产品描述
【保存条件】
室温避光储存,有效期24个月
【概述】
台盼蓝(Trypan Blue)是一种经典的细胞活性鉴定染料,主要用于检测细胞膜的完整性。
原理:健康的活细胞具有完整的细胞膜,能够排斥台盼蓝(拒染);而死亡或膜受损的细胞,染色剂可渗透进入胞内,将细胞染成蓝色。
应用:适用于常规细胞培养中的活力检测、巨噬细胞活体染色及死细胞定量计数。
【使用建议】
1. 收集细胞:用胰酶或EDTA消化贴壁细胞,悬浮细胞可直接收集。收集细胞时建议以 200-300 ×g离心3-5分钟,弃上清,使用 PBS(或不含血清的培养基)重悬制备单细胞悬液,并做适当稀释。注意:血清蛋白会被台盼蓝染色产生干扰,测定必须在无血清环境中进行。
2. 台盼蓝染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以1:1比例混匀(此时染色终浓度为0.2%),室温避光染色3-5分钟。
注:染色时间不宜超过10分钟,以免染料产生细胞毒性导致活力计数偏低。
3. 细胞计数:吸取少量染色后的细胞进行镜下计数。
死细胞:着蓝色并膨大,无光泽;
活细胞:不着色,保持正常形态,有光泽。
4. 计算公式:
细胞存活率(%)=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
【注意事项】
1. 沉淀处理:本品长时存放或低温储存可能产生少量颗粒状沉淀。若出现沉淀,请置于 37°C水浴约10分钟以充分溶解,溶解后不影响正常使用。
2. 终浓度调节:台盼蓝使用终浓度在0.04%-0.4%,可选择1:1-1:9与细胞悬液混匀均可
3. 时间控制:染色时间必须严格控制。孵育过久会导致“假阳性”(活细胞也变蓝)。
4. 安全防护:操作时请务必穿着实验服并佩戴一次性手套。本品仅限于实验室科研使用。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ES-8104、细胞染色、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温避光储存
常见问题 (FAQ)
保存条件?
常温避光保存 24 个月;4℃ 储存可延长至 36 个月。避免:阳光直射;长期开盖;高温(>40℃)。
与荧光活死染料(PI / 7-AAD)的对比?
台盼蓝:明视野显微镜或自动计数仪;快速但分辨率低。PI / 7-AAD:流式细胞仪;分辨率高,可与其他通道联检。首选:① 简单计数 → 台盼蓝;② 流式联检 → PI / 7-AAD。
常见失败原因?
① 细胞密度过高(>10⁷/mL,稀释);② 染色时间过长(控制 ≤5 分钟);③ 细胞太小(<5 μm 难分辨);④ 大量碎片(先离心去除)。
自动细胞计数仪兼容?
兼容 Bio-Rad TC20、Thermo Countess、Beckman Vi-CELL、Logos Luna II 等主流仪器。
可以用于哪些下游应用?
细胞计数与存活率、冷冻复苏后细胞质量评估、毒性实验、流式前样品质控、细胞分选前评估、教学经典实验。
典型存活率参考?
正常细胞 ≥95%;胰酶消化后 ≥90%;冷冻复苏 ≥80%。<70% 提示细胞状态差。
染色时间过长会怎样?
关键警告:染色 >5 分钟会使台盼蓝逐渐渗入活细胞造成假阴性。严格控制染色到计数 ≤5 分钟。
使用方法(细胞计数板法)?
① 细胞悬液 50 μL + 本染液 50 μL(1:1);② 轻柔混匀 → 3 分钟内完成计数;③ 取 10 μL 入血球计数板;④ 显微镜下分别计数无色(活)与蓝色(死)细胞。
本浓度(0.4%)的典型用途?
0.4% 是最经典浓度(Hubrecht 1909 标准),细胞计数板法常用;1% 用于快速大量染色(如 PBMC 大批量)。本品已稀释好,1:1 与细胞悬液混匀即可。
台盼蓝 0.4% 染色液的工作原理?
台盼蓝是大分子染料,无法穿过完整活细胞膜,但能进入死细胞或膜损伤细胞与胞浆蛋白结合显蓝色。蓝色 = 死细胞,无色 = 活细胞。是经典快速的细胞存活率检测方法。

