产品描述
【保存条件】
室温保存,有效期12个月
【概述】
FastBlot 快速蛋白电泳转膜液是一种改良的 Towbin 经典缓冲液,这种专有的配方大大提高了转移速度,而不会产生过多的热量而影响蛋白质。可用于半干转膜仪将5-300kDa蛋白从聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE快速半干转移至硝酸纤维素膜或PVDF膜。
【使用方法】
1. 工作液配制:使用前用去离子水将 5×溶液稀释至 1×工作液:例如将200mL 5×FastBlot 快速蛋白电泳转膜液加入600-700mL去离子水中混匀,再加入100-200mL甲醇或乙醇充分混匀。(使用前预冷更优,醇比例在10-20%均可,大分子可调至20%)
2. 膜的预处理:将PVDF膜使用甲醇提前浸泡1分钟至透明状态,随后转入1×工作液平衡2-3分钟。(NC膜直接置于1×工作液平衡2-3分钟)
3. 转膜设置:采用恒定电流模式,电压上限建议设为25V-30V。
转膜类型 | 分子量 | 1块迷你胶 | 2 块迷你胶 | 转膜时间 |
高分子量蛋白 | >150KD | 1.3A | 2.5A | 10-15分钟 |
低分子量蛋白 | <30KD | 1.3A | 2.5A | 5-7分钟 |
其它分子量蛋白 | 5-150KD | 1.3A | 2.5A | 7-10分钟 |
全量程 | 5-300KD | 1.3A | 2.5A | 10-12分钟 |
注:1.5mm 凝胶建议在上述条件上适当延长2-3分钟。
【注意事项】
1. 醇类选择:本品必须添加甲醇或乙醇。甲醇对小蛋白拦截效果更好,乙醇更环保安全。
2. 产热控制:由于电流较大,若连续操作,建议在两次转膜之间让转膜仪电极板自然冷却,防止过热导致胶熔化。
3. 缓冲液平衡:凝胶和滤纸必须在工作液中充分浸泡,确保各层之间无气泡。
4. 安全防护:含醇溶液具有挥发性,操作时请佩戴实验服及手套,并在通风柜内操作。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 500ml
应用领域
本产品适用于ES-7018、转膜及封闭、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存?
室温保存,有效期 12 个月。
可用于哪些应用场景?
适用所有半干转 WB 应用,特别替代伯乐 Trans-Blot Turbo 系统:① 同等流速(5–15 min)但成本更低;② 兼容现有伯乐半干转设备;③ 5–300 kDa 全谱蛋白;④ 配合 SuperBlot 系列其他产品做全套快速 WB。
消除气泡的关键?
缓冲液平衡:凝胶和滤纸必须在工作液中充分浸泡,确保各层之间无气泡。——气泡会导致:① 局部不导电,蛋白无法转移(出现白斑);② 产热集中烧坏胶。建议:① 滤纸 + 凝胶 + 膜全部预浸泡 2–3 min;② 装夹时用滚动棒(玻璃管或滚轮)排气。
连续转膜的产热控制?
产热控制:由于电流较大,若连续操作,建议在两次转膜之间让转膜仪电极板自然冷却,防止过热导致胶熔化。高强度电流下电极板会持续蓄热,连转 3–4 块胶后温度可能超过 60℃,影响后续转膜效率。
醇类选择?
醇类选择:本品必须添加甲醇或乙醇。甲醇对小蛋白拦截效果更好,乙醇更环保安全。——选择依据:① 检测低分子量蛋白(<30 kDa)→ 甲醇;② 实验室追求安全/环保 → 乙醇;③ 不在意可任选。
膜的预处理?
膜的预处理:将 PVDF 膜使用甲醇提前浸泡 1 分钟至透明状态,随后转入 1× 工作液平衡 2–3 分钟。NC 膜直接置于 1× 工作液平衡 2–3 分钟。——PVDF 膜活化时间比 ES-7015(2–3 min)略短(1 min),与膜厚度有关。
半干转参数?
半干转的电流参数统一为单块迷你胶1.3 A、双2.5 A,转膜时间根据目标磷酸调整调整:高分子量(>150 kDa)需10–15分钟,低分子量(<30 kDa)只需5–7分钟,中间范围则(5–150 kDa)7–10分钟,全量程(5–300 kDa)10–15分钟。关键参数:采用恒定电流模式,电压上限 25–30 V。1.5 mm 凝胶建议在上述条件上适当延长 2–3 分钟。
稀释与配制?
工作液配制:使用前用去离子水将 5× 溶液稀释至 1× 工作液。例如将 200 mL 5× FastBlot 快速蛋白电泳转膜液 + 600–700 mL 去离子水混匀,再加入 100–200 mL 甲醇或乙醇充分混匀(使用前预冷更优,醇比例在 10–20% 均可,大分子可调至 20%)。——大分子蛋白(>150 kDa)醇比例提高到 20% 可减少蛋白被甲醇沉淀过强的问题,但同时减少凝胶溶胀。
与 ES-7015(无醇版)的区别?
ES-7018(含醇版,本品):必须添加甲醇或乙醇,醇比例 10–20%;ES-7015(无醇版):完全不需要加醇。选择:① 沿用传统 Towbin 配方习惯 → ES-7018;② 希望避开有机溶剂 → ES-7015。两者都是 5× 浓缩液,半干转膜效率均 5–15 min。
本产品的核心特点?
FastBlot 快速蛋白电泳转膜液是一种改良的 Towbin 经典缓冲液,这种专有的配方大大提高了转移速度,而不会产生过多的热量而影响蛋白质。可用于半干转膜仪将 5–300 kDa 蛋白从聚丙烯酰胺凝胶 SDS-PAGE 快速半干转移至硝酸纤维素膜或 PVDF 膜。——本品对标伯乐 Trans-Blot Turbo 半干转系统的转膜液配方。

