产品描述
【保存条件】
室温避光保存，有效期12个月。冷藏可延长时间并维持最佳活性。
【概述】
NewZOL LS采用先进的单相提取技术，无需氯仿相分离。通过加入无酶水使DNA、蛋白质和多糖形成半固体沉淀，而RNA留在上清中。该试剂能高效分离总RNA（包含mRNA、rRNA及microRNA）。
高纯度：分离出的 RNA 纯度高、无降解，无需DNase处理即可直接用于RT-PCR。
无需氯仿：无需进行氯仿诱导的分层即可获得纯净RNA。
应用广泛：适用于RT-PCR、qRT-PCR、微阵列、poly A+ 筛选、Northern Blot和RNase 保护分析等。
【操作方法】
1. 样本前处理 (请选择对应样本类型)
关键：裂解是否完全决定了最终的纯度和产量。
① 贴壁细胞：
比例：每10 cm2面积（如直径为3.5 cm细胞培养皿）加1 mL 试剂。
操作：弃培养基，加药后直接在皿里反复吹吸裂解。
② 悬浮细胞：
比例：1 mL试剂: 107个细胞。
操作：反复吹吸至完全裂解。
③ 液体样本 (Liquid Samples)
比例：1 mL试剂: 0.4 mL样本。
补位：样本量不足0.4 mL 时，加无酶水补齐到0.4 mL后加入试剂。
④ 组织样本：
比例：1 mL试剂:100 mg 组织（高DNA组织如脾脏/淋巴结/肿瘤组织减半：1 mL : 50 mg）。
操作：立即充分匀浆。匀浆至液体无颗粒、颜色均匀、略带粘稠感（高RNase组织如胰腺/脾脏/肝脏等需冰上匀浆，脑组织用玻璃匀质器）。
⑤ 高脂肪样本（如脑组织/脂肪组织/脊髓样本等）
除脂：按组织样本处理匀质后先12,000 g离心5分钟，离心后多余脂质会形成顶层油脂层，使用移液枪或注射器除去大部分油脂层 。取下层液继续后续提取步骤。
2. 杂质沉淀 (关键去除DNA、蛋白质和多糖步骤)
① 加水：按每1mL NewZOL LS加入0.4 mL不含RNA酶的水（如ES-8087无DNA/RNA酶水(无菌)）。
② 反应：剧烈摇晃15秒，室温放置5-15分钟（组织样本需放置满15分钟） 。
③ 离心：室温下以12,000×g离心15分钟 。
④ 取样：吸取上清液（约占总体积75%，如使用1 mL裂解液对应吸取约1 mL上清）转移至新管。注意：此时DNA、蛋白质和大部分多糖会形成半固体沉淀，RNA留在上清液中。宁可少吸，切勿触碰底层固体。
3. 总RNA沉淀
① 沉淀：加入1倍体积的异丙醇（即1 mL上清液加 1 mL 异丙醇） 。
② 静置：室温放置10分钟
③ 离心：室温下以12,000×g离心10分钟 。弃上清，管底可见白色沉淀即为RNA（对于脾脏等样本，RNA可能在管侧形成凝胶状膜）。
4. 洗涤RNA
① 洗涤：加入1mL 75% 乙醇 (v/v)，用移液器轻轻吹打漂洗沉淀 。
② 离心：室温下以7500× g 离心3分钟。重复洗涤一次。
③ 干燥：弃去上清，将离心管倒扣在洁净纸巾上，空气干燥5-10分钟。
注：切勿加热干燥或真空离心干燥，否则RNA将极难溶解。
5. 溶解RNA
① 溶解：用20-50 μL不含RNA酶的水（如ES-8087无DNA/RNA酶水(无菌)），反复吹打使沉淀完全溶解。
② 助溶：若溶解困难，可在55-60°C下水浴孵育10分钟。
③ 保存：得到的RNA立即进行检测或-80℃长期保存（若需更长时间保存请添加适量RNA Chill（ES-8520））。
【注意事项】
1. 储存：若暂时无法实验，可在加入NewZOL LS后-80°C保存最长1年稳定。
2. 细胞清洗：收集细胞时不要洗涤细胞（防止RNA降解），直接收集沉淀后加入试剂。
3. 组织匀浆状态：匀浆器生热会降解 RNA，长时间务必在冰上操作并采取间歇性匀浆。
4. 防止RNA降解：皮肤接触是RNase的主要来源。操作时必须佩戴双层手套、口罩，且所有枪头、离心管必须标注为RNase-free。
5. 安全性（危险提示）：必须在通风橱内操作。若不慎溅到皮肤，请立即用大量清水冲洗。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100mL、200mL
应用领域
本产品适用于EK-5303、RNA提取、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
得到的RNA立即进行检测或-80℃长期保存（若需更长时间保存请添加适量RNA Chill（ES-8520））
常见问题 (FAQ)
可用于哪些应用场景？
