【保存条件】
室温保存,有效期12个月
【概述】
本产品是一款高浓度的变性清洗缓冲液,主要成分包含8M Urea,100mM NaH2PO4及100mM Tris-HCl,pH值调节至6.3。该配方专为生物化学与分子生物学实验设计,特别适用于亲和层析过程中重组蛋白的洗涤步骤。通过8M尿素提供的强力变性环境,该缓冲液能有效破坏非共价键相互作用,消除非特异性结合的杂质蛋白,确保目的蛋白的高纯度回收。
【使用方法】
1. 使用前检查瓶内是否有尿素结晶析出,如存在结晶,请在室温或不超过30℃的温水中轻微加热并充分混匀,确保溶液处于完全溶解状态。
2. 将待洗涤的亲和层析柱或含有结合目标蛋白的磁珠置于平衡状态,加入适量体积的变性清洗缓冲液,使树脂与缓冲液充分接触,建议洗涤体积为柱床体积的5-10倍。
3. 在重力流或离心洗涤过程中,保持流速均匀,确保缓冲液与填料充分交换;洗涤完成后,根据下游实验需求,可使用洗脱缓冲液进行蛋白洗脱,或使用平衡缓冲液梯度置换尿素以实现蛋白的复性。
【注意事项】
1. 本品含有高浓度尿素,操作过程中请务必佩戴一次性丁腈手套及实验服,避免直接接触皮肤或溅入眼睛,若不慎接触,请立即用大量流动清水冲洗至少15分钟。
2. 建议将本品储存于室温的避光环境下,开启后请确保瓶盖拧紧以防止空气中水分引起浓度波动或杂菌污染。
3. 由于尿素在特定温度下易分解产生氨气,且高浓度环境下对部分塑料耗材具有微弱侵蚀性,请使用化学兼容性良好的聚丙烯容器存储。