产品描述
【保存条件】
室温保存，有效期12个月
【概述】
ACK 红细胞裂解液（Ammonium-Chloride-Potassium）主要用于从人或动物的抗凝全血、骨髓、脾脏及其他组织单细胞悬液中去除红细胞。本品为无菌溶液。
原理：利用红细胞与有核细胞（如淋巴细胞、颗粒细胞等）对渗透压耐受性的差异。氯化铵能使无核红细胞发生选择性渗透压裂解，而对有核白细胞几乎无损伤。
应用：适用于流式细胞术、原代细胞培养、细胞融合、核酸或蛋白提取等后续实验。
【使用建议（仅供参考）】
工作液 (1×) 的配制：使用前，请将10×母液用无菌去离子水（或超纯水）按1:9的比例稀释。示例：取10mL的10×红细胞裂解溶液，加入90mL无菌去离子水，混匀即得1×工作液。
方案A：抗凝全血/骨髓样本处理
1. 比例混合：向1倍体积的新鲜抗凝全血中加入3倍体积的1×工作液（如1mL血加入3mL裂解液）。轻轻颠倒混匀。
2. 冰上孵育：置于冰上静置8-15分钟。期间建议轻轻颠倒混匀2–3次。注：当混合液由浑浊红色变为清亮、半透明红色时，表示红细胞已充分裂解。
3. 离心收集：4℃，450×g离心10分钟。
4. 弃液：小心吸除上清液（含血红蛋白及碎片），保留白色或浅红色的白细胞沉淀。
5. 二次洗涤（可选）：若红细胞残留较多，可向沉淀中再次加入2倍体积的1×工作液重复以上步骤。
6. 重悬：使用PBS或细胞培养基重悬，进行后续实验。
方案B：组织样本（如脾脏、淋巴结）处理
1. 制备悬液： 组织经机械研磨或酶（胰酶/胶原酶）消化分散成单细胞悬液。
2. 离心弃液：500×g离心5分钟，弃去上清。
3. 裂解：加入2–5倍细胞沉淀体积的1×工作液，轻弹管底重悬，冰上孵育2–5分钟。
4. 洗涤：加入5倍体积的PBS终止裂解，离心收集细胞。
【注意事项】
1. 温度敏感性：裂解过程建议在冰上进行，以最大限度减少裂解液对有核细胞（尤其是淋巴细胞）活性的影响。
2. 时间控制：孵育时间不宜超过15分钟。长时间暴露在氯化铵环境下会导致白细胞活性下降及非特异性死亡。
3. RNA提取提醒：若后续用于总RNA提取，建议在最后一次离心后立即加入RNAex ZOL(EK-5301)等裂解液，或确保全程使用DEPC水配制的缓冲液。
4. 血样要求：必须使用抗凝血（EDTA或枸橼酸钠）。凝固的血块会导致白细胞被包裹在内，极大降低回收率。
5. 安全防护：仅限科研使用。操作人类血样时请严格遵守生物安全规范。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ES-8232、红细胞裂解、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题 (FAQ)
废液 + 安全防护 + 包装？
废液处理：① 裂解后含血红蛋白废液属感染性废液——84 消毒液（0.5%）30 min 浸泡；② 高压灭菌（121℃, 20 min）；③ 不可直接倒下水道。针头/枪头：放生物安全锐器盒。安全防护：操作人类血样时请严格遵守生物安全规范——① N95 口罩 + 双层手套 + 护目镜 + 实验服；② 离心管放二级容器；③ 针刺职业暴露：立即按 HIV/HBV/HCV 暴露程序处理。包装：100 mL / 500 mL（10× 浓缩，相当于 1L / 5L 工作液）。仅供科研使用。
与同系列产品的应用搭配？
搭配场景：① 大批量血液临床样本 → 本品 10× ACK 配 ES-8231 1× 应急；② 小白鼠脾脏 + 全血同时处理 → 本品稀释一次满足；③ MACS/FACS 联合方案——本品裂解 + CD45/CD3 磁珠分选；④ 基因组 DNA：白细胞沉淀直接进血液 DNA 提取试剂盒；⑤ scRNA-seq：低裂解时间（<5 min）+ 立即细胞计数 + 上 10× 平台。注意：scRNA-seq 建议密度梯度或ES-8233/8234（更温和）——ACK 裂解可能损伤敏感免疫细胞。
典型问题排查？
