产品描述
【保存条件】
4℃保存，有效期12个月
【概述】
EasyLys-I专为昆虫细胞及组织设计，采用温和的非变性去垢剂配方，能够在不破坏蛋白空间结构的前提下，快速、高效地抽提总蛋白。
广泛兼容：提取的蛋白可直接用于His/GST/Flag等标签蛋白纯化、WB、IP/Co-IP、ELISA，以及报告基因（Luciferase、β-gal）和蛋白激酶（PKA、PKC）的活性检测。
适用样本：完美适配常用的昆虫细胞系（如 Sf9, Sf21, High Five等）及其感染杆状病毒后的重组蛋白表达体系。
【使用前准备】
1. 预冷：使用前确保 EasyLys-I试剂处于冰浴状态。
2. 添加抑制剂（核心）：临用前，向裂解液中加入适量蛋白酶抑制剂（如ES-8315）；若研究磷酸化蛋白，必须补加磷酸酶抑制剂（如ES-8317）。
【操作方法】
1. 样品前处理（具体用量参考表1）：
贴壁细胞：
① 弃去培养基，用PBS洗涤一遍以去除血清蛋白。
② 加入预冷裂解液（如6孔板每孔加入100-200μL），将培养板置于摇床上剧烈摇动，或手动敲击侧壁。通常5-6 min后细胞会逐渐脱落。
悬浮细胞：
① 500-800×g离心5min收集细胞，弃去培养基，用PBS洗涤一遍以去除血清蛋白。
② 按比例加入裂解液（每0.5-2×107个细胞加入1mL裂解液），通过手指弹击或轻微涡旋重悬细胞沉淀。
2. 裂解与离心：
① 孵育：将混合物置于冰上或4℃摇床振荡孵育10-15 min。
② 离心：4℃下，14000×g离心10-15min。
③ 收集：立即将含有活性蛋白的上清液转移至预冷的离心管中。
表1. 不同规格的细胞培养器皿中EasyLys-I 昆虫活性蛋白提取试剂的用量表。
细胞孔板或培养皿 | 面积（cm2） | 提取试剂用量 |
100mm | 55 | 500-1000μL |
60mm | 21 | 200-400μL |
6-well plate | 9.5 | 100-200μL/孔 |
24-well plate | 1.9 | 25-50μL/孔 |
96-well plate | 0.32 | 5-10μL/孔 |
【注意事项】
1. 蛋白产量低：若由于裂解不全或样本过载导致产量低，应适当增加裂解液比例或延长匀浆/冰上孵育时间。
2. 蛋白降解或失活：必须确保全程在冰上操作，并确认已足量添加未失效的蛋白酶/磷酸酶抑制剂。
3. 样本保存建议：提取后的蛋白应立即分装并冻存于-80℃，严禁反复冻融以防止蛋白变性或失活。
4. 安全防护与用途：操作时请佩戴实验服及手套；本品仅限科研使用，严禁用于临床诊断、食品或药品。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml
应用领域
本产品适用于ES-6225、蛋白提取、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
4℃保存
常见问题
该产品如何保存？
请参照产品说明书中的保存条件。一般生物科研试剂建议在2-8℃或-20℃条件下保存，避免反复冻融。具体保存条件请以产品标签为准。
该产品的货期是多久？
ECOTOP SCIENTIFIC常规库存产品一般1-3个工作日内发货。如遇缺货情况，客服会及时与您沟通预计到货时间。
如何获取产品的技术支持？
您可以通过电话（15622108587）或在线客服联系我们的技术支持团队。我们提供产品使用指导、实验方案优化等专业技术服务。
