产品描述
【保存条件】
室温避光保存，有效期12个月。冷藏可延长时间并维持最佳活性。
【概述】
RNAEx ZOL Reagent 是一种即用型全能提取试剂，采用一步法苯酚/异硫氰酸胍体系，能够迅速裂解细胞及组织。
分级原理：加入氯仿离心后，样本分为上层水相、中间相和下层有机相。
组分分布：水相 (RNA)、中间相 (DNA)、有机相 (Protein)。
应用优势：保持RNA完整性，最大限度去除蛋白及DNA污染，适用于人、动物、植物、酵母菌或细菌的细胞和组织样本。
【使用方法】
1. 样品处理：根据起始材料的类型，选择相应的裂解方式
① 组织：每50-100 mg组织加入1 mL RNAEx ZOL试剂，并用匀浆器充分匀浆。
② 贴壁细胞：移除生长培养基，每1×106-107个细胞直接加入约0.5mL-1mL RNAEx ZOL试剂培养皿中裂解细胞，反复吹打数次以匀浆化样本。
示例：如细胞长满的3.5cm直径的培养皿中加入约1mL RNAEx ZOL试剂。
③ 悬浮细胞：通过离心收集细胞并弃去上清液，向（来自动物、植物或酵母来源的5-10×106个细胞或1×107个细菌来源细胞）样本添加1 mL的RNAEx ZOL试剂，反复吹打数次以匀浆化样本。
注：加入RNAEx ZOL试剂前请勿洗涤细胞以避免mRNA降解
2. 相分离
① 静置：将加完RNAEx ZOL试剂后的样品在室温（15-30°C）静置5分钟，以利于样品核蛋白复合物完全分离。
② 加氯仿：按每1mL RNAEx ZOL Reagent加入0.2mL 氯仿（或ES-8522 氯仿替代物），小心盖好样品管后，剧烈震荡15秒，后置于室温（15-30°C）静置2-3分钟。
③ 离心：在4°C下12,000×g离心15分钟。此时混合物分层，RNA存在于上层无色水相中。
④ 转管：小心吸取水相转移至新管（建议试管倾斜45°操作，避免触及中间相）。
3. 沉淀RNA
① 沉淀：每1 mL用于裂解的RNAEx ZOL试剂，添加0.5 mL异丙醇到转移到新管的水相中。
② 静置：4°C或室温（15-30°C）静置10分钟
③ 收集：在4°C下12,000×g离心10分钟。管底及管侧会出现白色凝胶状沉淀，即为 RNA。小心弃去上清液。
4. 洗涤RNA
① 洗涤：按每1 mL RNAEx ZOL试剂裂解处理所得到的沉淀重悬于1 mL 75%乙醇中。
② 离心：短暂涡旋样本，然后在4°C下7500×g离心5分钟。
③ 干燥：弃去上清，将离心管倒扣在洁净纸巾上，空气干燥5-10分钟。
注：切勿加热干燥或真空离心干燥，否则RNA将极难溶解。
5. 溶解RNA
① 溶解：用20-50 μL不含RNA酶的水（如ES-8087无DNA/RNA酶水(无菌)），反复吹打使沉淀完全溶解。得到的RNA进行检测或-80℃长期保存（若需更长时间保存请添加适量RNA Chill（ES-8520））。
② 助溶：若溶解困难，可在55-60°C下水浴孵育10分钟。
【注意事项】
1. 防止RNA降解：皮肤接触是RNase的主要来源。操作时必须佩戴双层手套、口罩，且所有枪头、离心管必须标注为RNase-free。
2. 相界污染：吸取水相时，宁可少吸，切勿触碰中间相，否则会导致严重的DNA污染。
3. 安全性（危险提示）：必须在通风橱内操作。若不慎溅到皮肤，请立即用大量清水冲洗，并咨询医生。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100mL、200mL
应用领域
本产品适用于EK-5301、RNA提取、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温避光保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
室温避光保存，有效期 12 个月。冷藏可延长时间并维持最佳活性。提取的 RNA：立即检测或 -80℃ 长期保存（若需更长时间保存请添加适量 RNA Chill ES-8520）。
与 EK-5303 NewZOL LS 的区别？
