产品描述
【保存条件】
室温保存，有效期12个月
【概述】
本产品是一款高倍浓缩（50×）的EDTA抗原修复储备液，专为免疫组化（IHC）和免疫荧光（IF）实验前的表位暴露而设计。
修复机制：醛类固定剂（如甲醛、多聚甲醛）会在蛋白质分子间形成“亚甲基桥”交联，遮蔽抗原表位。本品通过EDTA的强力螯合作用，在热诱导（HIER）条件下有效打破交联，并去除可能屏蔽表位的金属离子，协同增强抗原暴露效果。
应用优势：pH 8.0的缓冲体系处于中性偏碱范围，在提供强劲修复动力的同时，能较好地兼顾组织形态的完整性。尤其适用于在常规柠檬酸钠（pH 6.0）中修复效果欠佳的疑难抗原。
适用范围：石蜡切片、冰冻切片及细胞爬片。
【实验前准备】
1. 工作液配制 (1×) ：使用去离子水或蒸馏水将100×储备液稀释100倍。
示例：取10 mL 100×母液加入990 mL去离子水中，混合均匀即得1×工作液。
2. 预热：建议在使用前将1×工作液预热至95-100°C，以确保修复的一致性。
【操作方法】
1. 样本预处理
石蜡切片：二甲苯3次，每次3-5min→无水乙醇2次，每次3-5min→ 95％乙醇1次，3-5min→ 90%乙醇1次，3-5min→ 75％乙醇1次，3-5min→蒸馏水洗2次，每次3-5min，确保切片彻底水化。
冰冻切片：用免疫染色洗涤液（如PBS）浸洗5 min。
2. 热修复步骤（核心步骤）
① 将预处理后的切片浸入已预热至95–100°C的1×修复液中。
② 加热维持：持续加热10–20 min（标准推荐时长为15min）。
水浴锅：温度最均匀，适合大规模切片修复。
微波炉：加热速度快，但必须防止暴沸导致切片干涸或脱落。建议使用中低功率。
压力锅：修复强度最高。喷气后维持2–5 min即可（需自然泄压）。
3. 冷却与后处理（防脱片关键）
① 自然冷却：修复结束后，将容器取出，在室温下自然冷却20–30 min至室温。
警告：严禁直接放入冷水中骤冷，否则极易导致组织脱片。
② 洗涤：用免疫染色洗涤液（如PBS）洗涤2–3次，每次3–5 min。
③ 后续实验：直接进入封闭或内源性酶阻断步骤。
【注意事项】
1. 最佳参数：修复时间受组织类型和固定时长影响。若信号弱可延长至30 min；若背景强或组织脱落，请尝试缩短时间或降低修复温度。
2. 防脱片建议：高温加热对组织附着力挑战较大，建议使用高粘附性防脱玻片。
3. 安全防护：操作时请佩戴实验服、一次性乳胶手套。
4. 科研用途：本产品仅限于科研使用，不得用于临床诊断、食品或药品。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100mL、500mL
应用领域
本产品适用于ES-8349、抗原修复、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
室温保存，有效期 12 个月。
防脱片建议？
注意：防脱片建议：高温加热对组织附着力挑战较大，建议使用高粘附性防脱玻片。——EDTA pH 8.0 比柠檬酸钠 pH 6.0 更易脱片，必须配合多聚赖氨酸 / APES 涂层防脱玻片。
100× 浓缩版的优势？
100× 浓缩版的核心价值：① 运输/储存空间节省——同样 1 L 工作液只需 10 mL 浓缩液；② 大规模实验室经济——100 mL 可配 10 L 工作液（足够 ~6,000 张切片）；③ 多中心研究标准化运输；④ 配合 ES-8345（柠檬酸钠 100×）形成完整 pH 6.0 + 8.0 双修复液体系。
可用于哪些应用场景？
适用：① 大规模实验室疑难抗原研究；② 磷酸化蛋白 IHC / IF；③ 多重荧光配对（pH 6.0 + pH 8.0 各自最优条件）；④ 临床病理疑难病例多中心研究；⑤ 过度固定样品的修复。
EDTA pH 8.0 系列与柠檬酸钠 pH 6.0 系列如何选择？
两系列修复液的机制和适用场景各有侧重：柠檬酸钠 pH 6.0 系列（ES-8326/8327/8345）通过弱酸性热水解修复抗原，适合大多数常规抗原，组织形态保留极佳、脱片风险低，是首选方案；EDTA pH 8.0 系列（本品 / ES-8328/8329）通过 EDTA 螯合结合中性偏碱环境修复抗原，适合高度交联或柠檬酸钠修复效果不佳的疑难抗原，组织保留良好但脱片风险略高。建议优先尝试柠檬酸钠系列，效果不理想时再换用 EDTA 系列。
什么抗原适合 EDTA pH 8.0？
特别提示：尤其适用于在常规柠檬酸钠（pH 6.0）中修复效果欠佳的疑难抗原。典型适合：① 核内顽固抗原（NF-κB p65、HIF-1α、某些转录因子）；② 某些 phospho 抗体；③ GPCR / 多次跨膜蛋白；④ 过度固定（>72 h）样品；⑤ CD 系列特定 epitope。优化策略：先 pH 6.0 → 失败再 pH 8.0 → 仍失败试 pH 9.0。
完整流程参数？
① 样本预处理：石蜡切片脱蜡复水 + 冰冻切片 PBS 洗 5 min；② 热修复：1× 修复液预热 95–100℃，浸入切片，加热 10–20 min（标准 15 min）——水浴锅 / 微波炉中低功率 / 压力锅喷气后维持 2–5 min；③ 冷却：自然冷却 20–30 min 至室温——严禁骤冷；④ 洗涤：PBS 洗 2–3 次每次 3–5 min；⑤ 后续封闭 + 免疫染色。
工作液配制（100×）？
工作液配制（1×）：使用去离子水或蒸馏水将 100× 储备液稀释 100 倍。示例：取 10 mL 100× 母液 + 990 mL 去离子水，混合均匀即得 1× 工作液。预热至 95–100℃。
本产品的核心特点？
本产品是一款高倍浓缩（100×）的 EDTA 抗原修复储备液，专为免疫组化（IHC）和免疫荧光（IF）实验前的表位暴露而设计。修复机制：醛类固定剂会形成亚甲基桥交联。本品通过 EDTA 的强力螯合作用，在热诱导（HIER）条件下有效打破交联，并去除可能屏蔽表位的金属离子，协同增强抗原暴露效果。应用优势：pH 8.0 的缓冲体系处于中性偏碱范围，尤其适用于在常规柠檬酸钠（pH 6.0）中修复效果欠佳的疑难抗原。——本品是 ES-8329（50×）的 100× 浓缩版。
