ES-8704 20×SuperBlot免冰浴快速转膜液

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【保存条件】

室温保存,有效期12个月


【概述】

SuperBlot蛋白电泳快速转膜液是一种改良的Towbin经典缓冲液,这种专有的配方大大提高了转移速度,而不会产生过多的热量而影响蛋白质,不需要使用冰块降温。

核心优势:无需冰浴降温,不影响蛋白活性,转膜效率高。


【操作方法】

1. 稀释 (1×工作液):使用前将20×SuperBlot免冰浴快速转膜液稀释至1×工作液。
示例:如将50mL 20×SuperBlot免冰浴快速转膜液加入750mL去离子水中与200mL甲醇/乙醇混匀

2. 膜的预处理:
PVDF膜:必须先用甲醇浸泡活化2-3分钟,随后置于1×工作液中平衡2-3分钟。
NC膜:直接置于1×工作液中平衡2-3分钟即可。

3. 滤纸与凝胶平衡:将剪裁好的厚滤纸和凝胶在工作液中浸泡平衡2-3分钟。

4. 转膜设置:按照转膜夹心结构安装设备[阴极(-)→滤纸→凝胶→膜→滤纸→阳极 (+) ]。

5. 湿转转膜条件:以下参数以10%浓度、1.0mm厚度的凝胶为例。
调整原则:凝胶浓度每增加2%或厚度每增加0.2mm,建议延长转膜时间5分钟。

转膜类型

电流

转膜时间

备注

湿转方案1

400mA

30-35分钟

产热较少,常规首选

湿转方案2

450mA

25-30分钟

速度更快,产热略高

半干转(Semi-Dry)

400mA

10-15分钟

需确保滤纸充分浸润


注意事项

1. 重复利用:为确保最佳实验结果,建议1×工作液使用次数不超过3次。

2. 温度提示:温转方案2运行时电流较大,液温可能升至45-50℃。该温升在配方承受范围内,通常不会破坏蛋白结构或影响后续WB显色。

3. 安全防护:试剂含醇类及化学成分,请务必佩戴实验服与一次性手套。

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