产品描述
【保存条件】
4℃保存，有效期12个月
【用途】
本产品专为从细胞培养上清中快速富集慢病毒粒子而设计。通过改变溶剂环境使病毒粒子发生沉淀，可实现10-100倍的滴度提升，适用于后续的细胞转导或体内注射实验。
突破硬件限制（无需超速离心）：本品仅需使用普通的低速冷冻离心机（1,600×g）即可完成浓缩，绝大多数实验室都能直接上手。
极高的浓缩效率：能够将慢病毒滴度提高10-100倍。相比于超速离心可能造成的病毒包膜机械损伤，这种化学沉淀法对病毒颗粒的捕捉更全面，回收率通常稳定在80%以上。
操作极简（“傻瓜式”流程）：单组分现成液，无需复杂的配制，直接按 3:1 比例混合。 离心后形成的米白色或半透明沉淀非常直观，方便实验人员判断操作是否成功，极大地降低了实验的“黑盒”风险。
优秀的生物兼容性：浓缩液组分经过优化，重悬后的病毒可直接用于感染原代细胞、干细胞甚至进行体内动物注射，不会引入影响细胞状态的有害化学物质。配合ES-7008 LentiV-X慢病毒保存液使用时，能有效保护病毒包膜在反复冻融过程中的完整性。
【使用方法】
1. 样本收集与澄清
① 收集：将含有病毒的细胞培养上清（如10cm皿）收集至无菌离心管中。
② 去杂：低速离心（如500-1000×g离心5分钟）弃去细胞沉淀，确保上清中无漂浮细胞。
③ 转移：将澄清的上清液小心转移至新的无菌离心管（如50mL离心管）中。
2. 混合与孵育
① 加样：按3:1的体积比加入已LentiV-X 浓缩液（注：浓缩液使用前需用无菌0.45µm滤膜过滤除菌）。
示例：30mL细胞上清加入10mL浓缩液。
② 混匀（关键）：剧烈震荡（Vortex）或颠倒混匀60秒。注：浓缩液较为粘稠，务必确保液体完全均一，无分层。
③ 孵育：4°C环境下，以60rpm恒速水平摇动孵育至少4小时（4°C过夜孵育效果更佳）。
3. 离心与重悬
④ 沉淀：4°C环境下，以1,600×g离心45-60分钟。
⑤ 收液：小心弃去上清液。注：沉淀通常呈米白色或半透明膜状。沉淀量受血清蛋白影响，沉淀大小不直接代表病毒滴度。若沉淀不明显，可预留少量液体后再重悬。
⑥ 重悬：使用原体积1/10–1/100的无血清、无双抗培养基，或推荐ES-7008 LentiV-X慢病毒保存液重悬沉淀，可显著提高病毒长期储存的稳定性。
⑦ 储存：轻轻吹打混匀，分装后立即置于-80°C保存备用。浓缩后的病毒配合ECOTOP的 Polybrene(ES-8425)感染细胞使用，效果立竿见影。
【注意事项】
1. 除菌：本品经0.45µm过滤除杂质处理，但非无菌产品。使用前请务必使用无菌0.45µm滤膜进行过滤除菌。使用0.45µm而非0.22µm滤膜。因为0.22µm滤膜孔径过小，容易因浓缩液粘稠而导致严重损耗或滤膜爆裂。
2. 沉淀析出：低温长时间保存可能会有晶体析出，若有使用前请将试剂瓶置于37℃水浴中温育10-20分钟，期间轻轻摇晃以促进溶解。
3. 病毒滴度损失：慢病毒极易受到剪切力和温度影响，重悬时请务必轻轻吹打，避免产生气泡。
4. 安全防护：处理慢病毒样本请务必佩戴防护用具并于生物安全柜内操作。
产品规格
- 货期
- 现货·
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ES-7011、慢病毒研究、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
轻轻吹打混匀，分装后立即置于-80°C保存备用
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
4℃ 保存，有效期 12 个月。提取的浓缩病毒：用 ES-7008 重悬后立即 -80℃ 分装保存——慢病毒极易受剪切力和温度影响，重悬时务必轻轻吹打，避免产生气泡。
低浓缩效率排查？
排查：① 温度未到位（必须 4℃，温度高沉淀效率下降）；② 混匀不充分（粘稠液必须涡旋 60 s 至均一）；③ 离心力不足（1,600×g 是底线，建议用预冷转子）；④ 孵育时间不够（4 h 起步，过夜效果最好）；⑤ 上清未澄清（含细胞碎片堵塞沉淀过程，需先 500–1,000×g 离心）；⑥ 病毒原液已部分失活（收毒后立即浓缩，避免 4℃ >24 h 放置）；⑦ 重悬剧烈震荡（破坏包膜导致滴度损失）。
