ED-8748 UA裂解液

【保存条件】

4℃保存，有效期12个月

【概述】

UA 裂解液（UA Lysis Buffer）是一种以尿素（Urea）为主要变性剂的细胞/组织裂解液，主要成分为高浓度尿素、表面活性剂及缓冲盐体系。 本产品能够有效破坏细胞膜及核膜，溶解变性蛋白质，适用于蛋白质组学分析（如胶内酶切、蛋白提取）、Western Blot 样本制备等实验。其强变性能力可有效抑制蛋白酶活性，防止蛋白降解，同时适用于提取疏水性蛋白及膜蛋白。

【使用建议】

A. 细胞样本（贴壁细胞/悬浮细胞） 

1. 准备：将UA裂解液取出恢复至室温（或根据实验要求置于冰上）。使用前如需添加蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂，请按相应比例现用现加。

2. 洗涤：弃去培养基，用预冷的PBS轻轻洗涤细胞1-2 次。

3. 裂解： 

贴壁细胞：按每10 cm²培养面积加入150-250μL裂解液，冰上裂解5-10分钟，用细胞刮刀收集。

悬浮细胞：离心收集细胞沉淀，按细胞压积的5-10倍体积加入裂解液，吹打混匀，冰上裂解10-15分钟。 

4. 收集：4℃，12,000-14,000 rpm 离心10-15分钟。

5. 取上清：转移上清至新的预冷离心管中，即为蛋白样品。建议进行蛋白定量后用于下游实验。

B. 组织样本

1. 将新鲜组织剪切成小块，置于液氮或冰上预冷的匀浆器中。

2. 按每10 mg组织加入100-200μL裂解液的比例加入预冷裂解液。

3. 冰上充分匀浆至无肉眼可见组织块。

4. 4℃，12,000-14,000 rpm离心15-20分钟，取上清备用。

【注意事项】

1. 兼容性：本产品含有高浓度尿素，不兼容BCA法蛋白定量（尿素会干扰BCA 显色），建议使用Bradford (考马斯亮蓝) 法进行蛋白浓度测定。

2. 安全防护：尿素及裂解液中的表面活性剂可能对皮肤、眼睛有刺激性，操作时请佩戴实验服、手套和护目镜。

3. 温度影响：尿素在低温下易析出结晶。若保存或运输过程中出现沉淀，请将产品置于 30-37℃水浴中温育并摇匀，待沉淀完全溶解后再使用。

4. 下游应用：本产品制备的蛋白样品通常适用于SDS-PAGE电泳和Western Blot；若用于质谱分析，建议使用前进行还原烷基化处理（如需）。

5. 废弃物处理：使用后的裂解液请按照实验室危险化学品废弃物处理规范进行处置。