【保存条件】
室温避光储存,有效期12个月
【概述】
伊红 (Eosin Y) 是一种酸性染料,在水中解离成带负电荷的阴离子。它可以与细胞蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合。 在病理组织切片中,伊红与苏木素染色液形成的蓝色细胞核形成鲜明对比,共同构成经典的H&E (Hematoxylin and Eosin) 染色。本品使用Sigma原料配制,显色效果更好。
【使用建议】
1. 样品前处理
A. 石蜡切片:
① 二甲苯脱蜡2次,每次5-10分钟。
② 梯度乙醇(无水乙醇→95%乙醇→ 80%乙醇→70%乙醇)各浸泡2-5分钟完成复水。
③ 蒸馏水洗涤 2 分钟。
B. 冰冻切片/细胞爬片:
① 固定液(推荐ES-81004%组织/细胞固定液 )固定10分钟以上。
② 蒸馏水洗涤2次,每次2分钟。
2. 伊红染色步骤
① 染色:将样品浸入伊红染色液中,染色30秒-2分钟。
注:染色时间可根据所需红色深浅调整,通常1分钟即可获得满意结果。
② 洗涤/分化:使用70%乙醇快速洗涤2次,洗去多余染料。
技术要点:伊红在低浓度乙醇中具有分化作用,可使胞浆颜色更有层次感。
3. 脱水、透明与封片
① 脱水:梯度乙醇(70%乙醇→80%乙醇→ 90%乙醇→无水乙醇)各10秒。
② 透明:二甲苯透明2次,每次5分钟。
③ 封片:中性树胶封片,显微镜观察。
【结果判定】
细胞浆/结缔组织:呈粉红色至红色。
红细胞:呈亮橘红色。
细胞核(若已预染苏木素):呈蓝色或紫蓝色。
【注意事项】
1. 重复利用:染液可多次使用。若发现上色变慢或颜色偏暗,请更换新液。
2. 脱水控制:伊红极易溶于水。在染色后的脱水过程中,低浓度乙醇停留时间不宜过长,否则红色会褪去。
3. 整体方案:若需进行H&E染色,可选择EK-5120 苏木素伊红(H&E)染色试剂盒。
4. 兼容性:若用于免疫组化后的复染,请确保前序实验不会影响伊红着色。若进行荧光染色,伊红背景可能干扰结果,建议单独预实验。
5. 安全防护:仅供科研使用。操作时请佩戴实验服与一次性手套。