【保存条件】
4℃避光保存,有效期24个月
【概述】
SafeView是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型花青类核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,可与核酸结合后能产生很强的荧光信号。
【操作方法】
方法一:预制胶染色法(胶染,推荐使用):此方法最简便,染料用量省,背景干净。
1. 配胶:根据需要配制琼脂糖凝胶液(如1%-3%)。
2. 加样:待琼脂糖完全熔化并冷却至50-60℃时(手感不烫手但未凝固),按1:10,000比例加入SafeView。示例:每100mL胶液中加入10µl SafeView。
3. 倒胶:轻轻摇匀,避免产生气泡,倒入模具中待其凝固。
4. 电泳与观察:正常电泳。结束后使用500nm蓝光透射仪或常规紫外凝胶成像系统观察。
方法二:后染色法(泡染):适用于不希望染料影响DNA迁移速率的精细实验。
1. 制备工作液:在 100mL去离子水中加入10µl SafeView,配制成染色工作液。
2. 浸泡染色:将电泳完毕的凝胶放入容器,倒入工作液确保淹没凝胶。
3. 摇晃孵育:浸泡或在水平摇床上缓慢摇动染色5-10分钟。
注:胶块越厚,所需时间越长。
4. 观察:染色完成后,直接在紫外灯或蓝光仪下观察条带。
【注意事项】
1. 避光操作:SafeView具有光敏性,储存及操作过程中应尽量避光,以维持荧光强度。
2. 温度控制:加入染料时胶液温度不宜过高(建议<60℃),否则可能导致染料降解影响灵敏度。
3. 安全防护:尽管SafeView毒性远低于 EB,但仍需佩戴手套和实验服。