产品描述
【保存条件】
室温保存，有效期12个月
【概述】
1% SDS Hot Lysis Buffer 专为高效提取全细胞蛋白而设计。
作用原理：通过 95°C高温与1% SDS 的协同作用，迅速破坏细胞膜及核膜，使蛋白质一级结构完全展开。
产品优势：
1. 提取彻底：特别适用于常规裂解液（如RIPA）难以提取的胞核蛋白、膜蛋白及不溶性支架蛋白。
2. 背景干扰低：减少了蛋白降解产生的杂带，提高 WB 实验的条带清晰度。
【使用方法】
I. 准备工作
1. 配制工作液：根据用量，按1:100比例在裂解液中加入蛋白酶抑制剂（推荐ES-8135 蛋白酶抑制剂混合物Cocktail(通用型, 100×)）混匀备用（现用现配）。
例如：1 mL裂解液+10 μL抑制剂，现用现配。
2. 预热：将配好的裂解液置于水浴锅或干浴器中加热至90–95°C。
II. 细胞/组织提取流程
1. 样本预处理：
a. 细胞样本：使用细胞刮刀将细胞刮下（避免使用胰酶，以免降解蛋白），离心（300-500 g，5 min）收集沉淀，PBS 再洗涤两次。
b. 组织样本：取新鲜或冻存组织，切成极微小的碎片。推荐在液氮中研磨成粉末，或使用匀浆器预破碎。
2. 热裂解：立即向样本中加入预热至95°C的含抑制剂的裂解液（每106细胞或每20 mg组织约加入150–250 μL），立即剧烈震荡。
3. 变性：置于90–95°C加热10-20分钟。期间每隔3分钟涡旋震荡一次。
4. 超声（关键）：此时溶液可能会因基因组DNA释放而变得极度黏稠。需进行超声剪切（40 kW，持续3s/间隔3s，循环25–30次），直至液体变为澄清透明。
5. 离心：室温下最大转速（≥ 12,000 g）离心5–10分钟。
6. 收集蛋白：小心吸取上清液（蛋白质）至新离心管，弃去沉淀（沉淀物主要为未裂解完全的结缔组织或大分子杂质）。
7. 蛋白浓度检测：上清蛋白质可用EK-5001 BCA定量方法或EK-5004 Bradford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型)检测蛋白浓度。
【注意事项】
1. 溶解结晶：若试剂盒内存有析出（低温下易析出），必须加热至完全溶解后再取用，否则会导致SDS浓度不足影响裂解效率。
2. 黏稠度排查：若离心后上清仍呈胶冻状，说明DNA剪切不充分，请适当延长超声时间。
3. 安全防护：裂解液具腐蚀性且操作涉及高温，请务必佩戴实验手套、实验服及防护眼镜。仅限实验室科研使用，严禁用于临床医疗、诊断或食品药品添加。
产品规格
- 货期
- 1-2天
- 规格
- 100ml
应用领域
本产品适用于ED-8781、其它缓冲液、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题
该产品如何保存？
请参照产品说明书中的保存条件。一般生物科研试剂建议在2-8℃或-20℃条件下保存，避免反复冻融。具体保存条件请以产品标签为准。
该产品的货期是多久？
ECOTOP SCIENTIFIC常规库存产品一般1-3个工作日内发货。如遇缺货情况，客服会及时与您沟通预计到货时间。
如何获取产品的技术支持？
您可以通过电话（15622108587）或在线客服联系我们的技术支持团队。我们提供产品使用指导、实验方案优化等专业技术服务。
