
本产品适用于EK-5120、组化染色相关、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温避光保存
常见问题 (FAQ)
与国产苏木素的差异？
进口原料苏木素（Mayer's、Harris's、Gill's 等）与国产差异：① 染色对比度 — 进口产品蓝紫色更清晰，与红色伊红反差强；② 稳定性 — 进口产品 1 年内染色变化 <10%；③ 批间变异 — 进口 <5%，国产 10%–20%；④ 价格 — 进口约 2–3 倍国产；⑤ 适合 — 科研发表级图像、关键临床诊断 → 进口（EK-5120）；常规教学 → 国产（EK-5121）。
试剂如何保存？
苏木素染液：室温避光保存（成熟期 2–3 周即可用，1 年内稳定）；伊红染液：室温避光 1 年；酸性乙醇分化液：常温稳定 1 年。避免阳光直射（光氧化苏木素）、反复振荡（产生气泡影响染色均匀性）、高温（>30℃ 染料活性下降）。使用前苏木素如有黑色沉淀可过滤后使用。
可以用于哪些下游应用？
广泛应用：① 临床病理诊断（金标准）；② 疾病模型组织学评估（动物实验）；③ 组织学图像分析（细胞数计数、组织结构定量）；④ 教学（医学院校病理学经典实验）；⑤ 数字病理（H&E 是 AI 病理算法主要训练数据）；⑥ 特殊染色前的形态评估。
与冷冻切片的差异？
冰冻切片 H&E ：① 染色时间缩短（苏木素 1–2 分钟，伊红 30 秒）；② 不需要脱蜡水化（直接固定后染色）；③ 跳过乙醇梯度脱水（直接 70% → 95% → 100%）；④ 形态略差但速度快（10 分钟内完成全流程，适合术中快速诊断）。
可以用于哪些样品类型？
适用：① 石蜡切片（最常用，组织诊断金标准）；② 冰冻切片（手术中快速诊断）；③ 细胞学涂片（剥落细胞、宫颈刮片等）；④ 细针穿刺涂片；⑤ 印片；⑥ 细胞培养（贴壁细胞固定后染色）。不推荐含强电解质 / 强酸碱样品（影响 pH 平衡）。
分化与流蓝步骤为什么关键？
酸性乙醇分化 — 苏木素染色后，酸性溶液会去除非特异性染色（细胞质上的染料），保留核内特异性染色。控制时间 30 秒–2 分钟（精确控制可让核染色深浅符合诊断需要）。流水流蓝 — 苏木素在酸性条件下偏紫红色，碱性下变蓝紫色（返蓝）。流水冲洗 5–10 分钟使 pH 回升至中性（接近 8），核呈现典型蓝紫色。
染色异常排查？
常见问题：① 核染色过浅 — 苏木素时间不足（延长至 10 分钟）、苏木素老化失效（更换新批）；② 核染色过深 — 分化时间不足（延长至 5 秒）、苏木素时间过长；③ 整张切片浅色 — 脱蜡不充分（延长二甲苯时间至 10 分钟/次）；④ 背景过深 — 伊红浓度过高（缩短至 1 分钟）；⑤ 核 / 浆颜色对比差 — 流蓝时间不足（延长至 10 分钟）。
标准操作流程（石蜡切片）？
完整流程：脱蜡水化（二甲苯 × 2 → 100% 乙醇 × 2 → 95% → 70% → 流水）→ 苏木素染色 5–10 分钟 → 流水冲洗 → 酸性乙醇分化数秒（关键控制核染深度）→ 流水流蓝 5–10 分钟 → 伊红染色 1–3 分钟 → 乙醇梯度脱水（70% → 95% → 100% × 2）→ 二甲苯透明 × 2 → 中性树脂封片。
本试剂盒采用进口原料的优势？
进口原料（如德国 Merck）的关键苏木素与伊红优势：① 染色一致性高（批间变异 <5%）；② 染料纯度更稳定（杂质染色少，背景清晰）；③ 染料颗粒细（沉淀少、过滤简单）；④ 苏木素氧化产物 hematein 更稳定（成熟期适中）。适合临床病理诊断、关键科研图像采集、出版级图片。
H&E 染色的原理？
H&E（Hematoxylin & Eosin）是病理学最经典的染色法。苏木素是碱性染料，在铝离子（mordant）催化下与 DNA 磷酸基团结合，染细胞核呈紫蓝色；苏木素染色后用酸性分化液去除细胞质中过染部分，再用碱性流水流蓝使初始的红色形态转为不溶的蓝色。伊红是酸性染料，与碱性蛋白结合染细胞质和胶原呈粉红色。形成蓝核 + 红浆的对比是组织病理学诊断的金标准。
