产品描述
【保存条件】
室温避光储存，有效期12个月
【概述】
结晶紫（Crystal Violet）是一种碱性染料，能与细胞核内的DNA及细胞质中的蛋白质结合。 在微生物学中：作为革兰氏染色的初染剂，用于区分革兰氏阳性菌（紫色）与阴性菌（红色）。在细胞生物学中：用于贴壁细胞的染色，是克隆形成实验、Transwell 迁移/侵袭实验中细胞定量的金标准。
【使用方法II-细胞生物学实验】
1. 细胞克隆形成实验 (Colony Formation)
固定：弃培养基，PBS 洗涤2 次。使用固定液（如ES-8100 4％组织/细胞固定液）固定细胞15分钟。
染色：加入适量结晶紫（推荐使用PBS稀释至0.1%），染色10-30分钟。
观察：流水缓慢洗去余液，室温干燥后肉眼计数紫色克隆点。
2. Transwell 迁移/侵袭实验
固定：将Transwell 小室加入固定液（如ES-8100 4％组织/细胞固定液）中固定15分钟。
染色：将小室浸入结晶紫染色液中，常温染色15-20分钟。
处理：擦除小室上层未迁移的细胞，蒸馏水漂洗3次。
定量：镜下计数或使用10%醋酸洗脱染色液，于570nm处测定吸光度。
【使用方法II-细胞革兰氏染色（经典流程）】
1. 涂片与固定：在载玻片上涂布薄层菌液，室温自然干燥（或微火烘干）。 在酒精灯火焰外侧快速通过3-5次进行热固定，待冷却后染色。
2. 初染（Primary Stain）：滴加结晶紫染色液覆盖标本，染色1-2分钟，清水轻缓冲洗。
3. 媒染（Mordant）：滴加 Gram 碘液覆盖标本，室温放置1-2分钟，水洗。
4. 脱色（Decolorization）：关键步骤。滴加脱色液（如95%乙醇），轻轻摇动10-30s，至流下的液体不显紫色为止，立即水洗终止。注意：脱色不足会导致假阳性，脱色过度会导致假阴性。
5. 复染（Counterstain）：滴加沙黄（番红）染色液，染色30-60s，水洗，吸干。
6. 结果判定：革兰氏阳性菌呈蓝色至紫色；革兰氏阴性菌呈红色。
【技术指南：关于洗涤液的选择】
染色前：必须使用PBS。用于洗去培养基或固定液，维持细胞原有形态，防止pH值剧烈变化影响染色效果。
染色后：推荐使用蒸馏水或缓慢流动的自来水。结晶紫极易溶于水，水洗能迅速清除背景余液，且避免了PBS干透后留下盐结晶干扰拍照或吸光度检测。
【注意事项】
1. 菌龄要求：细菌鉴定建议使用对数生长期鲜活细菌。培养时间过长（>24h）可能导致阳性菌呈现阴性染色结果。
2. 浓度建议：本品为0.4%标准液。革兰氏染色建议直接使用；细胞克隆实验为获得更干净的背景，建议用PBS稀释4倍（至 0.1%）使用。
3. 沉淀说明：4°C存放如出现少量沉淀，可于37°C水浴片刻溶解，不影响使用效果。
4. 安全防护：操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。仅供科研使用，严禁用于临床医疗、食品或动物治疗。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ES-8107、细胞染色、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温避光储存
常见问题 (FAQ)
保存条件？
常温避光保存 24 个月；4℃ 36 个月。避免：阳光直射（光氧化）；长期开盖。
操作安全？
结晶紫为弱致突变物：① 戴手套；② 避免吸入粉尘 / 雾；③ 染色后台面用 70% 乙醇清洁。
VisiColor 系列的特点？
① 显色清晰（颜色对比鲜明）；② 稳定性优（不易氧化）；③ 染色均匀（特殊配方）；④ 进口原料（性能优越）。
常见失败排查？
① 染色不均匀：染液未充分覆盖样品；② 背景过深：染色时间过长（缩短）或洗涤不彻底；③ 颜色异常：染液氧化失效（更换批次）。
染色定量方法？
① 图像分析：显微镜拍照后 ImageJ 量化染色面积；② 染料抽提：33% 醋酸或 1% SDS 溶解染料 → OD550 测吸光度。
可以用于哪些下游应用？
细胞克隆形成实验、划痕实验定量、革兰氏染色、细菌涂片染色、细胞贴附测定、细胞毒性 / 增殖检测（间接）。
革兰氏染色第一步？
革兰氏染色完整流程：① 结晶紫（本品）染色 1 分钟（所有细菌染紫）；② 革兰氏碘液固色 1 分钟；③ 95% 乙醇脱色（区分阳性 / 阴性，G+ 保留紫色，G- 脱色）；④ 番红 / 沙黄复染 1 分钟（G- 染粉红）。
细胞贴附实验流程？
① 弃培养基 → PBS 洗 1 次；② 4% PFA 固定 15 分钟；③ 弃 PFA → 加结晶紫染液 10–15 分钟；④ 流水洗去多余染料；⑤ 风干后显微镜观察或 33% 醋酸抽提染料 OD550 定量。
本浓度（0.4%）的典型用途？
0.4% 是常用浓度。0.5%：经典细胞贴附实验、平板克隆形成。1%：革兰氏染色、强染色应用。0.1%：温和复染、细菌涂片。
结晶紫 0.4% 染色液的原理？
结晶紫（gentian violet）是阳离子染料，染细胞核与革兰氏阳性菌细胞壁。应用：① 革兰氏染色第一步（染色所有细菌）；② 细胞贴附 / 划痕实验定量（活细胞贴附后染色，洗去未贴附细胞）；③ 细胞凋亡 / 增殖检测（间接染存活细胞）。
