ED-8773 G418溶液(50mg/mL,无菌)

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ED-8773 G418溶液(50mg/mL,无菌)
货号 (Catalog Number): ED-8773

产品描述

【保存条件】

4℃避光保存,有效期24个月


【概述】

G418硫酸盐 (G418 Sulfate),又称 Geneticin (遗传霉素),是一种氨基糖苷类抗生素,结构类似于庆大霉素B1。

作用机制:G418通过结合真核细胞核糖体的80S亚基,干扰蛋白质合成中的易位步骤,从而导致非抗性细胞死亡。

筛选原理:转染了neo基因(氨基糖苷磷酸转移酶)的细胞可将G418磷酸化使其失活,从而在含有G418 的培养基中正常生长。

应用场景:适用于哺乳动物细胞、植物、酵母及原核细胞的稳定株筛选与维持。


【使用方法】

1. 建立杀灭曲线:由于不同细胞系对G418的敏感性差异巨大,首次实验务必进行梯度测试。
操作:将未转染的亲本细胞以较低密度接种,加入不同浓度的G418(如0, 100, 200, 400, 600, 800, 1000 μg/mL)。
终点判断:以 5–7 天内导致 100% 细胞死亡的最低浓度作为最佳筛选浓度。

2. 常用浓度筛选参考(具体细胞筛选浓度需根据方法步骤1杀灭曲线实验得到):

细胞类型

筛选浓度(参考)

维持浓度(参考)

哺乳动物细胞

200–1000 μg/mL

200–1000 μg/mL

植物细胞

200–1000 μg/mL

200–1000 μg/mL

酵母细胞

200–1000 μg/mL

200–1000 μg/mL


【注意事项】

1. 抗生素联用:尽量避免将G418与其他氨基糖苷类抗生素(如庆大霉素、卡那霉素)联用,以免产生交叉抗性或协同毒性。(注:青霉素/链霉素通常不直接抑制G418药效,但高浓度抗生素累加会增加细胞代谢压力)。

2. 细胞密度影响:细胞密度过高会显著降低G418的杀伤效率。建议在筛选开始时,细胞汇合度控制在20%–30%。

3. 药效延迟性:G418 作用于蛋白质合成阶段,细胞通常会继续分裂2–3次才表现出明显的死亡。抗性克隆通常在接种10–14天后形成。反复冻融易导致抗生素失效,如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。

4. 安全防护:为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。仅限实验室科研使用,严禁农业/家庭/临床用途使用。

产品规格

货期
现货
规格
1ml、1ml×5管

应用领域

本产品适用于ED-8773、其它缓冲液、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。

存储条件

4℃避光保存

品牌: ECOTOP SCIENTIFIC

常见问题

该产品如何保存?

请参照产品说明书中的保存条件。一般生物科研试剂建议在2-8℃或-20℃条件下保存,避免反复冻融。具体保存条件请以产品标签为准。

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您可以通过电话(15622108587)或在线客服联系我们的技术支持团队。我们提供产品使用指导、实验方案优化等专业技术服务。

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4℃避光保存,有效期24个月


【概述】

G418硫酸盐 (G418 Sulfate),又称 Geneticin (遗传霉素),是一种氨基糖苷类抗生素,结构类似于庆大霉素B1。

作用机制:G418通过结合真核细胞核糖体的80S亚基,干扰蛋白质合成中的易位步骤,从而导致非抗性细胞死亡。

筛选原理:转染了neo基因(氨基糖苷磷酸转移酶)的细胞可将G418磷酸化使其失活,从而在含有G418 的培养基中正常生长。

应用场景:适用于哺乳动物细胞、植物、酵母及原核细胞的稳定株筛选与维持。


【使用方法】

1. 建立杀灭曲线:由于不同细胞系对G418的敏感性差异巨大,首次实验务必进行梯度测试。
操作:将未转染的亲本细胞以较低密度接种,加入不同浓度的G418(如0, 100, 200, 400, 600, 800, 1000 μg/mL)。
终点判断:以 5–7 天内导致 100% 细胞死亡的最低浓度作为最佳筛选浓度。

2. 常用浓度筛选参考(具体细胞筛选浓度需根据方法步骤1杀灭曲线实验得到):

细胞类型

筛选浓度(参考)

维持浓度(参考)

哺乳动物细胞

200–1000 μg/mL

200–1000 μg/mL

植物细胞

200–1000 μg/mL

200–1000 μg/mL

酵母细胞

200–1000 μg/mL

200–1000 μg/mL


【注意事项】

1. 抗生素联用:尽量避免将G418与其他氨基糖苷类抗生素(如庆大霉素、卡那霉素)联用,以免产生交叉抗性或协同毒性。(注:青霉素/链霉素通常不直接抑制G418药效,但高浓度抗生素累加会增加细胞代谢压力)。

2. 细胞密度影响:细胞密度过高会显著降低G418的杀伤效率。建议在筛选开始时,细胞汇合度控制在20%–30%。

3. 药效延迟性:G418 作用于蛋白质合成阶段,细胞通常会继续分裂2–3次才表现出明显的死亡。抗性克隆通常在接种10–14天后形成。反复冻融易导致抗生素失效,如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。

4. 安全防护:为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。仅限实验室科研使用,严禁农业/家庭/临床用途使用。

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