可用于哪些应用场景？
适用：① CAR-T 细胞制备前的慢病毒大规模浓缩；② 基因治疗研究的载体浓缩；③ shRNA / sgRNA 文库慢病毒库；④ 稳定细胞系建立（高 MOI 一次感染）；⑤ 小动物 in vivo 注射（需 10⁹+ TU/mL 高滴度）；⑥ 原代细胞与干细胞感染（生物兼容性好）。特别提示：重悬后的病毒可直接用于感染原代细胞、干细胞甚至进行体内动物注射。
为什么离心后沉淀不明显？
提示：沉淀大小不直接代表病毒滴度。若沉淀不明显，可预留少量液体后再重悬。——慢病毒的沉淀肉眼不易看到（与外泌体类似），但实际病毒已沉积在管壁。正确操作：① 弃上清时留 10–20 µL 残液；② 标记管子方向（用固定角转子时沉淀沿管壁外侧）；③ 用本品提供体积的 1/10–1/100 重悬液彻底吹打 20–30 次。
粘稠沉淀剂的处理？
注意：沉淀析出：低温长时间保存可能会有晶体析出，若有使用前请将试剂瓶置于 37℃ 水浴中温育 10–20 min，期间轻轻摇晃以促进溶解。混匀（关键）：剧烈震荡（Vortex）或颠倒混匀 60 s。浓缩液较为粘稠，务必确保液体完全均一，无分层。
与 ES-7008 慢病毒保存液的协同？
完整慢病毒生产-浓缩-保存链路：① 用 EK-5403 VirPack 包装慢病毒；② 收集 48–72 h 上清；③ 用本品 ES-7011（4×）按 3:1 沉淀；④ 用 ES-7008 LentiV-X 慢病毒保存液重悬——能显著保护病毒包膜在反复冻融过程中的完整性；⑤ 分装 -80℃ 保存；⑥ 感染时配合 ES-8425 Polybrene 增强效率。配合 ECOTOP 的 Polybrene（ES-8425）感染细胞使用，效果立竿见影。
为什么用 0.45 µm 而非 0.22 µm 过滤？
除菌：本品经 0.45 µm 过滤除杂质处理，但非无菌产品。使用前请务必使用无菌 0.45 µm 滤膜进行过滤除菌。使用 0.45 µm 而非 0.22 µm 滤膜——因为 0.22 µm 滤膜孔径过小，容易因浓缩液粘稠而导致严重损耗或滤膜爆裂。——本品有粘稠特性，0.22 µm 过细会导致滤膜堵塞或爆破。
完整流程参数？
① 样本收集与澄清：收集含病毒的细胞培养上清（如 10 cm 皿），500–1,000×g 离心 5 min 弃细胞沉淀，转移澄清上清至无菌离心管；② 混合与孵育：按 3:1 体积比加入 LentiV-X 浓缩液（注：浓缩液使用前需用无菌 0.45 µm 滤膜过滤除菌）。示例：30 mL 上清 + 10 mL 浓缩液；剧烈震荡（涡旋）或颠倒混匀 60 s——浓缩液较为粘稠，务必确保液体完全均一无分层；4℃ 60 rpm 恒速水平摇动孵育至少 4 h（4℃ 过夜孵育效果更佳）；③ 离心与重悬：4℃ 1,600×g 离心 45–60 min——小心弃上清（沉淀通常呈米白色或半透明膜状；若沉淀不明显，可预留少量液体后再重悬）；用原体积 1/10–1/100 的无血清无双抗培养基或推荐的 ES-7008 LentiV-X 慢病毒保存液重悬沉淀；④ 轻轻吹打混匀，分装后立即 -80℃ 保存。
与 EK-5410 UniVir 通用浓缩盒的区别？
ES-7011（本品）：慢病毒专属——配方对慢病毒包膜特异优化，4× 浓缩液 + 1,600×g 离心；EK-5410 UniVir：通用 5 种病毒（慢病毒/逆转录/AAV/腺病毒/杆状病毒）——4× 沉淀剂 + 3,500×g 离心，带配套保存液和重悬液。选择：① 专做慢病毒 → ES-7011（本品，更经济）；② 多种病毒并行 → EK-5410（通用一站式）。
本产品的核心特点？
本产品专为从细胞培养上清中快速富集慢病毒粒子而设计。通过改变溶剂环境使病毒粒子发生沉淀，可实现 10–100 倍的滴度提升，适用于后续的细胞转导或体内注射实验。突破硬件限制（无需超速离心）：本品仅需使用普通的低速冷冻离心机（1,600×g）即可完成浓缩。极高的浓缩效率：能够将慢病毒滴度提高 10–100 倍。回收率通常稳定在 80% 以上。操作极简：单组分现成液，直接按 3:1 比例混合。优秀的生物兼容性：浓缩液组分经过优化，重悬后的病毒可直接用于感染原代细胞、干细胞甚至进行体内动物注射。
