ES-8345 柠檬酸钠抗原修复液(100×, pH 6.0)

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ES-8345 柠檬酸钠抗原修复液(100×, pH 6.0)
货号 (Catalog Number): ES-8345

产品描述

【保存条件】

室温保存,有效期12个月


【概述】

修复原理:醛类固定剂(如甲醛、多聚甲醛)会在蛋白质间形成“亚甲基桥”交联,从而遮蔽抗原表位。本产品通过热诱导(HIER)结合经典的pH 6.0柠檬酸钠缓冲体系,有效打破交联,恢复抗体结合能力。

产品特点:性能稳定,性质温和,在保证高效修复的同时能够最大限度地保存组织细胞的形态结构。

适用范围:适用于石蜡切片、冰冻切片及细胞爬片的抗原修复。


实验前准备

1. 工作液配制 (1×) 使用去离子水或蒸馏水将100×储备液稀释100倍。
示例:取10 mL 100×母液加入990 mL去离子水中,混合均匀即得1×工作液。

2. 预热:建议在使用前将1×工作液预热至95-100°C,以确保修复的一致性。


【操作方法】

1. 样本预处理
石蜡切片:二甲苯3次,每次3-5min→无水乙醇2次,每次3-5min→ 95%乙醇1次,3-5min→ 90%乙醇1次,3-5min→ 75%乙醇1次,3-5min→蒸馏水洗2次,每次3-5min,确保切片彻底水化。
冰冻切片:用免疫染色洗涤液(如PBS)浸洗5 min。

2. 热修复步骤(核心步骤)

① 将预处理后的切片浸入已预热至95–100°C的1×修复液中。

② 加热维持:持续加热10–30 min(标准推荐时长为15min)。
水浴锅:温度最均匀,适合大规模切片修复。
微波炉:加热速度快,但必须防止暴沸导致切片干涸或脱落。建议使用中低功率。
压力锅:修复强度最高。喷气后维持2–5 min即可(需自然泄压)。

3. 冷却与后处理(防脱片关键)

① 自然冷却:修复结束后,将容器取出,在室温下自然冷却20–30 min至室温。
警告:严禁直接放入冷水中骤冷,否则极易导致组织脱片。

② 洗涤:用免疫染色洗涤液(如PBS)洗涤2–3次,每次3–5 min。

③ 后续实验:直接进入封闭或内源性酶阻断步骤。


【注意事项】

1. 最佳参数:修复时间受组织类型和固定时长影响。若信号弱可延长至 30 min;若背景强或组织脱落,请尝试缩短时间或降低修复温度。

2. 安全防护操作时请佩戴实验服、一次性乳胶手套。

3. 科研用途:本产品仅限于科研使用,不得用于临床诊断、食品或药品。

产品规格

货期
现货
规格
100mL、500mL

应用领域

本产品适用于ES-8345、抗原修复、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。

存储条件

室温保存

品牌: ECOTOP SCIENTIFIC

常见问题 (FAQ)

试剂如何保存?

室温保存,有效期 12 个月。

水浴 vs 微波炉 vs 压力锅?

一致:① 水浴锅:温度最均匀,适合大规模切片修复;② 微波炉:加热速度快,必须防止暴沸——建议中低功率;③ 压力锅:修复强度最高,喷气后维持 2–5 min(需自然泄压)。

参数优化建议?

提示:最佳参数:修复时间受组织类型和固定时长影响。若信号弱可延长至 30 min;若背景强或组织脱落,请尝试缩短时间或降低修复温度。——首次实验做时间梯度优化。

可用于哪些应用场景?

适用所有 pH 6.0 修复应用:① 大规模临床病理 IHC;② 多中心标准化研究;③ 科研常规 IHC / IF;④ 多重荧光染色;⑤ 细胞爬片;⑥ 教学实验中心大批量使用。

与浓缩版的优势?

100× 浓缩版的核心价值:① 运输 / 储存空间节省——同样 1 L 工作液只需 10 mL 浓缩液(vs ES-8327 50× 需 20 mL);② 大规模 IHC 实验室经济——单瓶 100 mL 可配 10 L 工作液(足够 ~6,000 张切片修复);③ 多中心研究运输方便。

经典 pH 6.0 适合的抗原?

