产品描述
【保存条件】
室温保存，有效期12个月
【概述】
本产品是一款经过特殊配方改良的柠檬酸钠抗原修复储备液（50×），专为提升免疫组化（IHC）及免疫荧光（IF）实验的染色灵敏度而设计。
修复原理：醛类固定剂会在蛋白质间形成“亚甲基桥”交联，从而遮蔽抗原表位。本产品通过热诱导（HIER）结合优化的pH 6.0缓冲体系，有效打破交联。
改良特性：特别添加了高渗透性去垢剂。该组分在加热过程中能显著降低液体表面张力，促进修复液深入组织微孔隙，使抗原暴露更加均匀、彻底，同时有助于降低非特异性背景染色。
适用范围：适用于石蜡切片、冰冻切片及细胞爬片的抗原修复。
【实验前准备】
1. 工作液配制 (1×) ：使用去离子水或蒸馏水将50×储备液稀释50倍。
示例：取10 mL 50×母液加入490 mL去离子水中，混合均匀即得1×工作液。
2. 预热：建议在使用前将1×工作液预热至95-100°C，以确保修复的一致性。
【操作方法】
1. 样本预处理
石蜡切片：二甲苯3次，每次3-5min→无水乙醇2次，每次3-5min→ 95％乙醇1次，3-5min→ 90%乙醇1次，3-5min→ 75％乙醇1次，3-5min→蒸馏水洗2次，每次3-5min，确保切片彻底水化。
冰冻切片：用免疫染色洗涤液（如PBS）浸洗5 min。
2. 热修复步骤（核心步骤）
① 将预处理后的切片浸入已预热至95–100°C的1×修复液中。
② 加热维持：持续加热10–30 min（标准推荐时长为15min）。
水浴锅：温度最均匀，适合大规模切片修复。
微波炉：加热速度快，但必须防止暴沸导致切片干涸或脱落。建议使用中低功率。
压力锅：修复强度最高。喷气后维持2–5 min即可（需自然泄压）。
3. 冷却与后处理（防脱片关键）
① 自然冷却：修复结束后，将容器取出，在室温下自然冷却20–30 min至室温。
警告：严禁直接放入冷水中骤冷，否则极易导致组织脱片。
② 洗涤：用免疫染色洗涤液（如PBS）洗涤2–3次，每次3–5 min。
③ 后续实验：直接进入封闭或内源性酶阻断步骤。
【注意事项】
1. 正常现象说明：本产品含有特殊去垢剂，加热过程中可能会产生极其细密的气泡，使液体呈现均匀浑浊状，这属于正常物理现象，有助于抗原暴露，请放心使用。
2. 最佳参数：修复时间受组织类型和固定时长影响。若信号弱可延长至30 min；若背景强或组织脱落，请尝试缩短时间或降低修复温度。
3. 安全防护：操作时请佩戴实验服、一次性乳胶手套。本产品仅限于科研使用，不得用于临床诊断、食品或药品。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100mL、500mL
应用领域
本产品适用于ES-8325、抗原修复、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
室温保存
常见问题 (FAQ)
防脱片建议？
通用建议：① 使用多聚赖氨酸或APES（3-氨基丙基三乙氧基硅烷）涂层的防脱玻片；② 严禁骤冷；③ 加热过程中保证修复液完全覆盖切片；④ 每次操作温和。
不同 pH 修复液如何选择？
pH 选择是抗原修复成功的关键：pH 6.0 的柠檬酸钠系列（本品 / ES-8326/8327/8345）适合大多数抗原，是首选方案；pH 7.4 的 SDS 化学修复液（ES-8310）无需加热，适合冰冻切片的快速修复；pH 8.0 的 EDTA 系列（ES-8328/8329/8349）适合高度交联抗原；pH 9.0 的 Tris-EDTA 系列（ES-8321/8322/8342）适合常规修复效果不佳的顽固抗原；pH 10.0 的 Tris 系列（ES-8318）碱性最强，用于特殊抗原的修复。总体原则是从低 pH 开始尝试，效果不佳再逐步提高。
参数优化建议？
提示：最佳参数：修复时间受组织类型和固定时长影响。若信号弱可延长至 30 min；若背景强或组织脱落，请尝试缩短时间或降低修复温度。——首次实验建议梯度优化（10/15/20/25/30 min）。
可用于哪些应用场景？
适用所有需要 pH 6.0 修复的应用：① 大多数细胞核内抗原（转录因子、组蛋白等）；② 细胞质蛋白；③ 膜蛋白胞外区；④ 多重荧光 IF；⑤ 疑难抗原研究；⑥ 配合 ES-8324（复合）做对比实验。经典场景：Ki-67、p53、ER、PR、HER2、Bcl-2 等大多数临床病理标志物推荐 pH 6.0 修复。
去垢剂在加热中的现象？
本产品含有特殊去垢剂，加热过程中可能会产生极其细密的气泡，使液体呈现均匀浑浊状，这属于正常物理现象，有助于抗原暴露，请放心使用。——这是与标准柠檬酸钠（ES-8327）的关键差异；不要误以为是污染或变质。
完整流程参数？
① 样本预处理：石蜡切片脱蜡复水 + 冰冻切片 PBS 洗涤；② 热修复（核心）：预热 1× 修复液至 95–100℃，浸入切片，加热维持 10–30 min（标准 15 min）——水浴锅 / 微波炉中低功率 / 压力锅喷气后维持 2–5 min；③ 冷却：自然冷却 20–30 min 至室温——严禁骤冷；④ 洗涤：PBS 洗 2–3 次每次 3–5 min；⑤ 后续封闭 + 免疫染色。
工作液配制（50×）？
工作液配制（1×）：使用去离子水或蒸馏水将 50× 储备液稀释 50 倍。示例：取 10 mL 50× 母液 + 490 mL 去离子水，混合均匀即得 1× 工作液。使用前预热至 95–100℃。
与 ES-8327（标准柠檬酸钠 50×）的关键区别？
ES-8325（本品，改良版）：① 添加高渗透性去垢剂——降低表面张力，抗原暴露更均匀彻底，背景更低；② 适合疑难抗原 + 注重细节的高质量染色。ES-8327（标准版）：① 标准柠檬酸钠配方；② 性能稳定温和，性价比更高。选择：① 追求最佳染色效果 / 信号弱的抗体 → ES-8325（本品）；② 常规 IHC → ES-8327。
本产品的核心特点？
本产品是一款经过特殊配方改良的柠檬酸钠抗原修复储备液（50×）。修复原理：醛类固定剂会在蛋白质间形成亚甲基桥交联，本产品通过热诱导（HIER）结合优化的 pH 6.0 缓冲体系，有效打破交联。改良特性：特别添加了高渗透性去垢剂。该组分在加热过程中能显著降低液体表面张力，促进修复液深入组织微孔隙，使抗原暴露更加均匀、彻底，同时有助于降低非特异性背景染色。适用范围：石蜡切片、冰冻切片及细胞爬片。
