ES-7011 LentiV-X慢病毒浓缩液（4×）

【保存条件】

4℃保存，有效期12个月

【用途】

本产品专为从细胞培养上清中快速富集慢病毒粒子而设计。通过改变溶剂环境使病毒粒子发生沉淀，可实现10-100倍的滴度提升，适用于后续的细胞转导或体内注射实验。

突破硬件限制（无需超速离心）：本品仅需使用普通的低速冷冻离心机（1,600×g）即可完成浓缩，绝大多数实验室都能直接上手。

极高的浓缩效率：能够将慢病毒滴度提高10-100倍。相比于超速离心可能造成的病毒包膜机械损伤，这种化学沉淀法对病毒颗粒的捕捉更全面，回收率通常稳定在80%以上。

操作极简（“傻瓜式”流程）：单组分现成液，无需复杂的配制，直接按 3:1 比例混合。 离心后形成的米白色或半透明沉淀非常直观，方便实验人员判断操作是否成功，极大地降低了实验的“黑盒”风险。

优秀的生物兼容性：浓缩液组分经过优化，重悬后的病毒可直接用于感染原代细胞、干细胞甚至进行体内动物注射，不会引入影响细胞状态的有害化学物质。配合ES-7008 LentiV-X慢病毒保存液使用时，能有效保护病毒包膜在反复冻融过程中的完整性。

【使用方法】

1. 样本收集与澄清

①　收集：将含有病毒的细胞培养上清（如10cm皿）收集至无菌离心管中。

②　去杂：低速离心（如500-1000×g离心5分钟）弃去细胞沉淀，确保上清中无漂浮细胞。

③　转移：将澄清的上清液小心转移至新的无菌离心管（如50mL离心管）中。

2. 混合与孵育

①　加样：按3:1的体积比加入已LentiV-X 浓缩液（注：浓缩液使用前需用无菌0.45µm滤膜过滤除菌）。
示例：30mL细胞上清加入10mL浓缩液。

②　混匀（关键）：剧烈震荡（Vortex）或颠倒混匀60秒。注：浓缩液较为粘稠，务必确保液体完全均一，无分层。

③　孵育：4°C环境下，以60rpm恒速水平摇动孵育至少4小时（4°C过夜孵育效果更佳）。

3. 离心与重悬

④　沉淀：4°C环境下，以1,600×g离心45-60分钟。

⑤　收液：小心弃去上清液。注：沉淀通常呈米白色或半透明膜状。沉淀量受血清蛋白影响，沉淀大小不直接代表病毒滴度。若沉淀不明显，可预留少量液体后再重悬。

⑥　重悬：使用原体积1/10–1/100的无血清、无双抗培养基，或推荐ES-7008 LentiV-X慢病毒保存液重悬沉淀，可显著提高病毒长期储存的稳定性。

⑦　储存：轻轻吹打混匀，分装后立即置于-80°C保存备用。浓缩后的病毒配合ECOTOP的 Polybrene(ES-8425)感染细胞使用，效果立竿见影。

【注意事项】

1. 除菌：本品经0.45µm过滤除杂质处理，但非无菌产品。使用前请务必使用无菌0.45µm滤膜进行过滤除菌。使用0.45µm而非0.22µm滤膜。因为0.22µm滤膜孔径过小，容易因浓缩液粘稠而导致严重损耗或滤膜爆裂。

2. 沉淀析出：低温长时间保存可能会有晶体析出，若有使用前请将试剂瓶置于37℃水浴中温育10-20分钟，期间轻轻摇晃以促进溶解。

3. 病毒滴度损失：慢病毒极易受到剪切力和温度影响，重悬时请务必轻轻吹打，避免产生气泡。

4. 安全防护：处理慢病毒样本请务必佩戴防护用具并于生物安全柜内操作。