Q: 试剂如何保存？

室温保存，有效期 12 个月。

Q: 膜的预处理？

膜的预处理：将 PVDF 膜使用甲醇提前浸泡 1 分钟至透明状态，随后转入 1× 工作液平衡 2–3 分钟。NC 膜直接置于 1× 工作液平衡 2–3 分钟。——PVDF 膜活化时间比 ES-7015（2–3 min）略短（1 min），与膜厚度有关。

Q: 半干转参数？

半干转的电流参数统一为单块迷你胶1.3 A、双2.5 A，转膜时间根据目标磷酸调整调整：高分子量（>150 kDa）需10–15分钟，低分子量（<30 kDa）只需5–7分钟，中间范围则（5–150 kDa）7–10分钟，全量程（5–300 kDa）10–15分钟。关键参数：采用恒定电流模式，电压上限 25–30 V。1.5 mm 凝胶建议在上述条件上适当延长 2–3 分钟。

Q: 稀释与配制？

工作液配制：使用前用去离子水将 5× 溶液稀释至 1× 工作液。例如将 200 mL 5× FastBlot 快速蛋白电泳转膜液 + 600–700 mL 去离子水混匀，再加入 100–200 mL 甲醇或乙醇充分混匀（使用前预冷更优，醇比例在 10–20% 均可，大分子可调至 20%）。——大分子蛋白（>150 kDa）醇比例提高到 20% 可减少蛋白被甲醇沉淀过强的问题，但同时减少凝胶溶胀。

Question 1

试剂如何保存？

Accepted Answer

室温保存，有效期 12 个月。

Question 2

可用于哪些应用场景？

Accepted Answer

适用所有半干转 WB 应用，特别替代伯乐 Trans-Blot Turbo 系统：① 同等流速（5–15 min）但成本更低；② 兼容现有伯乐半干转设备；③ 5–300 kDa 全谱蛋白；④ 配合 SuperBlot 系列其他产品做全套快速 WB。

Question 3

消除气泡的关键？

Accepted Answer

缓冲液平衡：凝胶和滤纸必须在工作液中充分浸泡，确保各层之间无气泡。——气泡会导致：① 局部不导电，蛋白无法转移（出现白斑）；② 产热集中烧坏胶。建议：① 滤纸 + 凝胶 + 膜全部预浸泡 2–3 min；② 装夹时用滚动棒（玻璃管或滚轮）排气。

Question 4

连续转膜的产热控制？

Accepted Answer

产热控制：由于电流较大，若连续操作，建议在两次转膜之间让转膜仪电极板自然冷却，防止过热导致胶熔化。高强度电流下电极板会持续蓄热，连转 3–4 块胶后温度可能超过 60℃，影响后续转膜效率。

Question 5

醇类选择？

Accepted Answer

醇类选择：本品必须添加甲醇或乙醇。甲醇对小蛋白拦截效果更好，乙醇更环保安全。——选择依据：① 检测低分子量蛋白（<30 kDa）→ 甲醇；② 实验室追求安全/环保 → 乙醇；③ 不在意可任选。

Question 6

膜的预处理？

Accepted Answer

膜的预处理：将 PVDF 膜使用甲醇提前浸泡 1 分钟至透明状态，随后转入 1× 工作液平衡 2–3 分钟。NC 膜直接置于 1× 工作液平衡 2–3 分钟。——PVDF 膜活化时间比 ES-7015（2–3 min）略短（1 min），与膜厚度有关。

Question 7

半干转参数？

Accepted Answer

半干转的电流参数统一为单块迷你胶1.3 A、双2.5 A，转膜时间根据目标磷酸调整调整：高分子量（>150 kDa）需10–15分钟，低分子量（<30 kDa）只需5–7分钟，中间范围则（5–150 kDa）7–10分钟，全量程（5–300 kDa）10–15分钟。关键参数：采用恒定电流模式，电压上限 25–30 V。1.5 mm 凝胶建议在上述条件上适当延长 2–3 分钟。

Question 8

稀释与配制？

Accepted Answer

工作液配制：使用前用去离子水将 5× 溶液稀释至 1× 工作液。例如将 200 mL 5× FastBlot 快速蛋白电泳转膜液 + 600–700 mL 去离子水混匀，再加入 100–200 mL 甲醇或乙醇充分混匀（使用前预冷更优，醇比例在 10–20% 均可，大分子可调至 20%）。——大分子蛋白（>150 kDa）醇比例提高到 20% 可减少蛋白被甲醇沉淀过强的问题，但同时减少凝胶溶胀。

Question 9

与 ES-7015（无醇版）的区别？

Accepted Answer

ES-7018（含醇版，本品）：必须添加甲醇或乙醇，醇比例 10–20%；ES-7015（无醇版）：完全不需要加醇。选择：① 沿用传统 Towbin 配方习惯 → ES-7018；② 希望避开有机溶剂 → ES-7015。两者都是 5× 浓缩液，半干转膜效率均 5–15 min。

Question 10

本产品的核心特点？

Accepted Answer

FastBlot 快速蛋白电泳转膜液是一种改良的 Towbin 经典缓冲液，这种专有的配方大大提高了转移速度，而不会产生过多的热量而影响蛋白质。可用于半干转膜仪将 5–300 kDa 蛋白从聚丙烯酰胺凝胶 SDS-PAGE 快速半干转移至硝酸纤维素膜或 PVDF 膜。——本品对标伯乐 Trans-Blot Turbo 半干转系统的转膜液配方。

转膜类型	分子量	1块迷你胶	2 块迷你胶	转膜时间
高分子量蛋白	>150KD	1.3A	2.5A	10-15分钟
低分子量蛋白	<30KD	1.3A	2.5A	5-7分钟
其它分子量蛋白	5-150KD	1.3A	2.5A	7-10分钟
全量程	5-300KD	1.3A	2.5A	10-12分钟

ES-7018 5× FastBlot快速蛋白电泳转膜液