ES-8104 台盼蓝染色液(0.4%)

【保存条件】

室温避光储存，有效期24个月

【概述】

台盼蓝（Trypan Blue）是一种经典的细胞活性鉴定染料，主要用于检测细胞膜的完整性。

原理：健康的活细胞具有完整的细胞膜，能够排斥台盼蓝（拒染）；而死亡或膜受损的细胞，染色剂可渗透进入胞内，将细胞染成蓝色。

应用：适用于常规细胞培养中的活力检测、巨噬细胞活体染色及死细胞定量计数。

【使用建议】

1. 收集细胞：用胰酶或EDTA消化贴壁细胞，悬浮细胞可直接收集。收集细胞时建议以 200-300 ×g离心3-5分钟，弃上清，使用 PBS（或不含血清的培养基）重悬制备单细胞悬液，并做适当稀释。注意：血清蛋白会被台盼蓝染色产生干扰，测定必须在无血清环境中进行。

2. 台盼蓝染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以1:1比例混匀（此时染色终浓度为0.2%），室温避光染色3-5分钟。
注：染色时间不宜超过10分钟，以免染料产生细胞毒性导致活力计数偏低。

3. 细胞计数：吸取少量染色后的细胞进行镜下计数。
死细胞：着蓝色并膨大，无光泽；
活细胞：不着色，保持正常形态，有光泽。

4. 计算公式：

细胞存活率（%）=活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%

【注意事项】

1. 沉淀处理：本品长时存放或低温储存可能产生少量颗粒状沉淀。若出现沉淀，请置于 37°C水浴约10分钟以充分溶解，溶解后不影响正常使用。

2. 终浓度调节：台盼蓝使用终浓度在0.04%-0.4%，可选择1:1-1:9与细胞悬液混匀均可

3. 时间控制：染色时间必须严格控制。孵育过久会导致“假阳性”（活细胞也变蓝）。

4. 安全防护：操作时请务必穿着实验服并佩戴一次性手套。本品仅限于实验室科研使用。