Q：稀释后浑浊？ A：① 自来水矿物质 → 改超纯水；② 温度过低 → 25℃ 室温溶解；③ 浓度过高 → 检查稀释比例；④ 浓缩液受污染 → 弃。Q：裂解不彻底？ A：① 1× 工作液配错（误用浓缩液）→ 重配；② 血液量过大 → 加比例至 1:5；③ 时间不够 → 12–15 min。Q：白细胞流失？ A：① 离心力低（应 ≥450×g）；② 裂解过度 (>15 min) → 严控时间；③ 弃上清吸到沉淀 → 留 50 µL 缓冲底液。Q：RNA 降解？ A：用 DEPC 水稀释 + 保持冰浴 + 立即加 Trizol。
作用机制 + 流式应用？
渗透压裂解机制：NH₄Cl 进入红细胞后被碳酸酐酶催化为 NH₃ + H⁺，NH₃ 扩散出膜留下 H⁺ 破坏渗透平衡，红细胞胀裂；白细胞碳酸酐酶含量低 + 渗透调节强，故耐受。流式应用细节：① PBMC 流式：裂解后 PBS 洗 2 次去残留 NH₄Cl；② CD45 设门——白细胞一致表达；③ FSC/SSC 排碎片；④ 死细胞染色（7-AAD/PI）必加——长时间裂解可能影响活性；⑤ 稀有事件分析（CTC/HSC）建议结合密度梯度。
稀释用水的选择 + 工作液稳定性？
稀释用水规范：无菌去离子水（或超纯水）——避免自来水/RO 水残留矿物质影响渗透压。RNA 应用专用：建议用ES-8087 DEPC 水或无菌焦碳酸二乙酯水配制。工作液（1×）稳定性：① 现稀现用——大批量样本可一次稀释；② 4℃ 避光保存可稳定 1–2 周；③ 工作液不要冻存——浓缩液可冻存但工作液不行（NH₄Cl 析出影响均一性）。配制提示：浓缩液稀释会轻微吸热——大量稀释可能短暂浑浊，混匀后澄清即正常。
注意事项与保存？
温度敏感性：裂解过程建议在冰上进行，以最大限度减少裂解液对有核细胞（尤其是淋巴细胞）活性的影响。时间控制：孵育时间不宜超过 15 分钟。血样要求：必须使用抗凝血（EDTA 或枸橼酸钠）。凝固的血块会导致白细胞被包裹在内，极大降低回收率。RNA 提取提醒：若后续用于总 RNA 提取，建议在最后一次离心后立即加入 RNAex ZOL（EK-5301）等裂解液，或确保全程使用 DEPC 水配制的缓冲液。 保存：室温保存，有效期 12 个月。
组织样本处理流程？
方案 B：制备悬液：组织经机械研磨或酶（胰酶/胶原酶）消化分散成单细胞悬液。离心弃液：500×g 离心 5 分钟。裂解：加入 2–5 倍细胞沉淀体积的 1× 工作液，轻弹管底重悬，冰上孵育 2–5 分钟。洗涤：加入 5 倍体积的 PBS 终止裂解，离心收集细胞。 关键差异：组织样本仅 2–5 min（远少于全血 8–15 min），因细胞稀薄暴露面积大，过长易损伤白细胞。
工作液配制与全血处理流程？
工作液（1×）的配制：使用前，请将 10× 母液用无菌去离子水（或超纯水）按 1:9 的比例稀释。示例：取 10 mL 的 10× 红细胞裂解溶液，加入 90 mL 无菌去离子水，混匀即得 1× 工作液。 全血处理（方案 A）：① 比例混合：1 体积新鲜抗凝全血 + 3 体积 1× 工作液（如 1 mL 血加 3 mL 裂解液），轻轻颠倒混匀；② 冰上 8–15 min，期间颠倒混匀 2–3 次——当混合液由浑浊红色变清亮半透明红色即裂解完全；③ 4℃，450×g 离心 10 min；④ 弃上清，保留白色或浅红色白细胞沉淀；⑤ 二次洗涤（可选）：2 体积 1× 工作液重复；⑥ PBS/培养基重悬。
本品（10×浓缩）与 1× 即用版的区别？
① 流式细胞核心实验室、临床样本批量处理 → 本品（浓缩节省运输/储存空间）；② 临时单次使用 → ES-8231 1× 版。
本产品的核心特点？
ACK 红细胞裂解液（Ammonium-Chloride-Potassium）主要用于从人或动物的抗凝全血、骨髓、脾脏及其他组织单细胞悬液中去除红细胞。本品为无菌溶液。原理：利用红细胞与有核细胞（如淋巴细胞、颗粒细胞等）对渗透压耐受性的差异。氯化铵能使无核红细胞发生选择性渗透压裂解，而对有核白细胞几乎无损伤。应用：适用于流式细胞术、原代细胞培养、细胞融合、核酸或蛋白提取等后续实验。
