ES-8425 Polybrene 溶液(10mg/mL)

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【保存条件】

4℃保存,有效期12个月;-20℃保存,有效期24个月


【概述】

Polybrene(聚凝胺),化学名为海美溴铵(Hexadimethrine Bromide),是一种带正电荷的聚阳离子聚合物。本产品为超纯水配制并经0.22μm滤膜过滤除菌处理,可直接使用。

助感染原理:病毒颗粒与哺乳动物细胞表面通常均带有负电荷,存在静电排斥。Polybrene 通过中和电荷,显著增强慢病毒 (Lentivirus)、逆转录病毒等对细胞的吸附与感染效率。

多用途:除了增强病毒感染,也可用于提高脂质体转染效率或介导DNA直接转染。


使用建议-病毒助感染

1. 浓度摸索
Polybrene 对某些细胞(如原代神经元、造血干细胞)具有一定的细胞毒性。
常规用量:多数常用细胞系推荐使用6-8μg/mL。
计算示例:若要在1mL培养基中达到8μg/mL的终浓度,需加入本品0.8μL。

2. 标准操作流程
第一天(细胞铺板):接种细胞,确保次日感染时细胞密度约为50%。37℃培养过夜。
第二天(病毒感染):融化病毒,根据预实验的MOI值(感染复数)用新鲜完全培养基稀释病毒。加入适量Polybrene至推荐终浓度(如以8μg/mL终浓度计6孔板每孔2mL体系里加1.6μL即可)。吸除旧液,加入“病毒+培养基+Polybrene”混合液,37℃继续培养。
第三天(观察与维持):感染后12-24小时观察细胞状态。若细胞毒性明显,可提前更换为新鲜培养基。
第四天(药物筛选):弃去含病毒培养基,更换为含相应抗生素(如 Puromycin)的筛选培养基。筛选结束后收集细胞进行Western Blot、qPCR或流式检测。


【注意事项】

1. 混合顺序:先将病毒与培养基混匀后加入Polybrene,避免局部浓度过高导致病毒灭活。

2. 安全防护:仅供科研使用。操作时请佩戴实验服与一次性手套。

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