ES-8524 改良Lillie-Mayer苏木素染色液

【保存条件】

室温避光储存，有效期12个月

【概述】

苏木素染色（Hematoxylin Staining）是生物学与病理学中最基础、应用最广泛的组织和细胞染色方法。本品使用Sigma原料配制，显色效果更好。

原理：无色的苏木素经氧化激活为氧化苏木素，并与铝离子（Al³⁺）结合形成带正电荷的蓝色复合物；由于细胞核内的DNA磷酸基团带负电荷，两者通过电荷引力紧密结合，从而使细胞核被特异性地染成清晰的蓝色。

本品Lillie-Mayer 改良版属于渐进式（Progressive）核染色剂。与倒退式染色（需强力分化）不同，它在染色过程中能精准地只使细胞核着色，而几乎不染细胞质。

高对比度：使用进口原料，细胞核染色强劲、干净、轮廓清晰。

操作简便：正常情况下无需酸性酒精分化，背景极低。

稳定性佳：改良配方显著延长了染液的有效使用寿命，减少了沉淀生成。

【使用建议】

1. 样品前处理

A. 石蜡切片：

①　二甲苯脱蜡2次，每次5-10分钟。

②　梯度乙醇（无水乙醇→95%乙醇→ 80%乙醇→70%乙醇）各浸泡2-5分钟完成复水。

③　蒸馏水洗涤 2 分钟。

B. 冰冻切片/细胞爬片：

①　固定液（推荐ES-81004％组织/细胞固定液 ）固定10分钟以上。

②　蒸馏水洗涤2次，每次2分钟。

2. 苏木素染色步骤

①　染色：将处理好的样品浸入苏木素染色液中，染色1-5分钟。注：时间可根据组织厚度及理想颜色深浅自行调整。

②　初洗与返蓝：蒸馏水洗去浮色，随后用自来水冲洗约10分钟。
技术要点：利用自来水弱碱性使核由红紫转深蓝。如需更优结果，可选 ES-8526 Scott's 苏木素返蓝液。

③　分化（选做）：若要求细胞核极度清晰，可使用酸性乙醇分化液(如ES-8123) 2-30秒，随后必须用自来水冲洗10分钟彻底返蓝。

④　复染（可选）：若需进行H&E染色，此处可接ES-8525伊红（Eosin）染色液步骤。

3. 脱水、透明与封片

①　脱水：梯度乙醇（70%乙醇→80%乙醇→ 90%乙醇→无水乙醇）各10秒。

②　透明：二甲苯透明2次，每次5分钟。

③　封片：中性树胶封片，显微镜观察。

【结果判定】

细胞核：呈清晰的蓝色或蓝紫色。

背景/胞质：基本无色（若未进行伊红复染）。

【注意事项】

1. 重复利用：染色液可多次重复使用，当发现颜色明显变淡或出现较多沉淀时，请更换新液。

2. 整体方案：若需进行H&E染色，可选择EK-5120 苏木素伊红（H&E）染色试剂盒。

3. 预实验建议：不同组织对染料的亲和力不同，大规模染色前建议先用1-2个样本摸索最佳染色时间。

4. 返蓝关键：苏木素染色后的返蓝步骤至关重要，若水质偏酸，建议使用专门的返蓝液（ES-8526 Scott's 苏木素返蓝液）。

5. 安全防护：仅供科研使用。操作时请佩戴实验服与一次性手套。