产品描述
【保存条件】
4ºC或-20ºC避光保存，有效期12个月
【概述】
本产品专门用于流式细胞术中胞内抗原检测前的细胞固定处理。
作用机制：通过在蛋白质分子间形成共价交联，迅速“锁定”细胞形态及胞内抗原（如细胞因子、酶等），防止其在破膜步骤中发生降解或渗漏。
产品特点：
1. 形态保护：在有效固定的同时，最大限度地维持细胞的散射光特征（FSC/SSC）。
2. 兼容性广：适用于绝大多数表面抗原荧光标记后的固定，不影响已结合抗体的荧光强度。
【操作方法(仅供参考）】
以下流程以检测胞内细胞因子为例，仅供参考。实际操作请结合ED-8648破膜剂使用。
1. 细胞收集：收获待测细胞（约1×106个），4°C、300–500 g (约1000–1500 rpm) 离心5分钟，弃上清。
2. 固定：加入500 μL预冷(4°C)的固定液，室温孵育10–20分钟。注：必须先固定后破膜，以锁定胞内蛋白质结构。
3. 洗涤：离心后弃上清，加入1 mL PBS 洗涤一次。
4. 破膜：弃上清，加入1.5 mL 1×流式破膜缓冲液 (Saponin)，室温孵育15分钟。
5. 离心：300–500 g 离心5分钟，弃上清。
6. 抗体孵育：使用100 μL 1×流式破膜缓冲液重悬细胞，加入荧光标记的检测抗体，避光孵育30分钟。专业提示：此步必须使用破膜缓冲液而非普通 PBS，以维持膜孔开启状态。
7. 洗涤与上机：加入1–2 mL破膜缓冲液洗涤一次，离心弃上清后，用500 μL流式染色缓冲液（或PBS）重悬，立即上机分析。
【注意事项】
1. 先表面后胞内：若需检测细胞表面标志物，建议先进行表面抗体染色，洗涤后再进行固定处理。
2. 防止结块：加入固定液时，务必先将细胞沉淀弹散或涡旋混匀，防止细胞在固定过程中发生粘连。
3. 固定时间：固定时间不宜过短（防止破膜时抗原渗漏）或过长（超过1小时可能掩盖抗原表位或导致自发荧光升高）。
4. 安全防护：操作时请穿实验服、戴手套及口罩，并在通风橱或洁净台内操作。
产品规格
- 货期
- 1-2天
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ED-9032、其它缓冲液、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
4ºC或-20ºC避光保存
常见问题
该产品如何保存？
请参照产品说明书中的保存条件。一般生物科研试剂建议在2-8℃或-20℃条件下保存，避免反复冻融。具体保存条件请以产品标签为准。
该产品的货期是多久？
ECOTOP SCIENTIFIC常规库存产品一般1-3个工作日内发货。如遇缺货情况，客服会及时与您沟通预计到货时间。
如何获取产品的技术支持？
您可以通过电话（15622108587）或在线客服联系我们的技术支持团队。我们提供产品使用指导、实验方案优化等专业技术服务。