RT-PCR、qRT-PCR、微阵列、poly A+ 筛选、Northern Blot 和 RNase 保护分析。扩展：① 多糖丰富样品（植物、真菌、肿瘤）的优选；② 安全实验室升级（不再使用氯仿）；③ 大批量样品处理（流程简化）；④ DNase-free 应用（无需额外 DNase 处理）；⑤ small RNA 分析（包括 miRNA）。
高脂肪样本怎么除脂？
高脂肪样本（如脑组织/脂肪组织/脊髓样本等）：除脂：按组织样本处理匀质后先 12,000 g 离心 5 min，离心后多余脂质会形成顶层油脂层，使用移液枪或注射器除去大部分油脂层。取下层液继续后续提取步骤。——脂肪未去除会使后续杂质沉淀步骤效率下降，影响 RNA 纯度。
脾、肝、淋巴等高 RNase 组织的特殊处理？
高 DNA 组织如脾脏/淋巴结/肿瘤组织减半：1 mL : 50 mg，高 RNase 组织如胰腺/脾脏/肝脏等需冰上匀浆，脑组织用玻璃匀质器。关键策略：① 高 RNase 组织全程冰上操作，限制酶活性；② 减半起始量避免试剂不足；③ 玻璃匀质器对脆弱组织（脑）损伤小；④ 匀浆器生热会降解 RNA，长时间务必在冰上操作并采取间歇性匀浆。
RNA 溶解？
溶解：用 20–50 µL 不含 RNA 酶的水（如 ES-8087），反复吹打使沉淀完全溶解。助溶：若溶解困难，可在 55–60℃ 下水浴孵育 10 min。保存：得到的 RNA 立即进行检测或 -80℃ 长期保存（若需更长时间保存请添加适量 RNA Chill ES-8520）。
RNA 沉淀与洗涤？
① 总 RNA 沉淀：加 1 倍体积异丙醇（即 1 mL 上清液 + 1 mL 异丙醇），室温放置 10 min；② 离心：室温 12,000×g 离心 10 min（对于脾脏等样本，RNA 可能在管侧形成凝胶状膜）；③ 洗涤 RNA：加 1 mL 75% 乙醇轻轻吹打漂洗；④ 离心：室温 7,500×g 离心 3 min（注意是 7,500×g 不是常规 12,000×g），重复洗涤一次；⑤ 干燥：弃上清倒扣纸巾空气干燥 5–10 min（切勿加热干燥或真空离心干燥）。
杂质沉淀步骤的关键？
杂质沉淀（关键去除 DNA、蛋白质和多糖步骤）：① 加水：每 1 mL NewZOL LS + 0.4 mL 不含 RNA 酶的水（如 ES-8087）；② 反应：剧烈摇晃 15 s，室温放置 5–15 min（组织样本需放置满 15 min）；③ 离心：室温 12,000×g 离心 15 min；④ 取样：吸取上清液（约占总体积 75%，如 1 mL 裂解液对应吸取约 1 mL 上清）转移至新管。注意：此时 DNA、蛋白质和大部分多糖会形成半固体沉淀，RNA 留在上清液中。宁可少吸，切勿触碰底层固体。
起始量与样品类型？
：① 贴壁细胞：每 10 cm² 面积（如直径 3.5 cm 培养皿）+ 1 mL 试剂，弃培养基直接皿中吹吸裂解；② 悬浮细胞：1 mL 试剂 : 10⁷ 细胞；③ 液体样本：1 mL 试剂 : 0.4 mL 样本（样本量不足 0.4 mL 时加无酶水补齐到 0.4 mL）；④ 组织：1 mL 试剂 : 100 mg 组织（高 DNA 组织如脾脏/淋巴结/肿瘤组织减半：1 mL : 50 mg）；⑤ 高脂肪样本（脑组织/脂肪组织/脊髓）：先按组织样本匀质后 12,000 g 离心 5 min 除脂，取下层液继续。
与 EK-5301 RNAEx ZOL 的关键差异？
EK-5301 RNAEx ZOL：传统苯酚/异硫氰酸胍配方，需氯仿相分离；EK-5303 NewZOL LS（本品）：单相提取技术，无需氯仿——通过加无酶水使 DNA/蛋白/多糖形成半固体沉淀。优势：① 避开氯仿（环保更安全）；② 步骤简化；③ 无需 DNase 处理即可直接 RT-PCR（DNA 在沉淀步被去除）；④ 对多糖含量高的样品表现更好。搭配产品：可与 ES-8522（氯仿替代物）联用作为传统 RNAex ZOL/Trizol 实验室升级方案。
本产品的核心特点？
NewZOL LS 采用先进的单相提取技术，无需氯仿相分离。通过加入无酶水使 DNA、蛋白质和多糖形成半固体沉淀，而 RNA 留在上清中。该试剂能高效分离总 RNA（包含 mRNA、rRNA 及 microRNA）。高纯度：分离出的 RNA 纯度高、无降解，无需 DNase 处理即可直接用于 RT-PCR。无需氯仿：无需进行氯仿诱导的分层即可获得纯净 RNA。应用广泛：适用于 RT-PCR、qRT-PCR、微阵列、poly A+ 筛选、Northern Blot 和 RNase 保护分析等。
