ED-8091 0.5M TCEP溶液（pH 7.0）

【保存条件】

4°C或-20°C避光保存，有效期12个月

【概述】

TCEP [三(2-羧乙基)膦] 是一种高效、无气味的硫醇类二硫键还原剂。

反应原理：TCEP 通过膦原子对二硫键进行亲核攻击，将其还原为自由巯基。

核心优势：
1。高效性：在数分钟内即可完全还原大多数多肽或蛋白质中的二硫键。
2。环境友好：无需在通风橱内操作，彻底摆脱 DTT 或 BME 的恶臭。
3。稳定性：在水溶液中极具抗氧化性，在较低 pH（< 3.0）条件下仍保持高还原活性。
4。兼容性：由于TCEP不含巯基，在后续的巯基修饰反应（如马来酰亚胺标记）前无需去除，这比DTT更加便捷。 

【使用方法】

本产品为0.5 M高浓度母液，建议稀释后使用：

1. 常规还原：直接在蛋白质/多肽溶液中加入 TCEP，建议终浓度为5-50 mM。

2. 反应条件：室温下孵育5-15 min即可打断绝大部分二硫键。

3. 电泳上样：用于蛋白变性电泳时，建议加入上样缓冲液后95°C加热5 min。

【注意事项】

1. 缓冲液兼容性（重要）：TCEP 在磷酸盐缓冲液 (PBS) 中，尤其在中性或碱性条件下会发生缓慢氧化导致失活。若必须使用PBS，请务必现用现配，或改用Tris、HEPES、MES等缓冲体系。

2. 金属离子影响：TCEP会螯合某些金属离子（如Zn²⁺），若实验涉及金属依赖性蛋白，需谨慎评估。

3. 变性控制：加热温度不宜超过100°C或时间过长（> 15 min），否则可能导致蛋白非特异性降解或电泳指示剂（溴酚蓝）变色。

4. 安全防护：仅限科研使用。操作时请穿戴实验服、一次性手套和护目镜。