【保存条件】
室温保存,有效期12个月
【概述】
本产品是一种经过精密配置的变性洗脱缓冲液,主要由8M Urea,100mM NaH2PO4及100mM Tris-HCl构成。尿素能够通过破坏蛋白质分子内部及分子间的非共价键,如氢键和疏水作用,使蛋白质发生去折叠,从而暴露出被包埋的标签位点,实现对重组蛋白的高效洗脱。该试剂pH值精确调节至4.5,能够有效抑制金属离子亲和层析纯化过程中的非特异性结合,广泛应用于变性条件下的亲和色谱纯化及下游免疫印迹分析。
【使用方法】
1. 预先确认色谱柱已完成洗涤步骤,移除柱内残余的杂蛋白或非特异性结合物。
2. 将本缓冲液缓慢加入层析柱中,通过重力流或蠕动泵调节流速,确保液体均匀流经填料床。
3. 收集流出的洗脱组分,利用紫外分光光度计在280nm波长下监测蛋白质浓度,并根据洗脱峰收集目标蛋白样品。
4. 完成洗脱后,若需进行后续复性或透析操作,请尽快将洗脱液置于低温环境下,以防止高浓度尿素在高温下产生氰酸盐对蛋白造成化学修饰。
【注意事项】
1. 操作过程中务必佩戴防护手套、护目镜及实验服,该缓冲液具有较强的刺激性,若不慎接触皮肤或眼睛,请立即用大量清水冲洗并就医。
2. 本产品仅供实验室研究使用,不得用于人体临床诊断或治疗。