产品描述
【保存条件】
4ºC避光保存（请勿冷冻），有效期12个月
【概述】
本产品专门用于流式细胞术中胞内抗原检测的破膜处理。
作用机制：Saponin (皂苷) 是一种非离子型表面活性剂，能与细胞膜上的胆固醇特异性结合，诱导形成跨膜小孔（直径约8-10 nm）。
产品特点：
1. 温和性：相比 Triton X-100 等强力去垢剂，Saponin 对细胞形态（FSC/SSC）的影响较小，能较好地保护抗原表位。
2. 可逆性：Saponin 的破膜作用是可逆的。必须在整个染色和洗涤步骤中始终保持破膜剂的存在，否则胞内孔道会闭合，导致抗体无法洗出或结合。
【操作方法】
以下流程以检测胞内细胞因子为例，仅供参考：
1. 细胞收集：收获待测细胞（约1×106个），4°C、300–500 g (约1000–1500 rpm) 离心5分钟，弃上清。
2. 固定：加入500 μL预冷的固定液（推荐ED-9028 流式细胞固定液），室温孵育10–20分钟。注：必须先固定后破膜，以锁定胞内蛋白质结构。
3. 洗涤：离心后弃上清，加入1 mL PBS 洗涤一次。
4. 破膜：弃上清，加入1.5 mL 1×流式破膜缓冲液 (Saponin)，室温孵育15分钟。
5. 离心：300–500 g 离心5分钟，弃上清。
6. 抗体孵育：使用100 μL 1×流式破膜缓冲液重悬细胞，加入荧光标记的检测抗体，避光孵育30分钟。专业提示：此步必须使用破膜液而非普通 PBS，以维持膜孔开启状态。
7. 洗涤与上机：加入1–2 mL破膜液洗涤一次，离心弃上清后，用500 μL流式染色缓冲液（或PBS）重悬，立即上机分析。
【注意事项】
1. 维持破膜状态：Saponin的破膜效应在去除药剂后会消失。因此，从破膜开始到染色结束的所有洗涤和稀释步骤，均应使用本破膜缓冲液。
2. 防止挥发：表面活性剂溶液易产生气泡或挥发，用后请及时拧紧瓶盖。
3. 安全防护：仅限科研使用。操作时请穿实验服、戴一次性手套，避免接触皮肤和眼睛。
产品规格
- 货期
- 1-2天
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ED-8648、其它缓冲液、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
4ºC避光保存
常见问题
该产品如何保存？
请参照产品说明书中的保存条件。一般生物科研试剂建议在2-8℃或-20℃条件下保存，避免反复冻融。具体保存条件请以产品标签为准。
该产品的货期是多久？
ECOTOP SCIENTIFIC常规库存产品一般1-3个工作日内发货。如遇缺货情况，客服会及时与您沟通预计到货时间。
如何获取产品的技术支持？
您可以通过电话（15622108587）或在线客服联系我们的技术支持团队。我们提供产品使用指导、实验方案优化等专业技术服务。