柠檬酸钠 pH 6.0 是绝大多数临床病理标志物的金标准修复条件:详见 ES-8327 说明(适用 Ki-67、p53、ER、PR、HER2、CD 系列等大多数抗体)。本品(100× 浓缩)与 ES-8327(50×)配方相同,唯一差异是浓缩倍数。

完整流程参数?

① 样本预处理:石蜡切片脱蜡复水 + 冰冻切片 PBS 洗 5 min;② 热修复:预热 1× 修复液至 95–100℃,浸入切片,加热 10–30 min(标准 15 min)——水浴锅 / 微波炉中低功率 / 压力锅喷气后维持 2–5 min;③ 冷却:自然冷却 20–30 min 至室温——严禁骤冷;④ 洗涤:PBS 洗 2–3 次每次 3–5 min;⑤ 后续封闭 + 免疫染色。

工作液配制(100×)?

工作液配制(1×):使用去离子水或蒸馏水将 100× 储备液稀释 100 倍。示例:取 10 mL 100× 母液 + 990 mL 去离子水,混合均匀即得 1× 工作液。预热至 95–100℃。

与 ES-8326(1×)/ ES-8327(50×)/ ES-8325(改良版)的关键区别?

选择:① 大规模 IHC / 多中心研究、控制成本 → ES-8345(本品);② 中等规模 → ES-8327;③ 偶尔使用 → ES-8326;④ 疑难抗原 → ES-8325 改良。

本产品的核心特点?

修复原理:醛类固定剂会形成亚甲基桥交联。本产品通过热诱导(HIER)结合经典的 pH 6.0 柠檬酸钠缓冲体系,有效打破交联。产品特点:性能稳定,性质温和,在保证高效修复的同时能够最大限度地保存组织细胞的形态结构。——本品是 ES-8327(50×)的100× 浓缩版,最经济的柠檬酸钠 pH 6.0 修复液。

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【保存条件】

室温保存,有效期12个月


【概述】

修复原理:醛类固定剂(如甲醛、多聚甲醛)会在蛋白质间形成“亚甲基桥”交联,从而遮蔽抗原表位。本产品通过热诱导(HIER)结合经典的pH 6.0柠檬酸钠缓冲体系,有效打破交联,恢复抗体结合能力。

产品特点:性能稳定,性质温和,在保证高效修复的同时能够最大限度地保存组织细胞的形态结构。

适用范围:适用于石蜡切片、冰冻切片及细胞爬片的抗原修复。


实验前准备

1. 工作液配制 (1×) 使用去离子水或蒸馏水将100×储备液稀释100倍。
示例:取10 mL 100×母液加入990 mL去离子水中,混合均匀即得1×工作液。

2. 预热:建议在使用前将1×工作液预热至95-100°C,以确保修复的一致性。


【操作方法】

1. 样本预处理
石蜡切片:二甲苯3次,每次3-5min→无水乙醇2次,每次3-5min→ 95%乙醇1次,3-5min→ 90%乙醇1次,3-5min→ 75%乙醇1次,3-5min→蒸馏水洗2次,每次3-5min,确保切片彻底水化。
冰冻切片:用免疫染色洗涤液(如PBS)浸洗5 min。

2. 热修复步骤(核心步骤)

① 将预处理后的切片浸入已预热至95–100°C的1×修复液中。

② 加热维持:持续加热10–30 min(标准推荐时长为15min)。
水浴锅:温度最均匀,适合大规模切片修复。
微波炉:加热速度快,但必须防止暴沸导致切片干涸或脱落。建议使用中低功率。
压力锅:修复强度最高。喷气后维持2–5 min即可(需自然泄压)。

3. 冷却与后处理(防脱片关键)

① 自然冷却:修复结束后,将容器取出,在室温下自然冷却20–30 min至室温。
警告:严禁直接放入冷水中骤冷,否则极易导致组织脱片。

② 洗涤:用免疫染色洗涤液(如PBS)洗涤2–3次,每次3–5 min。

③ 后续实验:直接进入封闭或内源性酶阻断步骤。


【注意事项】

1. 最佳参数:修复时间受组织类型和固定时长影响。若信号弱可延长至 30 min;若背景强或组织脱落,请尝试缩短时间或降低修复温度。

2. 安全防护操作时请佩戴实验服、一次性乳胶手套。

3. 科研用途:本产品仅限于科研使用,不得用于临床诊断、食品或药品。

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