EK-5301 RNAEx ZOL（本品）：传统 Trizol 类配方，需氯仿相分离。EK-5303 NewZOL LS：无需氯仿相分离——通过加无酶水使 DNA/蛋白/多糖形成半固体沉淀。选择：① 偏好传统流程或需要同时获得 DNA + 蛋白 → EK-5301；② 希望避开氯仿（环保）或样品多糖含量高 → EK-5303。
可用于哪些应用场景？
适用：① 总 RNA 提取（包括 mRNA、rRNA、tRNA）；② 小 RNA（含 miRNA，但需调整异丙醇比例至 1.5 倍以保留小 RNA）；③ DNA 提取（中间相）；④ 蛋白提取（有机相）；⑤ 与 EK-1300 RNAEx ZOL 柱法配合（先用本品分相，水相直接上柱纯化）；⑥ RT-PCR、qPCR、RNA-seq、Northern blot 等所有 RNA 下游应用。
相界污染如何处理？
相界污染：吸取水相时，宁可少吸，切勿触碰中间相，否则会导致严重的 DNA 污染。——中间白色界面层含 DNA 和变性蛋白，触碰一点点就会污染最终 RNA。正确操作：① 倾斜 45° 持管；② 缓慢吸取水相 80–90%；③ 留下底层 10–20% 不吸；④ 吸的时候紧贴液面而非深入。
RNA 防降解的核心要点？
防止 RNA 降解：皮肤接触是 RNase 的主要来源。操作时必须佩戴双层手套、口罩，且所有枪头、离心管必须标注为 RNase-free。额外措施：① 操作台用 EX-0411 核酸酶清除剂处理；② 准备专用 RNase-free 工作区；③ 所有溶液（如氯仿、异丙醇、75% 乙醇）用 RNase-free 水配制。
RNA 溶解？
溶解：用 20–50 µL 不含 RNA 酶的水（如 ES-8087 无 DNA/RNA 酶水（无菌）），反复吹打使沉淀完全溶解。助溶：若溶解困难，可在 55–60℃ 下水浴孵育 10 min。——干燥过度的 RNA 沉淀（特别是真空干燥）极难溶解，必须空气干燥控制时间。
RNA 沉淀与洗涤？
① 沉淀：每 1 mL 用于裂解的 RNAEx ZOL + 0.5 mL 异丙醇；② 静置：4℃ 或室温（15–30℃）静置 10 min；③ 收集：4℃ 12,000×g 离心 10 min（白色凝胶状沉淀即为 RNA）；④ 洗涤：每 1 mL RNAEx ZOL 沉淀重悬于 1 mL 75% 乙醇，短暂涡旋；⑤ 离心：4℃ 7,500×g 离心 5 min（注意是 7,500×g 不是常规 12,000×g）；⑥ 干燥：弃上清倒扣纸巾，空气干燥 5–10 min（切勿加热干燥或真空离心干燥，否则 RNA 极难溶解）。
相分离步骤？
① 静置：加完 RNAEx ZOL 试剂后室温（15–30℃）静置 5 min 利于核蛋白复合物完全分离；② 加氯仿：每 1 mL RNAEx ZOL + 0.2 mL 氯仿（或 ES-8522 氯仿替代物），剧烈震荡 15 s，室温静置 2–3 min；③ 离心：4℃ 12,000×g 离心 15 min——混合物分层，RNA 在上层无色水相；④ 转管：小心吸取水相转移至新管（建议试管倾斜 45° 操作，避免触及中间相）。
起始量与样品类型？
① 组织：每 50–100 mg 组织 + 1 mL RNAEx ZOL 试剂，匀浆器充分匀浆；② 贴壁细胞：移除生长培养基，每 1×10⁶–10⁷ 细胞 + 0.5–1 mL RNAEx ZOL 试剂直接在培养皿中裂解（示例：3.5 cm 培养皿细胞长满 + 1 mL RNAEx ZOL）；③ 悬浮细胞：离心收集弃上清（5–10×10⁶ 动植物/酵母细胞或 1×10⁷ 细菌细胞 + 1 mL 试剂）。
本产品的核心特点？
RNAEx ZOL Reagent 是一种即用型全能提取试剂，采用一步法苯酚/异硫氰酸胍体系，能够迅速裂解细胞及组织。分级原理：加入氯仿离心后，样本分为上层水相、中间相和下层有机相。组分分布：水相（RNA）、中间相（DNA）、有机相（Protein）。应用优势：保持 RNA 完整性，最大限度去除蛋白及 DNA 污染，适用于人、动物、植物、酵母菌或细菌的细胞和组织样本。——本品对标 Thermo Trizol 配方。
